尼克酰胺对肺腺癌A549细胞生物学行为的影响及作用机制研究

发布时间：2017-08-03 02:20

  本文关键词：尼克酰胺对肺腺癌A549细胞生物学行为的影响及作用机制研究

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【摘要】：目的探讨尼克酰胺对肺腺癌A549细胞生物学行为的影响和其可能的作用机制。方法采用CCK-8细胞增殖毒性实验、Annexin V-FITC/PI流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞划痕实验分析不同作用浓度(10、20、30、40、50、60 mMol/L)及不同作用时间(24h、48h)下尼克酰胺对肺腺癌A549细胞的生物学行为的影响,采用单因素方差分析及配对t检验分析其增殖抑制率、凋亡率、迁移率与药物浓度及时间的关系;利用Aligent human genome 4×44 microarrays检测了肺腺癌A549细胞及加入尼克酰胺共培养的A549细胞mRNA表达谱,筛选出在尼克酰胺作用下显著异常表达的差异基因作为可能的靶基因,并对其进行Pathway分析,初步探讨尼克酰胺对A549细胞作用的可能细胞通路。结果尼克酰胺作用后肺腺癌A549细胞的增殖能力明显下降。并且随着尼克酰胺作用浓度和作用时间的增加,其对于A549细胞增殖的抑制率明显增加,并呈剂量及时间依赖关系。在同一作用时间内,尼克酰胺40mM作用浓度时其增殖抑制率最高,且在同一尼克酰胺浓度下,作用48h比24h对细胞增殖抑制率更明显(P0.05)。尼克酰胺作用后肺腺癌A549细胞凋亡率明显上升。随着尼克酰胺作用浓度和作用时间的增加,A549细胞凋亡率明显增加,并呈剂量及时间依赖关系。在同一作用时间内,尼克酰胺60mM作用浓度时其凋亡率最高,且在同一尼克酰胺浓度下,作用48h比24h对细胞增殖抑制率更明显(P0.05)。尼克酰胺作用后的肺腺癌A549细胞向中间的无细胞区域迁移的能力明显减弱,将无细胞区完全填满的时间明显延长,表明尼克酰胺可以减弱A549细胞迁移能力(P0.05)。尼克酰胺共培养组中表达上调倍值超过2倍的差异表达基因2505条,表达下调倍值超过2倍的差异基因745条,进一步筛选发现BCL2等涉及细胞凋亡通路的基因存在显著差异。结论尼克酰胺能影响肺腺癌A549细胞的生物学行为,其明显抑制A549细胞增殖和迁移,并促进其凋亡。其机制可能涉及调控BCL2等凋亡相关基因,但具体的作用机制尚待进一步研究
【关键词】：肺腺癌A549 尼克酰胺 细胞功能性试验 基因芯片 差异表达基因
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R734.2
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 引言9-14
• 参考文献11-14
• 材料与方法14-28
• 结果28-44
• 讨论44-46
• 参考文献46-48
• 结论与展望48-49
• 综述49-57
• 参考文献54-57
• 致谢57-59

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本文编号：612255