反义CD147分子对人胆管癌细胞株侵袭性影响的实验研究

发布时间：2017-08-05 02:10

  本文关键词：反义CD147分子对人胆管癌细胞株侵袭性影响的实验研究

  更多相关文章： 反义CD147 基质金属蛋白酶-2、9 基质金属蛋白酶抑制剂2 人胆管癌细胞株QBC939

【摘要】：目的：探讨反义CD147分子对人胆管癌细胞株QBC939侵袭性的影响。材料和方法：构建含反义CD147分子片段的重组真核表达质粒。将人胆管癌细胞株QBC939分为三组：1.反义CD147组：运用重组真核表达质粒asCD147-pcDNA3.1(-)转染QBC939细胞;2.空质粒组：运用pcDNA3.1(-)空质粒转染QBC939细胞；3.对照组：运用DMEM常规处理细胞。采用MTT法检测各组中QBC939细胞的生长情况,采用RT-PCR和Western-Blotting法分别对三组QBC939细胞中的CD147mRNA、MMP-2mRNA、MMP-9mRNA、TIMP-2mRNA的表达水平及其对应蛋白的表达水平进行检验。结果：构建了携带反义CD147分子片段的重组真核表达质粒,MTT法检测显示：三组QBC939细胞的生长曲线及对数生长期情况两两相比无显著差异(P0.05)。RT-PCR法检测显示：反义CD147组QBC939细胞中CD147 mRNA的表达与空质粒组及对照组两两相比明显降低(P0.05),空质粒组与对照组相比无显著差异(P0.05)；反义CD147组QBC939细胞中MMP-2mRNA的表达与空质粒组和对照组两两相比明显降低(P0.05),空质粒组与对照组相比无显著差异(P0.05)；反义CD147组QBC939细胞中MMP-9mRNA的表达与空质粒组和对照组两两相比无显著差异(P0.05)；反义CD147组QBC939细胞中TIMP-2mRNA的表达与空质粒组和对照组两两相比无显著差异(P0.05)。 Western-blotting检测发现：反义CD147组QBC939细胞中CD147蛋白的表达与空质粒组和对照组两两相比明显降低(P0.05),空质粒组与对照组相比无显著差异(P0.05)；反义CD147组QBC939细胞中MMP-2蛋白的表达与空质粒组和对照组两两相比明显降低(P0.05),空质粒组与对照组相比无显著差异(P0.05)；反义CD147组QBC939细胞株中MM-9蛋白的表达与空质粒组和对照组两两相比无显著差异(P0.05)；反义CD147组QBC939细胞株中TIMP-2蛋白的表达与空质粒组和对照组两两相比无显著差异(P0.05)。结论：1.反义CD147对胆管癌细胞株QBC939的生长无影响。2.反义CD147对胆管癌细胞株QBC939中MMP-9mRNA及TIMP-2mRNA和其对应蛋白的表达无影响。3.反义CD147降低胆管癌细胞株QBC939中CD147mRNA及MMP-2mRNA和其对应蛋白的表达,可能降低胆管癌细胞株的侵袭性。
【关键词】：反义CD147 基质金属蛋白酶-2、9 基质金属蛋白酶抑制剂2 人胆管癌细胞株QBC939
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.8
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 缩略语表10-11
• 前言11-13
• 实验方案流程图13-15
• 第1章 携带人反义CD147基因片段质粒载体的构建及鉴定15-27
• 1.1 材料与方法15-22
• 1.2 结果22-24
• 1.3 讨论24-27
• 第2章 胆管癌细胞株QBC939中CD147、MMP-2、MMP-9及TIMP-2的表达变化27-47
• 2.1 材料与方法27-36
• 2.2 结果36-43
• 2.3 讨论43-47
• 结论47-49
• 参考文献49-53
• 综述53-63
• 参考文献59-63
• 攻读学位期间的科研成果63-65
• 致谢65-66

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本文编号：622710