5-aza-CdR增强紫杉醇联合表柔比星对MCF-7细胞的杀伤作用

发布时间：2017-08-19 13:37

  本文关键词：5-aza-CdR增强紫杉醇联合表柔比星对MCF-7细胞的杀伤作用

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【摘要】：目的:本实验通过使用DNA甲基化抑制剂5-氮杂2-脱氧胞苷(5-aza-Cd R)干扰体外乳腺癌MCF-7细胞的增殖,结合已有的经典抗肿瘤化疗药物紫杉醇及表柔比星,探讨两者之间是否存在叠加累积效应,为乳腺癌的化疗提供新的治疗手段及途径。方法:将培养好的细胞按照实验要求分为:空白组(A组)、5-aza-Cd R组(B组)、5-aza-Cd R+表柔比星组(C组)、5-aza-Cd R+紫杉醇(D组)、5-aza-Cd R+紫杉醇+表柔比星组(E组)、紫杉醇+表柔比星组(F组)。通过MTT检测细胞存活80%的浓度,分别选取24H、48H及72H,探索5-aza-Cd R、表柔比星及紫杉醇对乳腺癌MCF-7细胞的实验合适浓度及时间。根据实验得出的合适浓度及时间,药物干预预先分组,光镜下直接观察细胞形态及流式细胞仪检测细胞凋亡。并采用Western-blot检测PGP和MMP-2蛋白的表达。结果:1.光镜下观测分别选取药物处理48H在显微镜10*10下直接观察,实验组细胞出现核质比例减少,肾形核仁增多,核仁不明显等表现,并且有相当一部分的细胞表面出现皱缩与内陷。2.MTT比色法检测细胞增殖5-aza-Cd R,表柔比星及紫杉醇抑制乳腺癌MCF-7细胞细胞增殖效应表现出剂量依赖性与时间依赖性(P0.05)。随着实验药物浓度的增加,MCF-7细胞的存活率逐渐下降(P0.05)。同样浓度的实验药物,随着作用时间的延长,MCF-7细胞的存活率同样出现下降的趋势(P0.05)。3.Annexin V FITC细胞凋亡检测乳腺癌MCF-7细胞体外经药物处理48H后,E组(即5-aza-Cd R+紫杉醇+表柔比星组)在细胞凋亡率(17.11%±1.25%)上都明显高于其他五组(P0.05)。4.Western-blot结果E组(即5-aza-Cd R+紫杉醇+表柔比星组)在PGP与MMP2两种蛋白的表达均低于其他五组(P0.05)。结论:5-aza-Cd R可诱导体外MCF-7细胞的凋亡,并下调PGP及MMP2蛋白的表达。5-aza-Cd R可增强紫杉醇联合表柔比星对体外乳腺癌细胞MCF-7的杀伤作用。
【关键词】：乳腺癌MCF-7细胞 5-aza-Cd R 紫杉醇 表柔比星
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.9
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 中、英词文对照表10-11
• 第1章 绪言11-15
• 第2章 正文15-21
• 2.1 实验材料15-17
• 2.2 实验方法17-19
• 2.3 统计分析19-21
• 第3章 结果21-27
• 3.1.药物干预 MCF-7 细胞增殖的影响21-22
• 3.2 药物处理后细胞形态学的变化22-23
• 3.3 流式细胞术检测药物处理后MCF-7细胞凋亡23-25
• 3.4 Western-bolt检测PGP及MMP2蛋白的表达25-27
• 第4章 讨论27-31
• 第5章 结论31-33
• 参考文献33-37
• 综述37-45
• 参考文献42-45
• 攻读学位期间发表的论文目录45-47
• 致谢47

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本文编号：701021