非编码RNA调控食管癌转移的功能机制研究

发布时间：2017-08-18 22:06

  本文关键词：非编码RNA调控食管癌转移的功能机制研究

  更多相关文章： 食管鳞癌 snord75 miR-425 增殖 侵袭迁移 分子机制

【摘要】：我国食管癌发病率和死亡率均居世界首位。据世界卫生组织(WHO)在2014年2月3日发表的《世界癌症报告2014》,2012年食管癌新发病例达45.6万例,病理分型主要为鳞癌。临床上因对食管癌发生和发展机制尚不明了,始终缺乏有效的早诊、特异性分子靶点和治疗药物。因此,对食管癌的防治已上升到国家层面的健康战略需求。核仁小RNA是一类在真核细胞中广泛存在的长度约为60-300nt的非编码RNA,主要由内含子编码,能与特定的蛋白质结合形成复合物在细胞中稳定存在。它们可以指导rRNA的2'-O甲基化及假尿嘧啶化修饰,影响rRNA的成熟,从而影响蛋白质的合成。研究发现snoRNA在肿瘤的发生发展中起着非常重要的作用,但在食管癌的研究中还未见有关snoRNA的报道。在本文的第一部分研究中,首先对食管鳞癌早期淋巴结转移与非转移标本进行miRNA芯片分析并验证,发现snord75在淋巴结转移组中高表达。在细胞水平检测snord75对食管鳞癌细胞表型的影响,结果显示snord75促进食管鳞癌细胞恶性表型的形成。我们在裸鼠体内发现snord75高表达促进其成瘤能力。进一步探究snord75的功能机制,通过Biotin-RNA pull down、质谱鉴定并用westernblot、RIP实验等进一步验证,找到了一个与其特异性结合的蛋白ILF3,ILF3是VEGFC的转录因子,snord75与ILF3结合可以促进VEGFC的转录,从而促进淋巴结转移。在临床水平,snord75在75对食管鳞癌组织、122例食管鳞癌患者血浆中呈现高表达,相对于75例配对的癌旁组织、55例正常人的血浆中的表达；且snord75表达越高,病人的生存预后越差。因此,snord75在食管癌中与ILF3蛋白结合,促进淋巴结转移,呈现癌基因的特点。miRNA是一类长度为19～25个核苷酸的单链非编码RNA,广泛存在于真核生物中。miRNA通过与靶基因3'UTR结合,促进靶mRNA的降解或抑制其翻译,从而调控其表达,影响细胞的增殖、分化和凋亡等过程。近年来研究显示,miRNA与肿瘤的发生发展密切相关,发挥类似癌基因或抑癌基因的功能。在本文第二部分研究中,发现miR-425高表达促进食管癌细胞增殖、克隆形成及侵袭迁移能力。通过双荧光素酶报告基因实验证实SMAD2是miR-425的靶基因,且miR-425与SMAD2第二个结合位点(7649-7654)结合,影响其mRNA和蛋白水平的表达。高表达miR-425,E-cadherin表达降低,而Vimentin表达升高,靶基因SMAD2的表达下降。miR-425和SMAD2的表达水平呈负相关。miR-425在食管鳞癌组织、食管鳞癌患者血浆中的表达明显高于配对的癌旁组织、正常人血浆。综上所述,miR-425通过靶向结合SMAD2 3'UTR,在食管鳞癌中发挥癌基因的作用。
【关键词】：食管鳞癌 snord75 miR-425 增殖 侵袭迁移 分子机制
【学位授予单位】：北京协和医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.1
【目录】：

• 缩略语表7-9
• 中文摘要9-11
• 英文摘要11-13
• 第一部分 食管癌转移相关snoRNA功能及机制研究13-59
• 前言14-21
• 材料与方法21-40
• 实验结果40-54
• 讨论54-57
• 展望57-58
• 小结58-59
• 第二部分 microRNA425在食管癌中的功能及其分子机制59-80
• 前言60-62
• 材料与方法62-67
• 实验结果67-76
• 讨论76-77
• 展望77-79
• 小结79-80
• 参考文献80-86
• 基金资助86-87
• 硕士在读期间发表与待发表论文87-88
• 文献综述88-95
• 参考文献94-95
• 个人简历95-97
• 致谢97-98

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 Jeff Boyd;;Implication of snoRNA U50 in human breast cancer[J];遗传学报;2009年08期

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本文编号：697001