FOXN1，一个新的胃肠肿瘤抑癌基因

发布时间：2017-08-08 15:26

  本文关键词：FOXN1，一个新的胃肠肿瘤抑癌基因

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【摘要】：胃肠道肿瘤是危害人类健康最常见的恶性肿瘤,据WHO统计显示我国胃肠肿瘤的发病率、死亡率一直位于恶性肿瘤前五位,且皆有继续升高的趋势。肿瘤的发生、发展是一个多基因参与、多阶段、多步骤的复杂的生物学过程,其中基因的改变：例如原癌基因的激活及抑癌基因的沉默则被认为是肿瘤发生发展的重要机制。目的：我们发现了Forkhead Box超家族中的FOXN1可能是一个新的肿瘤抑癌基因,该基因在胃肠正常组织中高表达,而在胃肠道肿瘤组织及多数肿瘤细胞株中低表达,因此我们希望通过相关实验进一步验证该基因的功能并阐明其在胃肠道肿瘤发生发展中起作用的可能机制。方法：通过半定量RT-PCR和免疫组化检测胃肠正常组织和肿瘤组织中FOXN1的表达水平；通过体外脂质体转染,获得稳定表达FOXN1的胃癌和大肠癌细胞株,观察体外FOXN1对细胞表型的影响,包括细胞的增殖能力、迁移能力、细胞凋亡及细胞自噬等；通过建立裸鼠皮下种植模型进一步观察体内FOXN1对肿瘤细胞生长的影响；通过Western Blot检测相关通路蛋白的表达,研究FOXN1可能的调控机制；并通过实时定量QPCR验证胃肠癌不同细胞株中microRNA的表达,找出FOXN1可能的上游表达调控机制。结果：FOXN1在正常胃肠组织中高表达,而在大多数胃肠肿瘤组织和肿瘤细胞株中表达降低或沉默。FOXN1蛋白的表达与结直肠癌的低分期(P=0.003)、较少的淋巴结转移(P=0.003)、较少的远处转移(P=0.014)及总生存期(P=0.011)显著相关；与胃癌的低浸润(P=0.01)、低分期(P=0.042)及总生存期(P=0.044)显著相关。细胞株转染FOXN1后,通过体内外实验发现FOXN1能抑制肿瘤细胞的生长、迁移、促进肿瘤细胞的凋亡、调节肿瘤细胞的自噬状态。Western Blot和流式细胞术结果提示FOXN1通过PI3K/AKT/mTOR通路调节肿瘤细胞自噬,并与细胞凋亡协同促进肿瘤细胞死亡。另外初步探索发现FOXN1可能是hsa-miR-192-5p的靶基因,但还有待进一步验证。结论：FOXN1在胃肠道肿瘤中表达沉默或降低,过表达FOXN1具有明显的抗细胞增殖、迁移能力,并能促进肿瘤细胞的凋亡,除此,FOXN1还可通过P13K通路调节肿瘤细胞的自噬状态。这提示FOXN1为一个新的胃肠肿瘤抑癌基因,有希望作为一种潜在的标记物用于肿瘤的早期诊断和风险评估。
【关键词】：FOXN1 肿瘤抑癌基因 凋亡 自噬 microRNA
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735
【目录】：

• 致谢5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 缩略语及中英文对照10-13
• 前言13-16
• 第一部分 FOXN1表达水平与胃肠道肿瘤患者临床病理特征的相关性研究16-35
• 引言16
• 1.1 材料与方法16-27
• 1.2 结果27-34
• 1.3 讨论34-35
• 第二部分 FOXN1表达对胃肠肿瘤细胞功能的影响35-71
• 引言35
• 2.1 材料与方法35-52
• 2.2 结果52-69
• 2.3 讨论69-71
• 第三部分 大肠癌裸鼠皮下种植瘤模型71-74
• 引言71
• 3.1 材料与方法71-72
• 3.2 结果72-73
• 3.3 讨论73-74
• 第四部分 FOXN1的相关分子机制及表达调控研究74-85
• 引言74-75
• 4.1 材料与方法75-78
• 4.2 结果78-84
• 4.3 讨论84-85
• 结论85-86
• 参考文献86-87
• 综述 结直肠癌表观遗传学标志物的研究进展87-111
• 参考文献101-111
• 作者简历及在学习期间所取得的科研成果111

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 Xi Wang;Ye-Ye Kuang;Xiao-Tong Hu;;Advances in epigenetic biomarker research in colorectal cancer[J];World Journal of Gastroenterology;2014年15期

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3 Mohammad Reza Abbaszadegan;Alireza Tavasoli;Arash Velayati;Hamid Reza Sima;Hassan Vosooghinia;Mehdi Farzadnia;Hamid Asadzedeh;Mehran Gholamin;Ezzat Dadkhah;Azadeh Aarabi;;Stool-based DNA testing,a new noninvasive method for colorectal cancer screening,the first report from Iran[J];World Journal of Gastroenterology;2007年10期

4 ;Detection of aberrant methylation in fecal DNA as a molecular screening tool for colorectal cancer and precancerous lesions[J];World Journal of Gastroenterology;2007年06期

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本文编号：640698