凋亡大肠癌CT26细胞对小鼠免疫细胞的影响

发布时间：2017-08-02 20:15

  本文关键词：凋亡大肠癌CT26细胞对小鼠免疫细胞的影响

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【摘要】：目的:观察凋亡的大肠癌CT26细胞对在体外和体内,对小鼠免疫系统细胞(包括T淋巴细胞、NK细胞细胞和巨噬细胞)的增殖性及功能活性的影响,及对小鼠体内炎性相关因子表达是否存在相关性,并初步探讨其可能的机制或者分子通路。方法:(1)将凋亡的小鼠大肠癌CT26细胞、坏死的小鼠大肠癌CT26细胞及正常的小鼠大肠癌CT26细胞分别与小鼠CTL、NK细胞和巨噬细胞共同培养,用51 Cr释放实验测定三种免疫细胞的活性;(2)将三种不同状态的CT26细胞(凋亡、坏死、对数生长期)通过静脉输注小鼠,分离血清得NK细胞、CD8+T淋巴细胞和巨噬细胞,用CCK-8检测细胞增殖;(3)三色标记技术(抗CD4-FITC、CD25-PE、抗Foxp3-CY)检测Treg在不同处理组的表达状况;用ELISA检测各组CT26细胞的sFas表达水平以及不同处理组小鼠血清IL-12、IFN-γ、IL-4、IL-10、TGF-β的含量。结果:51 Cr释放实验结果表示与凋亡大肠癌CT26细胞培养的CTL、NK细胞和巨噬细胞的活性受到抑制(p0.001);CCK-8方法检测结果显示凋亡大肠癌CT26细胞能够抑制小鼠的NK细胞、CD8+T淋巴细胞和巨噬细胞增殖(p0.001),凋亡细胞组的Treg的表达均较对数生长期细胞组、坏死细胞组明显减弱(p0.001);ELISA检测表示凋亡CT26细胞的s Fas较其他组过表达(p0.05),抗炎症因子如IL-4、IL-10、TGF-β水平均高于正常肿瘤细胞组与坏死肿瘤细胞组,促炎因子如IL-12、IFN-γ水平均低于正常肿瘤细胞组与坏死肿瘤细胞组(p0.05)。结论:凋亡大肠癌CT26细胞能够抑制小鼠免疫细胞的增殖和活性表达,其机制可能与凋亡肿瘤细胞细胞的sFas、Treg表达增多进而抑制某些炎性分子正常产生,降低炎性反应程度有关。
【关键词】：凋亡细胞 结直肠癌 免疫耐受
【学位授予单位】：桂林医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.34
【目录】：

• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 英汉缩略词对照表9-10
• 前言10-13
• 1 材料与方法13-20
• 1.1 实验材料与仪器..13-14
• 1.2 细胞系14
• 1.3 实验方法14-20
• 2 结果20-24
• 2.1 凋亡肿瘤细胞抑制小鼠体外CTL、NK细胞及的活性20-21
• 2.2 凋亡肿瘤细胞抑制小鼠抑制了NK、CD8+ T淋巴细胞和巨噬细胞的增殖21-22
• 2.3 凋亡细胞抑制炎症反应22-24
• 3 讨论24-29
• 3.1 细胞凋亡对免疫系统的影响24-25
• 3.2 凋亡细胞被免疫系统识别、处理的基本步骤25-26
• 3.3 肿瘤细胞凋亡影响机体免疫系统的特点26-29
• 4 结论29-30
• 参考文献30-35
• 综述35-47
• 参考文献43-47
• 攻读学位期间发表的学术论文目录47-48
• 致谢48-50

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本文编号：611037