组蛋白H3精氨酸单ADP核糖基化对LOVO细胞侵袭能力的影响及机制研究

发布时间：2017-08-07 01:11

  本文关键词：组蛋白H3精氨酸单ADP核糖基化对LOVO细胞侵袭能力的影响及机制研究

  更多相关文章： LOVO细胞 组蛋白单ADP核糖基化 Runx3 侵袭

【摘要】：目的:探讨组蛋白H3精氨酸单ADP核糖基化对人结肠癌LOVO细胞侵袭能力的影响及分子机制。方法:本研究将未转染LOVO细胞(未转染组)和慢病毒空载体转染LOVO细胞(空载体组)设为对照组,精氨酸点突变为丙氨酸的慢病毒载体转染LOVO细胞(Arg117Ala组)和精氨酸点突变为赖氨酸的慢病毒载体转染LOVO细胞(Arg117Lys组)设为实验组。Transwell侵袭实验观察各组LOVO细胞的侵袭能力。Western blot测定各组细胞H3K9me2、Runx3、β-catenin和MMP7的表达变化;定量PCR检测Runx3的mRNA水平。结果:(1)组蛋白H3精氨酸单ADP核糖基化对LOVO细胞侵袭能力的影响:Transwell侵袭实验检测对照组与实验组的侵袭能力,结果显示,与对照组相比,Arg117Ala组和Arg117Lys组降解Matrigel基质胶穿过小室的细胞数明显减少(P0.01)。Arg117Ala组和Arg117Lys组无统计学差异(P0.05)。(2)组蛋白H3精氨酸单ADP核糖基化影响LOVO细胞侵袭能力的分子机制:Western blot方法检测未转染组、空载体组、Arg117Ala组和Arg117Lys组LOVO细胞H3K9me2、Runx3、β-catenin和MMP7的表达情况,结果显示,与对照组相比,Arg117Ala组与Arg117Lys组H3K9me2、β-catenin和MMP7蛋白表达降低,Runx3蛋白表达升高(P0.01),Arg117Ala组与Arg117Lys组无统计学差异(P0.05)。定量PCR方法检测未转染组、空载体组、Arg117Ala组和Arg117Lys组LOVO细胞Runx3的mRNA水平,结果显示,与对照组相比,Arg117Ala组与Arg117Lys组Runx3的mRNA水平升高(P0.01)。Arg117Ala组与Arg117Lys组无统计学差异(P0.05)。结论:组蛋白H3精氨酸单ADP核糖基化可使LOVO细胞侵袭能力增强,其机制可能与组蛋白H3精氨酸单ADP核糖基化调节H3K9me2水平,抑制Runx3的表达,进而导致下游靶基因MMP7蛋白表达升高有关。组蛋白H3精氨酸单ADP核糖基化在调节结肠癌侵袭能力中可能具有重要作用。其详细机制需进一步研究。
【关键词】：LOVO细胞 组蛋白单ADP核糖基化 Runx3 侵袭
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.35
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 前言10-12
• 第一部分 组蛋白H3精氨酸单ADP核糖基化对LOVO细胞侵袭能力的影响12-19
• 1 材料与方法12-15
• 2 实验结果15-17
• 3 讨论17-19
• 第二部分 组蛋白H3精氨酸单ADP核糖基化影响LOVO细胞侵袭能力的分子机制19-30
• 1 材料与方法19-24
• 2 实验结果24-27
• 3 讨论27-30
• 全文总结30-31
• 参考文献31-34
• 文献综述34-41
• 参考文献37-41
• 致谢41-42
• 硕士期间发表论文情况42

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本文编号：632214