姜黄素对多发性骨髓瘤MM.1R的作用及机制研究

发布时间：2017-07-04 19:15

  本文关键词：姜黄素对多发性骨髓瘤MM.1R的作用及机制研究

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【摘要】：研究目的： 研究姜黄素对多发性骨髓瘤耐地塞米松(MM.1R)细胞的增殖及凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制。 研究方法： 采用四甲基偶氮唑(MTT)比色法检测不同浓度姜黄素对MM.1R细胞作用不同时间后增殖的影响；利用Annexin V/PI双染法流式细胞仪检测不同浓度的姜黄素对MM.1R细胞凋亡的影响；用蛋白质印迹法(Western Blotting)检测不同浓度的姜黄素对MM.1R细胞作用后,凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9,促凋亡蛋白Bax,凋亡抑制蛋白XIAP、CIAP的表达；用蛋白质印迹法(Western Blotting)检测不同浓度的姜黄素对MM.1R细胞作用后,信号传导通路MAPK、 ERK、AKT和NF-κB活化相关蛋白的表达；用蛋白质印迹法(Western Blotting)同时检测不同浓度的姜黄素对MM.1R细胞作用后,耐药相关蛋白galectin-3、IL-6、Hsp27的表达。 研究结果： 1.分别以浓度为0、10、20、40ug/ml的姜黄素作用于MM.1R细胞24、48和72小时,结果显示：姜黄素(10ug/ml)作用于MM.1R细胞24、48和72小时后,细胞活性减低,呈剂量-时间相关性；姜黄素(20、40μg/ml)作用于MM.1R细胞24、48和72小时后,细胞活性明显降低,与对照组(0ug/ml)比较,差异具有统计学意义(p0.05),且其抑制作用随浓度及时间增加而增加。 2.利用Annexin V/PI双染法流式细胞仪检测分别以浓度为0、10、20、40ug/ml的姜黄素作用24h后的MM.1R细胞,早期凋亡率分别为2.35±1.44%、3.06±2.18%、10.16±3.47%、16.72±4.74%,姜黄素在浓度为20、40ug/ml时可明显诱导MM.1R细胞的凋亡,与对照组(0ug/ml)比较,差异具有统计学意义(p0.05),且其诱导凋亡的作用随着浓度的增加而增加。 3.用浓度分别为10、20、40ug/ml的姜黄素对MM.1R细胞作用24小时后,Western Blotting法检测发现,与空白对照(0ug/ml)相比,姜黄素(20.40ug/ml)作用于MM.1R细胞后,凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-8表达水平明显增加,而Caspase-9的表达水平增加较弱,促凋亡蛋白Bax表达水平明显增高,凋亡抑制蛋白XIAP的表达水平明显下降。 4.用浓度分别为10、20、40ug/ml的姜黄素对MM.1R细胞作用24小时后,Western Blotting法检测结果发现,与空白对照(0ug/ml)相比信号通路活化相关蛋白磷酸化MAPKp38、磷酸化ERK p42/44、磷酸化AKT以及磷酸化NF-κBp65的表达均明显下降。 5.用Western Blotting法检测用浓度分别为10、20.40ug/ml的姜黄素对MM.1R细胞作用24小时后,与空白对照(0ug/ml)相比,耐药相关蛋白IL-6、galectin-3以及Hsp27的表达均明显下降。 研究结论： 1.姜黄素可抑制MM.1R细胞的增殖,并诱导其凋亡。 2.姜黄素对MM.1R细胞的作用机制是抑制MAPK、ERK、AKT蛋白激酶以及NF-κB转录因子等信号通路的活化,并通过依赖Caspase的级联反应诱导其凋亡。 3.姜黄素可对MM.1R细胞的耐药性有逆转作用。
【关键词】：多发性骨髓瘤 姜黄素 细胞凋亡 MM.1R细胞 耐药
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R733.3
【目录】：

• 致谢4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 缩略语10-12
• 1 研究背景12-15
• 2 材料与方法15-19
• 2.1 研究对象15
• 2.2 主要试剂与仪器15-16
• 2.3 主要实验步骤16-18
• 2.4 统计学处理18-19
• 3 结果19-27
• 3.1 姜黄素对MM.1R细胞的增殖有抑制作用19-20
• 3.2 姜黄素可诱导MM.1R细胞凋亡20-22
• 3.3 姜黄素可上调MM.1R细胞凋亡蛋白及促凋亡蛋白的表达,下调抗凋亡蛋白的表达22-24
• 3.4 姜黄素可抑制MM.1R细胞多条信号通路的活化24-26
• 3.5 姜黄素下调MM.1R细胞耐药相关蛋白的表达26-27
• 4 讨论27-32
• 5 结论32-33
• 参考文献33-37
• 综述37-48
• 参考文献44-48
• 作者简历及在学期间所取得的科研成果48

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 张梅春;赵子文;曾军;何卫国;黄侃;;姜黄素对耐顺铂人肺腺癌细胞Survivin表达及其化疗敏感性的影响[J];中华肿瘤防治杂志;2007年19期

2 吕靖;英焕春;戴进;;姜黄素增强卵巢癌耐药细胞株COC1/DDP对顺铂敏感性的研究[J];实用医学杂志;2009年08期

3 王磊;柯红;王一羽;任东明;;姜黄素逆转P糖蛋白介导的膀胱肿瘤多药耐药的实验研究[J];时珍国医国药;2009年03期

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本文编号：519028