不同氧浓度下吉非替尼对人肺癌细胞的影晌

发布时间：2017-08-22 07:34

  本文关键词：不同氧浓度下吉非替尼对人肺癌细胞的影晌

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【摘要】：目的:(1)研究低氧条件下,吉非替尼能否抑制人非小细胞肺癌细胞A549、HCC827、SK-MES-1的增殖。(2)能否通过提高氧浓度改善人非小细胞肺癌细胞A549、HCC827、SK-MES-1对吉非替尼的敏感性。(3)研究在低氧、常氧、高氧三种不同氧浓度下,吉非替尼对这三种不同的细胞的作用是否有差异。方法:(1)本实验选用三个人非小细胞肺癌细胞株A549、HCC827、SK-MES-1为研究对象,采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)法测定三株细胞对吉非替尼的敏感性。取处于对数生长期的上述细胞接种于96孔板,加入0μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L、60μmol/L的吉非替尼,24小时分别置于低氧(5%)、常氧(21%)、高氧(40%)这三个不同氧浓度下,后加入CCK-8 5μL,通过多通道酶标仪检测各孔的吸光值A(波长=450nm,以波长520nm为参考)。并置倒置显微镜下观察,观察吉非替尼的诱导人非小细胞肺癌细胞凋亡作用。(2)取0μmol/L、40μmol/L吉非替尼作用于处于对数期的A549、HCC827、SK-MES-1三种肺癌细胞,加药后24小时分别置于低氧(5%)、常氧(21%)、高氧(40%)这三个不同氧浓度,收集各组细胞备用。使用流式细胞仪通过Annexin V FITC-PI法测定各组细胞的凋亡率。普通PCR法和半定量RT-PCR法检测各组细胞EGFR、HIF-1α及VEGF-C m RNA的表达。结果:常氧、低氧及高氧条件下,细胞增殖抑制率随吉非替尼浓度的增加、氧浓度的升高而增加(P0.001)。高氧条件下,与乏氧相关的HIF-1αm RNA在高氧条件下三种细胞均明显减弱(P0.05),而VEGF-C m RNA、EGFR m RNA在HCC827细胞实验组可见随氧浓度升高表达量下降(P0.05)。结论:(1)低氧条件下,吉非替尼可以抑制人非小细胞肺癌细胞A549、HCC827、SK-MES-1的增殖。(2)提高氧浓度,人非小细胞肺癌细胞株A549、HCC827、SK-MES-1对吉非替尼的敏感性均提高,且以HCC827细胞株为著。(3)在低氧、常氧、高氧三种不同氧浓度下,吉非替尼对这三种不同的细胞的作用是有差异。可能机制是提高氧浓度可以进一步下调活化的HIF-1αm RNA的表达。
【关键词】：氧浓度 非小细胞肺癌 细胞增殖 吉非替尼 表皮生长因子受体
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R734.2
【目录】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 常用缩写词中英文对照表9-10
• 前言10-12
• 1 材料与方法12-19
• 1.1 实验材料12-14
• 1.2 实验方法14-18
• 1.3 统计学分析18-19
• 2 结果19-40
• 2.1 CCK-8 实验检测各实验组的增值变化19-34
• 2.2 常氧、低氧和高氧条件下，吉非替尼对人肺癌A549、HCC827、SK-MES-1细胞株的凋亡作用34-36
• 2.3 常氧、低氧和高氧条件下，吉非替尼对人肺癌A549、HCC827、SK-MES-1细胞株各基因mRNA的表达结果36-40
• 3 讨论40-42
• 4 结论42-43
• 4.1 低氧条件吉非替尼对人肺癌细胞的影响42
• 4.2 不同氧浓度下吉非替尼对人肺癌细胞的影响42-43
• 参考文献43-45
• 综述45-53
• 参考文献50-53
• 致谢53-54
• 在学期间承担/参与的科研课题与研究成果54-55
• 个人简历55

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本文编号：717867