JQ1抑制人骨髓间质干细胞上清促胃癌作用

发布时间：2017-07-30 19:13

  本文关键词：JQ1抑制人骨髓间质干细胞上清促胃癌作用

  更多相关文章： 人骨髓间质干细胞 胃癌 JQ1

【摘要】：目的:许多研究表明人骨髓来源的间质干细胞与肿瘤的生长有关。c-Myc作为原癌基因,与多种肿瘤的发生发展有着密切的联系,JQ1作为c-Myc抑制剂,能抑制多种肿瘤的生长。近而体内外研究JQ1能否抑制由h BM-MSCs-CM所引起的促肿瘤的作用。方法:采用Ficoll分离液分离人骨髓单个核细胞,贴壁分离培养h BM-MSCs,用相差显微镜观察其形态学,并利用流式细胞仪检测h BM-MSCs的表面标记;收集h BM-MSCs培养的上清(h BM-MSCs-CM)。分别用H-DMEM,DMSO,h BM-MSCs-CM,JQ1,JQ1+h BM-MSCs-CM处理MGC-803细胞48h,检测JQ1对胃癌细胞株(MGC-803细胞)增殖能力、迁移能力和细胞周期的影响以及对c-Myc和干性相关标志物(Sall4,Nanog,Oct4)表达的影响。同时构建了30只BALB/c-nu/nu裸鼠异种移植瘤模型,观察每组肿瘤生长状况。采用了MTT法和克隆形成实验检测增殖、划痕实验和Transwell检测迁移能力,利用流式检测细胞周期的变化,Western blot检测c-Myc、干性相关标志物(Sall4,Nanog,Oct4)以及Bcl-2和Bax的表达水平。结果:成功分离并鉴定人骨髓间质干细胞。JQ1体外明显下调h BM-MSCs-CM处理组c-Myc以及干性相关标志(Sall4,Nanog,Oct4)的表达水平。此外,在体外JQ1还发挥了抗胃癌细胞增殖的作用。但是对细胞周期和凋亡并没有影响。h BM-MSCs-CM对胃癌细胞有明显的促迁移作用,而JQ1能够抑制h BM-MSCs-CM所诱导的MGC-803细胞的迁移。在体内与体外结果相一致,JQ1能够明显的抑制h BM-MSCs-CM所诱导的促胃癌细胞生长作用,并且能够下调干性相关标志的表达水平。结论:JQ1能抑制由h BM-MSCs-CM所引起的促胃癌作用,为使临床上防止h BM-MSCs-CM促进肿瘤生长成为可能。
【关键词】：人骨髓间质干细胞 胃癌 JQ1
【学位授予单位】：江苏大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.2
【目录】：

• 摘要5-6
• Abstract6-11
• 英文缩写词中英文注释表11-12
• 第一章 绪论12-20
• 1.1 间质干细胞12-14
• 1.1.1 间质干细胞的来源与生物学特性12
• 1.1.2 间质干细胞的临床应用及生物安全12-13
• 1.1.3 间质干细胞与肿瘤的生长13-14
• 1.2 C-MYC与肿瘤14-16
• 1.2.1 c-Myc基因简介14-15
• 1.2.2 c-Myc与肿瘤15-16
• 1.3 JQ1与肿瘤16-18
• 1.3.1 BET bromodomain蛋白小分子抑制剂----JQ116-17
• 1.3.2 JQ1与肿瘤生长17
• 1.3.3 JQ1与c-Myc17-18
• 小结18-20
• 第二章 研究目的、方法、实验设计方案和意义20-22
• 2.1 研究目的20
• 2.2 研究方法20-21
• 2.3 实验设计方案21
• 2.4 研究意义21-22
• 第三章 人骨髓间质干细胞的分离培养22-28
• 3.1 材料和试剂22-23
• 3.1.1 实验材料22
• 3.1.2 主要试剂22
• 3.1.3 主要仪器、耗材22-23
• 3.2 方法23-24
• 3.2.1 人骨髓MSCs的分离扩增23
• 3.2.2 流式细胞仪检测MSCs表面标记23-24
• 3.3 结果24-25
• 3.3.1 人骨髓MSCs的分离培养及形态特征24-25
• 3.3.2 流式细胞术检测hBM-MSCs的表面标志25
• 3.4 讨论25-28
• 第四章 JQ1对骨髓间质干细胞促肿瘤作用的影响28-46
• 4.1 材料与仪器28-29
• 4.1.1 主要试剂28-29
• 4.1.2 实验动物与细胞株29
• 4.1.3 主要仪器设备与耗材29
• 4.2 方法29-33
• 4.2.1 细胞培养29-30
• 4.2.2 人骨髓间质干细胞条件培养基 （hBM-MSCs-CM）的准备和肿瘤细胞共培养30
• 4.2.3 克隆形成实验30
• 4.2.4 MTT实验30-31
• 4.2.5 Transwell细胞迁移实验31
• 4.2.6 划痕实验31
• 4.2.7 细胞周期实验31
• 4.2.8 Western blot检测c-Myc以及干性相关标志物的表达31-32
• 4.2.9 BALB/c裸鼠皮下致瘤模型建立32
• 4.2.10 Western blot检测裸鼠瘤组织干性相关标志物的表达32-33
• 4.2.11 数据处理与分析33
• 4.3 结果33-42
• 4.3.1 hBM-MSCs-CM促进胃癌细胞c-Myc的表达33-34
• 4.3.2 JQ1体外抑制hBM-MSCs-CM所引起的胃癌细胞株c-Myc和干性标志物的表达水平上调34-36
• 4.3.3 JQ1体外抑制肿瘤细胞的增殖作用36-37
• 4.3.4 JQ1对hBM-MSCs-CM所诱导的胃癌细胞株MGC-803细胞周期和凋亡的影响37-39
• 4.3.5 JQ1抑制hBM-MSCs-CM所引起的MGC-803细胞的迁移39-41
• 4.3.6 JQ1体内抑制hBM-MSCs-CM所引起的促进肿瘤生长的作用41-42
• 4.4 讨论42-46
• 第五章 结论与展望46-47
• 一、结论46
• 二、展望46-47
• 参考文献47-55
• 致谢55-56
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文及参加会议56

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 郭秀英;骨髓间质干细胞[J];国外医学.输血及血液学分册;1998年05期

2 项鹏,李树浓;骨髓间质干细胞研究进展[J];中国病理生理杂志;2002年11期

3 张丽蓉,陈振光,项鹏,夏文杰,张秀明,李艳,李树浓;成人骨髓间质干细胞基本生物学特性[J];中山医科大学学报;2002年03期

4 王衣祥,李盛林,武登诚,章魁华,于世凤,崔胜先;人骨髓间质干细胞的培养及成骨功能研究[J];中华口腔医学杂志;2003年06期

5 毛飞,许文荣,朱伟,韩崇旭,胡嘉波,孙晓春,钱晖,许化溪;胚胎骨髓间质干细胞抑制淋巴细胞增殖反应的初步研究[J];江苏大学学报(医学版);2004年02期

6 吴荣强,许文荣;骨髓间质干细胞的临床应用[J];江苏大学学报(医学版);2005年03期

7 王珍,徐根波;骨髓间质干细胞及其临床应用的研究进展[J];中国肿瘤;2005年11期

8 陈志伟;许惠玉;徐荣春;;几种动物骨髓间质干细胞的培养技术及问题探讨[J];中国比较医学杂志;2005年06期

9 徐正云;马爱群;王亭忠;蒋文慧;胡志;;细胞间接触诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为平滑肌细胞[J];中国心血管杂志;2005年06期

10 金艳,曹克将,陈明龙,单其俊,邹建刚,陈椿,徐东杰,杨兵;骨髓间质干细胞心肌分化过程中细胞内钙离子浓度的变化[J];中华心律失常学杂志;2005年01期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 张建保;M Bratbach;BK Fleischmann;;骨髓间质干细胞电压依赖性离子通道[A];第七届全国生物力学学术会议论文集[C];2003年

2 姜美子;金永民;李文玉;;静脉注射人骨髓间质干细胞对大鼠局灶性脑缺血损伤的影响[A];第十一届全国神经病学学术会议论文汇编[C];2008年

3 李静远;蓝建平;赵妍敏;来晓瑜;罗依;孙洁;余建;朱园园;曾芬芳;黄河;;人骨髓间质干细胞中的端粒调控机制[A];2006年浙江省血液病学学术年会论文汇编[C];2006年

4 周峰;刘青波;陈琼荣;刘芳;陈少红;赵国强;;骨髓间质干细胞向肝细胞诱导分化的形态和分子表达特征[A];中国细胞生物学学会2005年学术大会、青年学术研讨会论文摘要集[C];2005年

5 艾国平;粟永萍;冉新泽;刘晓宏;刘贤华;罗成基;程天民;;人骨髓间质干细胞的分离培养与鉴定[A];面向二十一世纪的生物医学体视学和军事病理学论文摘要汇编[C];2000年

6 孙玮;张正治;王丽婷;潘峰;罗婧;王芳;;激光共聚焦显微术在检测大鼠骨髓间质干细胞胞间通讯功能中的应用[A];第二届全国解剖学技术学术会议论文集[C];2009年

7 邓宇斌;毕小彬;刘宇;沈君;甘丹卉;王亚柱;;骨髓间质干细胞的磁性标记及其在大鼠体内核磁共振成像的实验研究[A];第11次中国实验血液学会议论文汇编[C];2007年

8 吴碧莲;陈少强;贾小力;;移植骨髓间质干细胞对大鼠损伤脊髓神经递质和突触素表达的影响[A];中国解剖学会2011年年会论文文摘汇编[C];2011年

9 李善宗;张成;陈国俊;吴金浪;肖庆忠;李树浓;;体外培养大鼠骨髓间质干细胞的超微结构[A];中华医学会第七次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2004年

10 赵萤;张e，

本文编号：595744