毛蕊异黄酮对小鼠放射性肺损伤的防治作用的实验研究

发布时间：2017-08-25 03:45

  本文关键词：毛蕊异黄酮对小鼠放射性肺损伤的防治作用的实验研究

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【摘要】：目的：目前对放射性肺炎的治疗市场上并没有特效的药物,因此开发一种防治放射性肺损伤的特效药物是非常必要的。本试验主要探讨毛蕊异黄酮对小鼠的放射性肺损伤是否有防护作用,并对其可能的作用机制作进一步的探讨。方法：将80只雌性BALB/c小鼠随机分为6组：(1)正常对照组8只：在虚拟照射前30min,经小鼠尾静脉注射0.1ml生理盐水,之后8周内每周两次每次0.1ml经小鼠尾静脉注射生理盐水；(2)照射+阿米福汀组16只：单次全胸部照射10Gy+阿米福汀溶液(20mg/kg),8周内每周两次经小鼠尾静脉注射阿米福汀溶液；(3)单纯照射组16只：单次全胸部照射10Gy；(4)照射+毛蕊异黄酮低剂量组16只：单次全胸部照射10Gy+毛蕊异黄酮溶液(10mg/kg),8周内每周两次经小鼠尾静脉注射毛蕊异黄酮溶液；(5)照射+毛蕊异黄酮高剂量组16只：单次全胸部照射10Gy+毛蕊异黄酮溶液(20mg/kg),8周内每周两次经小鼠尾静脉注射毛蕊异黄酮溶液；(6)单纯给药组8只：在虚拟照射前30min,经小鼠尾静脉注射毛蕊异黄酮溶液0.1ml,之后8周内每周两次经小鼠尾静脉注射毛蕊异黄酮(20mg/kg)。照射后1、2、4、8周时,各试验小组取2-4只摘眼球取血,收集血液离心后取上层血清置于-70℃保存。随后将小鼠胸部解剖,取左肺组织置于中性福尔马林中固定,包埋,切片,HE染色；取右肺组织置于-70℃保存,通过Western blot和免疫组化检测NF-κB和MAPK两条通路的蛋白表达情况。根据Szapiel等的方法统计各组小鼠的肺泡炎程度,Elisa法检测血清中IL-6、TNF-α、TGF-β1的水平,黄嘌呤氧化酶法检测血清中总SOD活力。结果：照射后单纯照射组的小鼠有明显的肺炎,检测血清中总SOD的活力,照射+阿米福汀组、照射+毛蕊异黄酮高剂量组、照射+毛蕊异黄酮低剂量组较单纯照射组的血清中总SOD活力升高(p0.05)；照射+阿米福汀组、照射+毛蕊异黄酮高剂量组、照射+毛蕊异黄酮低剂量组之间无明显差别(p0.05)。检测血清中IL-6、TNF-α、TGF-β1的水平,照射+阿米福汀组、照射+毛蕊异黄酮高剂量组、照射+毛蕊异黄酮低剂量组较单纯照射组均降低(p0.05)；照射+阿米福汀组、照射+毛蕊异黄酮高剂量组、照射+毛蕊异黄酮低剂量组之间无明显差异(p0.05)。Western blot检测发现,照射+阿米福汀组、照射+毛蕊异黄酮高剂量组、照射+毛蕊异黄酮低剂量组与单纯照射组比较肺组织中NF-κB p65、p38、JNK、p44/42蛋白表达量均有降低,照射+毛蕊异黄酮高剂量组、照射+毛蕊异黄酮低剂量组、照射+阿米福汀组和单纯照射组相比较,IκB-α的蛋白表达均增高,且照射+阿米福汀组、照射+毛蕊异黄酮高剂量组、照射+毛蕊异黄酮低剂量组之间的差异不明显。结论：毛蕊异黄酮对放射性肺损伤有一定的防护作用,给予毛蕊异黄酮组的小鼠肺部炎症情况有所改善,血清中IL-6、TNF-α、TGF-β1的水平降低,总SOD活力增加,其抗炎机制可能与抑制NF-κB和MAPK通路有关。
【关键词】：毛蕊异黄酮 放射性肺损伤 NF-κB MAPK IL-6 TNF-α TGF-β1 SOD
【学位授予单位】：济南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R73-36
【目录】：

• 研究生导师和课题指导小组成员介绍4-7
• 摘要7-9
• Abstract9-11
• 主要符号表11-12
• 第一章 前言12-15
• 第二章 材料与方法15-30
• 2.1 实验材料15-17
• 2.2 实验方法17-18
• 2.3 实验步骤及观察指标18-29
• 2.4 统计学方法29-30
• 第三章 实验结果30-39
• 3.1 观察小鼠肺组织的外观30
• 3.2 HE染色结果及病理分级30-32
• 3.3 血清总SOD活力测定结果32
• 3.4 血清中(IL-6、TNF-α、TGF-β1)表达量测定32-34
• 3.5 Western blot结果34-35
• 3.6 免疫组化结果35-39
• 第四章 讨论39-44
• 第五章 结论44-45
• 参考文献45-47
• 综述47-54
• 参考文献52-54
• 攻读学位期间取得的研究成果54-55
• 致谢55

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本文编号：734895