肿瘤细胞新分子标记的探索

发布时间：2017-09-04 16:04

  本文关键词：肿瘤细胞新分子标记的探索

  更多相关文章： 抑癌基因 原癌基因 DNA标记 蛋白质标记

【摘要】：癌症又称恶性肿瘤,是人类重大基因疾病之一。在致癌因素作用下,细胞周期失去了正常的调控,导致细胞异常增殖与分化,从而形成肿瘤。肿瘤标记物在肿瘤细胞中表达量有显著的变化,其敏感度与特异性极高。目前检测血清中肿瘤标记物的含量是癌症诊断的常用方法。我们在不同的肿瘤细胞中检测抑癌基因和原癌基因的突变,发现抑癌基因P53和BRCA1不仅外显子有突变而且内含子中也存在突变；P53突变分别在外显子3上游内含子、外显子3下游内含子、外显子4、外显子4下游内含子、外显子5上游内含子、外显子10上游内含子以及外显子11；BRCA1突变分别在外显子7和8上游内含子,外显子10、12,外显子17下游内含子以及外显子20上游内含子。本文发现原癌基因Src和N-myc没有突变。通过二维电泳和质谱分析乳腺癌细胞MCF-7和乳腺上皮细胞MCF-10A,鉴定出7个差异表达的蛋白。其中,细胞角质蛋白-8、71 kDa热休克蛋白、94 kDa葡萄糖调节蛋白以及14-3-3ε蛋白在乳腺癌细胞MCF-7中的表达上调,而细胞角质蛋白-18、40S核糖体蛋白以及细胞角质蛋白-1的表达下调。因此,在探索乳腺癌早期诊断的新型分子标记的过程中P53外显子3上游内含子、外显子3下游内含子、外显子4下游内含子、外显子5上游内含子、外显子10上游内含子的突变,BRCA1外显子7和8上游内含子,外显子17下游内含子以及外显子20上游内含子的突变可能是新的DNA分子标记；14-3-3ε蛋白和40S核糖体蛋白是潜在的蛋白分子标记。
【关键词】：抑癌基因 原癌基因 DNA标记 蛋白质标记
【学位授予单位】：内蒙古大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R730.43
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-10
• 符号说明10-11
• 第一章 肿瘤标记物与癌症(文献综述)11-18
• 1.1 前言11
• 1.2 粘蛋白与癌症11-12
• 1.3 自身抗体与癌症12-15
• 1.4 CA125与癌症15-16
• 1.5 甲胎蛋白与癌症16
• 1.6 癌症抗原CA19-9与癌症16-17
• 1.7 其他肿瘤标记物与癌症17-18
• 第二章 肿瘤细胞分子标记的探索18-57
• 2.1 引言18-20
• 2.1.1 肿瘤标记物18
• 2.1.2 抑癌基因18-19
• 2.1.3 研究目的与意义19-20
• 2.2 实验材料20-30
• 2.2.1 细胞株20
• 2.2.2 引物20-25
• 2.2.3 培养基25-26
• 2.2.4 实验试剂26-30
• 2.2.5 酶类与其他试剂盒30
• 2.3 实验方法30-35
• 2.3.1 抑癌基因与原癌基因突变的检测30-32
• 2.3.2 乳腺癌细胞蛋白的提取32-34
• 2.3.3 差异表达蛋白的鉴定34-35
• 2.4 结果35-55
• 2.4.1 抑癌基因BRCA1突变谱35-44
• 2.4.2 抑癌基因P53突变谱44-52
• 2.4.3 原癌基因Src突变谱52
• 2.4.4 原癌基因N-myc突变谱52-53
• 2.4.5 乳腺细胞蛋白组的差异表达分析53-55
• 2.5 讨论55-57
• 2.5.1 DNA标记物55-56
• 2.5.2 蛋白分子标记56-57
• 参考文献57-63
• 致谢63

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本文编号：792483