探讨依维莫司对肥胖型卵巢癌肿瘤生长的抑制作用及其相关机制

发布时间：2017-09-03 00:02

  本文关键词：探讨依维莫司对肥胖型卵巢癌肿瘤生长的抑制作用及其相关机制

  更多相关文章： 卵巢癌 依维莫司 增殖 mTOR 代谢

【摘要】：目的哺乳动物雷帕霉素靶蛋白mTOR是多条信号通路的关键调控因子,细胞增殖、代谢及肿瘤血管生成均与其密切相关。mTORC1靶向抑制剂依维莫司通过抑制mTOR激酶活性发挥抗肿瘤作用。临床流行病学统计结果发现肥胖与卵巢癌的发生发展及预后密切相关。肥胖能导致mTOR通路在上皮组织的过度激活。针对此点,应用mTOR靶向抑制剂治疗肥胖相关的癌症是一个合理的选择。但是肥胖影响依维莫司对卵巢癌治疗效果的机制不清楚。因此,本研究分别通过体内与体外实验分析依维莫司对卵巢癌细胞增殖的抑制作用,高糖浓度对卵巢癌细胞增殖、糖代谢的影响以及依维莫司对肥胖型卵巢癌小鼠的干预效果。方法应用MTT法、克隆实验、Annexin-PI法、流式细胞仪分别检测在正常培养条件及不同糖浓度培养条件下,依维莫司对卵巢癌细胞增殖、凋亡及周期的影响。应用DCFH法检测依维莫司干预后,卵巢癌细胞内活性氧产生的变化。应用trans-well小室检测卵巢癌细胞在依维莫司作用下黏附与侵袭能力的改变。应用2—NBDG检测不同糖浓度下,依维莫司对卵巢癌细胞葡萄糖吸收的影响。应用ATP生物发光检测试剂盒观察依维莫司对卵巢癌细胞ATP产生的影响。应用乳酸定量试剂盒检测依维莫司对卵巢癌细胞乳酸生成的影响。应用VEGF Elisa试剂盒检测依维莫司干预后,卵巢癌细胞及小鼠血清中VEGF的表达变化。应用蛋白印迹法检测不同培养条件下,依维莫司对P-AKT、P-S6、CDK6、cyclinD1、Mcl-1、Bcl-2、P21、MMP-9蛋白表达的影响。应用免疫组化检测依维莫司干预前后,小鼠肿瘤标本中Ki-67、P-S6、P-AKT、caspase-3的表达。应用代谢组学分析法分析依维莫司干预前后的小鼠肿瘤标本代谢产物的影响。结果依维莫司抑制卵巢癌细胞的增殖,诱导细胞凋亡和G1周期阻滞,增加癌细胞ROS产生。依维莫司干预后,卵巢癌细胞黏附与侵袭能力下降,mTOR通路表达下降。体外模拟高血糖实验显示在低糖培养条件下,依维莫司通过抑制糖酵解途径增强对卵巢癌细胞的抑制作用。此外,动物实验显示,依维莫司抑制肥胖型卵巢癌小鼠肿瘤的生长,Ki-67,P-S6表达降低,而P-AKT,Caspase-3表达增加。肿瘤组织代谢组学分析结果显示依维莫司通过不同的代谢途径降低肿瘤的代谢水平。结论对于肥胖型卵巢癌,mTOR靶向抑制剂依维莫司展现出较好的抑制效果,为肥胖卵巢癌患者的治疗提供新的选择。
【关键词】：卵巢癌 依维莫司 增殖 mTOR 代谢
【学位授予单位】：济南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.31
【目录】：

• 摘要6-8
• Abstract8-9
• 主要符号表9-10
• 第一章 前言10-12
• 第二章 不同培养条件下，mTOR抑制剂依维莫司对卵巢癌细胞增殖、代谢的影响12-27
• 2.1 实验材料12-13
• 2.2 主要溶液配制13-15
• 2.3 方法与步骤15-22
• 2.4 结果22-25
• 2.5 讨论25-27
• 第三章 依维莫司对肥胖型卵巢癌小鼠模型肿瘤生长代谢的影响27-33
• 3.1 材料与方法27-29
• 3.2 结果29-30
• 3.3 讨论30-33
• 第四章 结论33-34
• 参考文献34-38
• 附录38-42
• 攻读学位期间取得的研究成果42-43
• 致谢43

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 Gan-Lu Deng;Shan Zeng;Hong Shen;;Chemotherapy and target therapy for hepatocellular carcinoma:New advances and challenges[J];World Journal of Hepatology;2015年05期

，

本文编号：781639