胃癌中PHLPP1的表达及其临床意义

发布时间：2017-08-09 19:34

  本文关键词：胃癌中PHLPP1的表达及其临床意义

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【摘要】：目的研究PH结构域且富含亮氨酸重复基序的丝/苏氨酸蛋白磷酸酶1(pleckstrin homology domain leucine-rich repeat protein phosphatase 1,PHLPP1)在胃癌组织以及相对应癌旁非肿瘤组织中的表达水平及变化;探讨PHLPP1蛋白表达水平与胃癌临床病理特征之间的关系;另外,通过检测不同人胃癌细胞系(AGS,SUN-1,KATO-III,BGC-823,MGC-803,SGC-7901和HGC-27)和人正常胃黏膜细胞系(GES-1)PHLPP1 mRNA和蛋白的表达情况及差异,进一步明确PHLPP1在人胃癌细胞系及人正常胃黏膜细胞中的表达情况。根据完整的临床随访资料,分析135例行胃癌根治术后患者中PHLPP1蛋白的表达情况与预后之间的关系。方法收集来自天津医科大学肿瘤医院胃部肿瘤科于2004年08月至2007年12月收治并经根治手术切除,通过病理证实为胃癌的135例患者的癌组织以及相对应癌旁非肿瘤组织石蜡标本,送往上海芯超生物科技有限公司制作组织芯片(编号:T14-501 TMA1-3)。应用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)方法检测135例胃癌患者的癌组织及其相对应癌旁非肿瘤组织中PHLPP1蛋白的表达情况;分析PHLPP1蛋白表达水平与胃癌临床病理特征及预后之间的关系。采取半定量逆转录聚合酶链反应(Semi-quantitative reverse transcription and polymerase chain react,SqRT-PCR)技术检测不同人胃癌细胞系及人正常胃黏膜细胞系中PHLPP1 mRNA的表达水平;Western blot(WB)法检测不同人胃癌细胞系与人正常胃黏膜细胞系中PHLPP1蛋白的表达情况。结果1、135例胃癌组织标本中PHLPP1蛋白阳性表达率为55.6%,相对应癌旁非肿瘤组织中PHLPP1蛋白阳性表达率为87.4%,差别具有统计学意义(P0.05)。2、SqRT-PCR技术检测不同人胃癌细胞系PHLPP1 mRNA的表达水平均低于人正常胃黏膜细胞系(P0.05);WB法检测不同人胃癌细胞系PHLPP1的蛋白表达水平也均低于人正常胃黏膜细胞系的表达(P0.05)。3、对135例胃癌根治术后患者进行单因素生存分析表明:肿瘤大小、N分期、PHLPP1蛋白的表达水平与胃癌患者根治术后的预后相关(P0.05);COX模型分析表明PHLPP1蛋白的表达和N分期是胃癌根治术后患者的独立预后因素(P0.05)。结论1、胃癌组织中PHLPP1蛋白表达水平低于相对应癌旁非肿瘤组织;且人胃癌细胞系PHLPP1表达在mRNA及蛋白水平均也低于人正常胃黏膜细胞系。提示PHLPP1的低表达或表达沉默与胃癌的发生发展密切相关,由此推测PHLPP1在胃癌可能作为一种抑癌基因。2、PHLPP1蛋白表达水平是胃癌患者根治术后独立的预后因素。PHLPP1蛋白低表达或表达沉默的胃癌患者预后较差,因此可作为预测胃癌预后的因子。
【关键词】：PHLPP1 胃癌 SqRT-PCR 免疫组织化学 预后
【学位授予单位】：天津医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.2
【目录】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 缩略语/符号说明10-11
• 前言11-15
• 研究现状、成果11-14
• 研究目的、方法14-15
• 1 对象和方法15-28
• 1.1 研究对象15
• 1.2 实验材料15-17
• 1.3 基本溶液的配制17-19
• 1.4 试验方法19-26
• 1.4.1 细胞的复苏、换液、传代、冻存19-20
• 1.4.2 S-P法免疫组织化学染色20-22
• 1.4.3 SqRT-PCR实验方法22-25
• 1.4.4 Western Blot方法25-26
• 1.5 随访26-27
• 1.6 统计学处理27-28
• 2 结果28-34
• 2.1 免疫组化结果28-32
• 2.2 不同人胃癌细胞系和人正常胃黏膜上皮细胞系PHLPP1 mRNA的表达差异32
• 2.3 不同人胃癌细胞系和人正常胃黏膜上皮细胞系PHLPP1蛋白的表达差异32-34
• 3 讨论34-38
• 结论38-39
• 参考文献39-43
• 发表论文和参加科研情况说明43-44
• 综述 蛋白磷酸酶PHLPP在恶性肿瘤中的研究进展44-68
• 综述参考文献60-68
• 致谢68-69
• 个人简历69

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本文编号：646972