RASSF1A基因对人胃癌细胞裸鼠成瘤及EMT的影响

发布时间：2017-08-21 03:00

  本文关键词：RASSF1A基因对人胃癌细胞裸鼠成瘤及EMT的影响

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【摘要】：目的:在课题组前期研究的基础上,建立胃癌细胞裸鼠移植瘤模型,进一步研究RASSF1A基因对人胃癌细胞裸鼠成瘤及EMT的影响。方法:1)分别培养稳定转染RASSF1A基因的人胃癌SGC-7901细胞及MGC-803细胞,Western Blot检测人胃癌MGC-803细胞转染RASSF1A后E-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表达的变化。2)建立人胃癌细胞SGC-7901及MGC-803裸鼠异种移植瘤模型,分别分为3组:未转染组、pc DNA3.1(+)空质粒转染组、转染pc DNA3.1(+)-RASSF1A质粒组,观察皮下肿瘤生长,绘制瘤体生长曲线图,4-6w后提取瘤体组织,分别比较各组瘤体体积及重量,HE染色,观察病理学变化;Western-blot检测瘤体组织蛋白E-cadherin、Vimentin、Snail表达的变化。结果:1)人胃癌MGC-803细胞稳定转染RASSF1A基因后Western Blot结果表明,与空质粒转染组及未转染组相比,阳性质粒转染组中E-cadherin蛋白表达上调,而Vimentin、Snail蛋白的表达下调,差异有统计学意义(P0.05),而空质粒转染组与未转染组相比,差异无统计学意义(P0.05)。2)成功建立稳定了高表达RASSF1A基因的人胃癌SGC-7901细胞及MGC-803细胞裸鼠移植瘤模型,与空质粒转染组、未转染组相比,阳性质粒转染组的裸鼠皮下移植瘤体积、瘤重均显著小于空质粒转染及未转染组,差异有统计学意义(P0.05),而空质粒转染组裸鼠皮下瘤体积、瘤重与未转染组相比,差异无统计学意义(P0.05);显微光镜下显示:各瘤体组织学形态均符合腺癌,转染后的裸鼠移植瘤较未转染及空质粒转染组移植瘤癌细胞异型性降低;提取瘤体组织蛋白后Western Blot结果显示:与空质粒转染组及未转染组相比,阳性质粒转染组中E-cadherin蛋白表达上调,而Vimentin、Snail蛋白的表达下调,差异有统计学意义(P0.05),而空质粒转染组与未转染组相比,差异无统计学意义(P0.05)。结论:1)RASSF1A基因可显著抑制胃癌细胞的成瘤能力。2)RASSF1A基因能够抑制人胃癌SGC-7901细胞及MGC-803细胞EMT的发生。
【关键词】：RASSF1A基因 胃癌细胞 EMT 裸鼠成瘤
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.2
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 主要英文缩略语索引10-11
• 第1章 绪论11-15
• 第2章 实验材料与仪器设备15-19
• 2.1 细胞株15
• 2.2 实验动物15
• 2.3 主要试剂15-16
• 2.4 仪器及设备16-19
• 第3章 实验方法19-29
• 第4章 结果29-43
• 第5章 讨论43-47
• 第6章 结论47-49
• 参考文献49-53
• 综述53-59
• 参考文献56-59
• 作者攻读学位期间的科研成果59-61
• 致谢61

【参考文献】

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1 沈克平;王海永;胡兵;刘威;;胃肠安对人胃癌SGC-7901细胞TGF-β_1诱导上皮间质转化作用[J];中国实验方剂学杂志;2011年23期

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本文编号：710397