紫花牡荆素对肝癌细胞RASSF1A基因表达的影响

发布时间：2017-08-24 08:12

  本文关键词：紫花牡荆素对肝癌细胞RASSF1A基因表达的影响

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【摘要】：目的:观察紫花牡荆素(casticin,CAS)对肝癌Hep G2细胞RASSF1A基因表达的影响。方法:体外培养人肝癌细胞系Hep G2,并根据不同的实验目的分为空白对照组和不同浓度CAS处理组。其中空白对照组仅给予等体积培养基处理;CAS干预组采用0.5μmol/L,1.0μmol/L,2.0μmol/L CAS作用Hep G2细胞0~48h。采用甲基化特异性PCR(MSP)法检测Hep G2细胞CAS处理后RASSF1A基因启动子区的甲基化水平。提取细胞总RNA和蛋白,实时定量PCR和Western blot分别检测RASSF1A m RNA和DNA甲基转移酶1(DNMT1)蛋白的表达。结果:1.MSP结果显示,Hep G2细胞未经CAS处理时,细胞内甲基化RASSF1A含量呈一定表达水平。当给予不同浓度CAS处理0~48h后,甲基化RASSF1A含量随着CAS浓度的增高而降低,与之相对应的是,随着CAS浓度的增高,非甲基化RASSF1A基因含量随之增多。2.Hep G2细胞中RASSF1A m RNA含量低下,而经不同浓度CAS处理0~48h后,real-time PCR结果显示RASSF1A m RNA水平随之增高,并具有一定的剂量和时间依赖性。此外,CAS也能上调RASSF1A蛋白的表达。3.Hep G2细胞在静息状态下,DNMT1 m RNA呈较高水平表达。而CAS处理后,随着浓度的递增,DNMT1 m RNA含量随之降低。此外,Western blot也获得了类似的效果。结论:CAS能降低Hep G2细胞中RASSF1A启动子的甲基化水平,并促进其表达;CAS能降低Hep G2细胞中DNA甲基转移酶1的表达水平。
【关键词】：紫花牡荆素 RASSF1A 肝癌细胞
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.7
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 主要缩略词及英文索引9-10
• 第1章 前言10-12
• 第2章 主要实验材料和仪器设备12-16
• 第3章 实验方法16-24
• 第4章 实验结果24-31
• 第5章 讨论31-35
• 第6章 结论35-37
• 参考文献37-41
• 综述41-47
• 参考文献44-47
• 作者攻读学位期间的科研成果47-49
• 致谢49

【参考文献】

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1 张春雷;;晚期肝癌介入治疗综合措施的探讨[J];中国医药指南;2014年26期

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本文编号：730165