激光免疫疗法杀伤鳞癌细胞促进DAMPs释放的最佳温度研究

发布时间：2017-07-07 13:15

  本文关键词：激光免疫疗法杀伤鳞癌细胞促进DAMPs释放的最佳温度研究

  更多相关文章： 皮肤鳞状细胞癌 激光免疫疗法 光热治疗 光热梯度 损伤相关分子模式

【摘要】：背景皮肤鳞状细胞癌是一种常见的皮肤恶性肿瘤,治疗棘手。激光免疫疗法是一种联合光热治疗与免疫佐剂的新型肿瘤治疗方法。光热治疗时肿瘤组织内产生光热梯度,通过热直接损伤肿瘤细胞,或使其释放损伤相关分子模式分子(Danger Associated Molecular Patterns, DAMPs),诱导细胞免疫。但是激光免疫疗法治疗过程中不同温度对皮肤鳞癌的杀伤及诱导DAMPs释放的强度尚不清楚。本课题拟通过探索激光免疫疗法杀伤鳞癌细胞促进DAMPs释放的最佳温度,为进一步优化激光免疫疗法提供理论依据。方法体内实验,采用紫外线诱导SKH-1无毛小鼠建立免疫功能正常的无毛小鼠皮肤鳞癌模型,随机分成对照组、激光组、咪喹莫特组和激光免疫组,各组给予相应处理后观察各组小鼠背部瘤体变化、生存率。体外实验,采用CCK8、流式细胞术、蛋白印迹、Elisa分别检测37℃,40℃、45℃、50℃、55℃、60℃处理1Omin后的A431细胞的增殖、凋亡坏死、DAMPs (HSP70、HSP90、HMGB1)表达情况。结果体内实验显示,与对照组相比,激光组与咪喹莫特组能延缓小鼠瘤体生长,激光免疫组能明显延缓小鼠瘤体生长,延长小鼠生存率。体外实验显示,低温(37℃,40℃)对肿瘤细胞生长无抑制作用,对细胞内外HSP70、HSP90、HMGB1的表达量无明显影响；中等温度(45℃,50℃)对肿瘤细胞生长有明显抑制作用,明显促进肿瘤细胞凋亡与坏死,都能刺激肿瘤细胞释放大量HSP70、HSP90、HMGB1,其中,45℃明显促进细胞内表达HSP70、HSP90、HMGB1,50℃明显促进细胞外HSP70. HSP90、HMGB1的释放量：高温(55℃,60℃)直接促使肿瘤细胞大量死亡,细胞内外表达HSP70、HSP90、HMGB1明显减少。结论激光免疫疗法是治疗皮肤鳞癌的一种有效治疗方法,50℃损伤鳞癌细胞同时促进DAMPS释放的能力最强,可能是一个较好的治疗温度。
【关键词】：皮肤鳞状细胞癌 激光免疫疗法 光热治疗 光热梯度 损伤相关分子模式
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R739.5
【目录】：

• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 缩略词表10-11
• 第一部分 紫外线诱导皮肤鳞癌小鼠模型的建立与优化11-18
• 1 前言11
• 2 实验材料11-12
• 3 实验方法12-13
• 4 实验结果13-16
• 5 讨论16
• 6 参考文献16-18
• 第二部分 激光免疫疗法治疗小鼠皮肤鳞癌疗效观察18-28
• 1 前言18-19
• 2 实验材料19-20
• 3 实验方法20-21
• 4 结果21-24
• 5 讨论24-25
• 6 结论25
• 7 参考文献25-28
• 第三部分 不同温度对A431细胞的死亡及DAMPs释放的影响28-47
• 1 前言28-30
• 2 实验材料30-31
• 3 实验方法31-36
• 4 结果36-43
• 5 讨论43-45
• 6 结论45
• 7 参考文献45-47
• 附录47-48
• 致谢48-50
• 综述50-57
• 参考文献54-57

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本文编号：530346