骨巨细胞瘤中microRNA-30a对RunX2表达及骨质破坏的调控作用

发布时间：2017-08-19 16:18

  本文关键词：骨巨细胞瘤中microRNA-30a对RunX2表达及骨质破坏的调控作用

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【摘要】：研究背景:骨巨细胞瘤是一种具有潜在侵袭性及丰富血管的交界性骨肿瘤,主要发生于长骨的干骺端和脊柱,以广泛的溶骨性破坏为主要表现,约占全部原发性骨肿瘤的6%。骨巨细胞瘤主要由梭形的基质细胞、多核的巨细胞和单核圆细胞组成,其中基质细胞是骨巨细胞瘤的瘤样组成部分,同时具有干细胞样性能,可分泌Runx2等细胞蛋白调控破骨细胞的分化和骨质溶解。研究目的:目前Runx2在骨巨细胞瘤中的重要作用已被广泛报道,但是关于Runx2表达调控的研究多聚集在它的转录水平,关于其转录后的调控机制并未被完整阐述。本研究计划通过对micro RNA的研究,探索骨巨细胞瘤中Runx2在转录后水平的调控机制。研究方法:本研究首先通过收集20例骨巨细胞瘤标本及相同患者的瘤旁组织,利用semi-q RT-PCR、q RT-PCR和western blot等试验方法,比较Runx2和mi R-30a在两种组织的表达差异。其次通过双荧光素酶报告系统确认mi R-30a与Runx2的3’UTR区域的结合位点。最后通过TALEN技术构建了mi R-30a过表达的骨巨细胞瘤基质细胞,检测了过表达mi R-30a的骨巨细胞瘤基质细胞中Runx2及其下游靶基因MMP-13的表达,并通过骨片实验、TRAP染色等检测其对破骨细胞功能的影响。研究结果:我们首先通过对20例骨巨细胞瘤及瘤旁对照组的比较分析发现,Runx2在骨巨细胞瘤中表达呈显著高表达,而mi R-30a在骨巨细胞瘤中表达显著降低,从而证实了mi R-30a与Runx2呈负相关关系;随后我们发现mi R-30a与Runx2的3’UTR区域的特异性结合位点,同时证实mi R-30a可抑制Runx2的表达;最后我们通过对比分析过表达mi R-30a的基质细胞与正常基质细胞,发现Runx2及其下游靶基因(MMP-13)的表达明显降低,同时刺激了破骨细胞分化和诱导骨质破坏的作用明显减弱。研究结论:我们通过实验研究证明了mi R-30a通过调控Runx2的表达介导骨巨细胞瘤中的溶骨性骨质破坏,我们认为这有可能成为骨肿瘤或其它与骨质破坏有关的疾病的新的诊断和治疗靶点。
【关键词】：骨巨细胞瘤 micro RNA-30a Runx2 破骨细胞分化 骨质破坏
【学位授予单位】：第二军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R738.1
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 缩略词表9-11
• 前言11-13
• 第一部分 临床样本收集及分析检测13-24
• 一、材料与方法14-17
• 二、结果17-22
• 三、讨论22-24
• 第二部分 从细胞水平证实miR-30a在骨巨细胞瘤中呈低表达，并且直接调控Runx224-41
• 一、材料与方法24-30
• 二、结果30-38
• 三、讨论38-41
• 全文总结41-43
• 综述 MiR-30a在肿瘤中的多方面作用43-49
• 参考文献49-56
• 在读期间发表论文和参加科研工作情况56-58
• 致谢58-59

【共引文献】

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本文编号：701704