Axin2在胰腺癌细胞中的表达及意义
本文关键词：Axin2在胰腺癌细胞中的表达及意义
【摘要】：目的:探讨Axin2在胰腺癌细胞中的表达情况及其对人胰腺癌细胞(PANC-1)增殖、侵袭及迁移能力的影响。阐述Axin2在胰腺癌发生发展中的作用,为胰腺癌基因靶向治疗和抗肿瘤药物研发提供一定的理论基础。方法:1、采用QPCR检测人正常胰腺细胞(H6C7)及三种不同侵袭能力的胰腺癌细胞株(BxPC-3Mia PaCa-2PANC-1)中Axin2表达水平情况;根据Axin2表达量高低筛选出最低表达的胰腺癌细胞株;2、制备过表达Axin2的载体;将筛选出的低表达细胞株分为3组:阴性对照组、空白对照组和过表达组,其中过表达组及阴性对照组分别成功转染过表达Axin2的质粒载体和空质粒载体,空白对照组则不进行转染,QPCR检测各组细胞株转染后Axin2表达情况;3、筛选转染后稳定表达Axin2的胰腺癌细胞,合理设置分组,并通过MTT法、Transwell小室法、划痕愈合等实验分别检测转染过表达Axin2质粒后胰腺癌细胞增殖、侵袭及迁移能力变化。结果:1、QPCR结果发现:Axin2在三种胰腺癌细胞株及正常胰腺细胞株中均有表达,Axin2在PANC-1、BxPC-3、Mia PaCa-2及H6C7细胞中相对表达量分别为(0.13±0.01)、(0.42±0.05)、(0.24±0.01)和(1.01±0.01),任意两者比较,均有统计学意义(P0.05);2、筛选最低表达Axin2的PANC-1细胞株,过表达Axin2载体转染PANC-1细胞后利用QPCR检测转染效率,结果显示:Axin2在过表达组、阴性对照组、空白对照组的相对表达量分别为(4.32±0.07)、(1.09±0.08)、(0.92±0.08);其中阴性对照组与空白组相比,无显著差异(P㧐0.05);过表达组与其它两组比较,表达量显著升高,差异有统计学意义(P0.05);3、筛选转染后稳定高表达Axin2的胰腺癌细胞株进行体外功能实验,1)MTT法检测结果:过表达组、阴性对照组及空白组的相对增殖率分别为:(0.33±0.02)、(0.99±0.05)和(1.00±0.22);过表达组与其它两组比较增殖率显著降低,差异有统计学意义(P0.05);2)划痕实验结果显示:相较于空白对照组及阴性对照组,过表达组PANC-1细胞迁移能力显著减弱;3)Transwell小室实验结果显示:相较于空白组及阴性对照组,过表达组PANC-1细胞侵袭能力显著降低。结论:1、Axin2在胰腺癌细胞株较正常胰腺细胞表达下调,在侵袭能力越高的癌细胞株中表达越低;2、Axin2高表达能减弱PANC-1细胞的增殖、迁移及侵袭能力,提示可能起抑癌基因作用。
【关键词】：Axin2 胰腺癌 增殖 迁移 侵袭
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.9
【目录】：
- 摘要4-6
- Abstract6-10
- 中英文缩略词表10-11
- 第1章 前言11-13
- 第2章 材料与方法13-29
- 第3章 实验结果29-37
- 第4章 讨论37-41
- 第5章 结论41-43
- 参考文献43-47
- 综述 胰腺癌微环境的研究进展47-55
- 参考文献51-55
- 在读期间发表的论文55-57
- 致谢57
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，本文编号：683873
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