miR-21在人喉鳞状细胞癌中的表达及对喉鳞癌细胞增殖和凋亡机制的研究

发布时间：2017-07-17 21:43

  本文关键词：miR-21在人喉鳞状细胞癌中的表达及对喉鳞癌细胞增殖和凋亡机制的研究

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【摘要】：背景喉癌在头颈部肿瘤中的发病率为13.9%,仅次于鼻咽癌以及鼻腔癌,居于第三位,且近年来其发病率呈逐年增高趋势。大量学者研究发现,喉癌的发生是一个多种癌基因和抑癌基因参与,多个阶段级联反应的过程,其发生和发展可能是由于癌基因激活、抑癌基因缺失或者突变体产生而使肿瘤细胞过度增殖所致：此外还可能是由于细胞凋亡受到抑制从而促使恶性肿瘤细胞存活的结果,当细胞增殖和／或凋亡的调节因素发生变化时,将会造成恶性肿瘤的发生。目的本研究通过分析miR-21 mRNA以及Bcl-2 mRNA在人喉鳞状细胞癌组织中的表达,同时对喉鳞癌患者癌组织中Bcl-2蛋白的表达与患者临床病理参数的相关性进行分析,探讨miR-21表达变化对Bcl-2的影响以及对喉鳞癌Hep-2细胞增殖、凋亡和侵袭的作用,旨在为了解喉鳞癌的发生和发展机制并为喉鳞癌的临床诊断及靶向治疗提供可靠依据。方法(1)采用实时荧光定量PCR的方法检测喉鳞癌患者癌组织及其相应癌旁正常组织中miR-21和Bcl-2 mRNA的表达情况；采用western blot法检测喉鳞癌患者癌组织及其相应癌旁正常组织中Bcl-2蛋白的表达情况；分析喉鳞癌患者癌组织中Bcl-2蛋白的表达与患者临床病理参数的相关性。(2)将miR-21 inhibitor转染人喉鳞癌Hep-2细胞；检测转染后细胞中Bcl-2蛋白的表达情况；MTT法检分别检测转染后48 h细胞的增殖情况；Annexin V-fitc/pi双染色及流式细胞仪分别检测转染后0h、24 h、48 h、72 h、96 h时细胞的凋亡情况；Transwe Ⅱ小室法检测转染细胞侵袭能力的影响。结果(1)miR-21和Bcl-2 mRNA在喉鳞癌组织中的表达显著高于其在癌旁相应正常组织中的表达；Bcl-2蛋白在喉鳞癌组织中的表达显著高于其在相应癌旁正常组织中的表达；Bcl-2蛋白表达与喉鳞癌患者临床分期、淋巴结转移以及肿瘤分化程度密切相关；(2)转染miR-21 inhibitor后Bcl-2蛋白的表达明显减少：Hep-2细胞的增殖和侵袭能力降低,细胞凋亡明显上升。结论miR-21可能经由上调Bcl-2的表达来发挥促进喉鳞癌细胞增殖和侵袭,抑制细胞凋亡的作用,提示其可能为一种癌基因参与了喉鳞癌的发生和发展过程,可将其作为肿瘤标志物应用于喉鳞癌临床检测、预后判断以及靶向治疗中。
【关键词】：喉鳞状细胞癌 miR-21 Bcl-2
【学位授予单位】：新乡医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R739.65
【目录】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 第一章 喉鳞状细胞癌组织中MIR-21和BCL-2的表达及临床意义9-30
• 前言9-10
• 1. 材料与方法10-22
• 1.1 实验材料10-15
• 1.2 实验方法15-22
• 2 结果22-24
• 3 讨论24-29
• 4 小结29-30
• 第二章 MIR-21对人喉鳞状细胞癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响30-43
• 前言30-31
• 1. 材料与方法31-36
• 2 结果36-40
• 3 讨论40-42
• 4 小结42-43
• 参考文献43-49
• 综述49-62
• 综述参考文献56-62
• 附录62-64
• 攻读学位期间发表文章情况64-65
• 致谢65-66
• 个人简历66

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本文编号：554728