miR-217与MAPK1在胃癌中的表达及调控研究
本文关键词:miR-217与MAPK1在胃癌中的表达及调控研究
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【摘要】:目的:研究胃癌中miR-217与丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)之间的表达关系,生物信息学分析MAPK1是否是miR-217的靶基因,阐明miR-217调控MAPK1的分子机制。方法:首先通过生物信息学软件,发现20个miRNAs可能与MAPK1结合;其中,miR-217与MAPK1结合可能性最大。在58例胃癌组织和22例癌旁胃黏膜组织中,通过免疫组化检测MAPK1的表达与胃癌临床病理特征的关系;通过q RT-PCR检测miR-217的表达,Western blot检测MAPK1的表达,分析两者之间的表达的关系;在不同分化程度的胃癌细胞株中,q RT-PCR检测miR-217的表达,Western blot检测MAPK1表达,分析miR-217和MAPK1表达及其与胃癌发生的关系;在重组细胞株SGC-7901-miR-217 mimics、SGC-7901-miR-Scramble、SGC-7901-miR-217-PM、SGC-7901中,q RT-PCR检测miR-217的表达,western blot检测MAPK1的表达,分析miR-217是否调控MAPK1表达,证实MAPK1是miR-217的靶基因。结果:(1)生物信息学方法发现与MAPK1结合的miRNAs有20个;miR-217与MAPK1结合的可能性最大,MAPK1可能是miR-217的靶基因。(2)MAPK1在胃癌组织中表达阳性率为74.1%(43/58),癌旁胃黏膜组织中为13.6%(3/22),两者之间的阳性率比较差异有统计学意义(P0.05)。(3)MAPK1在胃癌组织中表达与年龄、性别无关(P0.05);MAPK1表达阳性率在中高分化胃癌中为48.0%低于低分化胃癌的93.9%;在临床I+II期中阳性率为57.7%低于临床III+IV期的87.5%;在有淋巴结转移癌中阳性率为90.6%高于无淋巴结转移癌的53.8%;在有远处转移者中阳性率为87.1%高于无远处转移者中的39.3%,以上差异均有统计学意义(P0.05)。(4)miR-217的表达水平与年龄、性别无关(P0.05);miR-217的表达水平在低分化胃癌中低于中高分化胃癌,在有淋巴结转移和远处转移胃癌患者中低于无转移的胃癌患者(P0.05)。(5)miR-217在胃癌中的表达明显低于癌旁中的表达(P0.05);MAPK1在胃癌中的表达明显高于癌旁中的表达(P0.05)。(6)低分化人胃癌细胞株BGC-823中MAPK1高表达,而miR-217表达水平低;中、高分化人胃癌细胞株SGC-7901、MKN-28中MAPK1低表达,而miR-217表达水平高(P0.05)。不同分化程度胃癌细胞株中,MAPK1表达水平有显著性差异;miR-217表达水平也有显著性差异(P0.05)。(7)转染miR-217 mimics SGC-7901细胞中miR-217表达增高,miR-217在SGC-7901细胞中可降低MAPK1的表达。结论:(1)胃癌中MAPK1表达高于正常胃粘膜组织,而miR-217表达低于正常胃粘膜组织,MAPK1高表达和miR-217低表达可能与胃癌的发生发展有关。(2)miR-217和MAPK1的表达水平与胃癌细胞的分化程度有关;miRNA-217可下调MAPK1表达。
【关键词】:miR-217 胃癌 分化 MAPK1 生物信息学
【学位授予单位】:南华大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R735.2
【目录】:
- 摘要4-6
- Abstract6-10
- 第1章 前言10-14
- 第2章 材料与方法14-20
- 2.1 材料14-16
- 2.2 实验方法16-20
- 第3章 结果20-26
- 第4章 讨论26-32
- 第5章 结论32-34
- 参考文献34-40
- 主要缩略英文索引40-42
- 综述 晚期胃癌的靶向治疗进展42-58
- 参考文献49-58
- 在读期间发表的论文58-60
- 致谢60
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