电化学DNA传感器用于急性白血病相关物质的检测
发布时间:2017-09-02 15:13
本文关键词:电化学DNA传感器用于急性白血病相关物质的检测
更多相关文章: 电化学DNA传感器 信号放大 同时检测 急性白血病
【摘要】:急性白血病对儿童身体健康危害极大,其分型和全面诊断对及时有效治疗意义重大。从遗传角度来看急性白血病是由基因突变(如p53基因)引起的,这些基因的突变会引起突变细胞在形态及分子水平上的变化并引发细胞大量恶性增殖。由于癌症的发生和恶性发展主要是由复杂的分子水平上的变化所诱导的,因此对分子水平的分析物(如溶菌酶Lys和γ-干扰素IFN-γ)进行灵敏及特异性检测有助于了解患者的免疫水平和疾病分型,从而辅助诊断。电化学DNA传感器因具有诸多优点近年来在特定序列DNA检测、目标蛋白检测方面应用广泛。其中,兼容性特点使电化学传感器在物质的同时检测方面受到人们广泛关注。而随着人们对信号放大技术研究的不断深入,对检测灵敏度有显著提高的信号放大策略也越来越多的被应用于分析领域。本文基于信号放大策略以及多种分析物同时检测目的,建立电化学DNA传感器用于急性白血病相关物质(p53基因、Lys、IFN-γ)检测。基于四重信号放大策略构建了免标记电化学传感器用于超灵敏检测p53基因。利用DNAzyme的催化性能、切刻内切酶(N.BstNB I)协助的目标循环策略、AuNPs大的比表面积和极好的电催化能力以及石墨烯(GR)大的比表面积和极好的电子转移能力对检测信号进行放大。该传感器可检测到3.29×10-16 M的p53基因。利用DNAzyme的催化产生信号避免了复杂的标记过程。基于适体识别和电化学signal-on、signal-off模式利用一个电极构建了新颖的双重传感器首次用于急性白血病两种分析物(Lys和IFN-γ)同时检测。该传感器制备方法简单,可经过简单步骤再生并具有较高的检测灵敏度。此外,该传感器具有良好的抗干扰性并可用于实际样品的检测。
【关键词】:电化学DNA传感器 信号放大 同时检测 急性白血病
【学位授予单位】:青岛大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R733.71;O657.1
【目录】:
- 摘要2-3
- Abstract3-7
- 第一章 引言7-19
- 1.1 急性白血病简介7-8
- 1.2 急性白血病相关分析物检测方法——DNA传感器8-12
- 1.2.1 p53基因(特定序列基因)检测8-10
- 1.2.2 溶菌酶和干扰素(蛋白质)检测10-12
- 1.3 电化学DNA传感器的信号放大策略12-18
- 1.3.1 基于纳米材料的信号放大策略12-15
- 1.3.2 基于工具酶的信号放大策略15-18
- 1.4 电化学DNA传感器在物质同时检测方面的应用18
- 1.5 本论文构思及研究内容18-19
- 第二章 基于四重信号放大免标记的电化学传感器用于p53基因超灵敏检测19-32
- 2.1 引言19-20
- 2.2 实验部分20-22
- 2.2.1 主要试剂与仪器20-21
- 2.2.2 S2和CP修饰AuNPs的制备21
- 2.2.3 传感器的制备21
- 2.2.4 DNA杂交和剪切过程21-22
- 2.3 实验结果与讨论22-31
- 2.3.1 传感机理22-23
- 2.3.2 材料表征23-24
- 2.3.3 传感器逐步的电化学特性24-25
- 2.3.4 信号放大组分25-28
- 2.3.5 实验条件优化28-29
- 2.3.6 目标DNA的检测29-30
- 2.3.7 特异性研究30-31
- 2.4 结论31-32
- 第三章 单电极传感器用于同时检测溶菌酶和 γ-干扰素32-45
- 3.1 引言32-33
- 3.2 实验部分33-34
- 3.2.1 实验试剂与材料33
- 3.2.2 仪器33
- 3.2.3 传感器的制备33-34
- 3.2.4 电化学检测溶菌酶和 γ-干扰素34
- 3.2.5 传感器再生34
- 3.3 实验结果与讨论34-44
- 3.3.1 传感器的传感机制34-35
- 3.3.2 传感器的表征35-37
- 3.3.3 传感器的可行性37-39
- 3.3.4 实验条件优化39-41
- 3.3.5 γ-干扰素和溶菌酶的选择性和同时检测41-42
- 3.3.6 特异性和实际样品检测42-43
- 3.3.7 再生性和稳定性43-44
- 3.4 结论44-45
- 结论45-46
- 参考文献46-54
- 攻读学位期间研究成果54-55
- 主要符号对照表55-56
- 致谢56-57
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1 余煜棉;黄绍铨;黄金龙;黄政;温春光;;计算机多因素分类法在急性白血病微量元素谱上的应用[J];广东工学院学报;1988年02期
2 沙因,刘平生,刘国栋,林汉,杨兵,钱林生;急性白血病全血样品的质子激发X荧、光分析方法学研究[J];分析试验室;1993年03期
3 谭,
本文编号:779292
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