过表达GRK6减轻骨癌痛大鼠痛觉高敏的研究

发布时间：2017-07-16 04:01

  本文关键词：过表达GRK6减轻骨癌痛大鼠痛觉高敏的研究

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【摘要】：目的1.初步阐明骨癌痛的行为学特点及组织学的改变;2.探讨GRK6参与骨癌痛的调控作用。方法1.骨癌痛模型的建立与验证:胫骨内注射大鼠(180-220g SD雌性)Walker256乳腺癌细胞,建立骨癌痛大鼠模型(BCP)。分别在建模前后运用VFF(Von Frey filaments)、热痛仪及双足平衡实验(Weight Bearing Difference)行为学方法来测定大鼠的疼痛反应。2.胫骨特异性DRG神经元水平的研究:应用Western Blotting和RT-PCR技术检测骨癌模型胫骨特异性DRG中GRK6分子表达水平的改变;免疫组织化学用来检测GRK6在胫骨特异性DRG中的分布、共标情况。3、GRK6对骨癌痛的作用:鞘内注射慢病毒LV-GRK6以增加DRG水平GRK6的表达;运用Western Blotting方法验证GRK6过表达的效果;行为学检测过表达GRK6后对骨癌痛的影响。结果1.胫骨内接种大鼠Walker256乳腺癌细胞建立骨癌痛大鼠模型,显著降低骨癌大鼠的机械性痛、热痛阈值,增大双足平衡实验的双足承重差异;2.骨癌大鼠胫骨特异性DRG神经元中GRK6在mi RNA及蛋白水平表达显著降低,免疫组化显示GRK6主要分布在DRG中的神经元中;3.鞘内注射慢病毒LV-GRK6上调骨癌大鼠胫骨特异性DRG中GRK6的表达。缓解了骨癌痛大鼠的痛觉高敏。结论1、胫骨内注射大鼠Walker256乳腺癌细胞可以稳定地建立骨癌痛大鼠模型;2、GRK6参与了骨癌痛的调节;GRK6在DRG组织中主要分布在神经元中;3、过表达GRK6可以显著缓解骨癌痛大鼠的痛觉高敏;总之,GRK6可能成为骨癌痛新的治疗靶点。
【关键词】：骨癌痛 GRK6 背根神经节(DRG) 痛觉高敏
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.9
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 第一章 引言10-12
• 第二章 材料与方法12-22
• 1.1 实验对象12
• 1.2 主要试剂12-14
• 1.3 主要仪器14-15
• 1.4 主要的实验方法15-22
• 1.4.1 骨癌痛模型的建立15-16
• 1.4.2 行为学实验16-17
• 1.4.3 蛋白表达测定（Western Blotting）17-18
• 1.4.4 免疫组化检测GRK6在DRG组织中的定位18-21
• 1.4.7 X-Ray成像21
• 1.4.8 统计分析21-22
• 第三章 实验结果22-28
• 1）骨癌痛大鼠模型的成功建立22-23
• 2）骨癌痛模型组大鼠机械痛敏(PWT)、热痛敏(PWL)阈值降低及双足平衡（WBD）差异增大23-24
• 3）GRK6在骨癌痛模型的胫骨特异性DRG中MRNA与蛋白表达水平均下降24-25
• 4）GRK6在DRG组织中主要分布在神经元中25
• 5）鞘内注射慢病毒LV-GRK6上调骨癌大鼠胫骨特异性DRG中GRK6的表达25-26
• 6）过表达GRK6可以缓解骨癌大鼠的骨癌痛26-28
• 第四章 讨论28-30
• 参考文献30-33
• 第五章 结论与展望33-34
• 综述34-42
• 一、乳腺癌骨转移的发生机制34-35
• 二、乳腺癌骨转移的分子机制35
• 三、乳腺癌骨转移的发生率及常见部位35-36
• 四、乳腺癌骨转移的诊断36
• 五、乳腺癌骨转移的治疗36-38
• 参考文献38-42
• 致谢42-43

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 Ya-Ping Li;;GRK6 expression in patients with hepatocellular carcinoma[J];Asian Pacific Journal of Tropical Medicine;2013年03期

2 姚暄;贾立群;谭煌英;向青;徐波;李红艳;刘轩;潘琳;郭艳茹;高福云;;胫骨内接种建立乳腺癌骨转移大鼠模型的特点[J];癌症进展;2013年01期

3 王文华;;内分泌治疗与化疗对乳腺癌骨转移的疗效比较[J];中外医疗;2012年36期

4 杨晓辉;蒋绍香;朱前升;;大分割与常规分割放疗对恶性肿瘤骨转移癌痛的疗效观察[J];临床和实验医学杂志;2012年20期

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本文编号：546939