肺麟癌miRNA差异表达谱的筛选及miR-223-3p抑制肺鳞癌细胞增殖的研究

发布时间：2017-09-08 15:26

  本文关键词：肺麟癌miRNA差异表达谱的筛选及miR-223-3p抑制肺鳞癌细胞增殖的研究

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【摘要】：目的构建肺鳞癌组织裸鼠移植模型,筛选移植成瘤和未成瘤的肺鳞癌组织间差异表达的mi RNAs,并探索mi RNA-223-3p对肺鳞癌细胞功能的影响。方法选取2013年8月-2014年1月于安徽省立医院胸外科经手术切除获得的21例人肺鳞癌组织,1 h内移植于裸鼠皮下,观察成瘤情况,并回顾性比较移植成瘤组和未成瘤组对应患者的肿瘤特性。采用免疫组织化学法检测移植瘤和对应患者肿瘤组织中p63、细胞角蛋白5/6、甲状腺转录因子-1和Ki-67的表达情况,并以组织化学评分(H-score)法进一步对患者肿瘤组织Ki-67表达进行半定量分析。借助mi RNA微阵列基因芯片建立移植成瘤和未成瘤的肺鳞癌组织间mi RNA差异表达谱。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)验证mi RNA芯片结果的可靠性,并检测mi RNA-223-3p在12对肺鳞癌和相应癌旁组织中的表达水平。FCM和MTT法检测mi R-223-3p对肺鳞癌SK-MES-1细胞周期、凋亡和增殖的影响。结果21例人肺鳞癌组织行裸鼠皮下移植后成功12例。裸鼠皮下移植的成瘤性与肿瘤分化程度(P=0.005)及大小(P=0.005)密切有关。裸鼠移植瘤组织中p63、CK5/6、TTF-1和Ki-67表达情况均与对应患者肺鳞癌组织的表达相一致。裸鼠皮下移植成瘤的相应肺鳞癌组织中Ki-67的H-score评分为2.76±0.54,显著高于移植未成瘤的肺鳞癌组织的1.37±0.77评分,差异有统计学意义(P=0.001)。相对移植未成瘤组织,在移植成瘤的肺鳞癌组织中共有27个mi RNAs显著上调,11个显著下调。mi R-451a、mi R-223-3p的芯片结果以及q RT-PCR检测表达均下调。同时,肺鳞癌组织中mi R-223-3p表达水平明显低于癌旁组织(P0.05),且在移植成瘤的肿瘤组织中下调的更显著。mi R-223-3p模拟物转染可抑制SK-MES-1细胞增殖(P0.05),且早期凋亡和S期细胞所占比例明显增加(P0.05)。结论成功构建了人肺鳞癌组织的裸鼠移植瘤模型,移植成瘤性与肿瘤组织Ki-67表达水平有关,且移植瘤保留了对应患者原肿瘤的基本生物学特性,提示该模型可为肺鳞癌的研究提供良好平台。此外,移植成瘤和未成瘤的肺鳞癌组织间存在差异表达的mi RNAs。mi R-223-3p在肺鳞癌组织中的表达水平下降,且在移植成瘤的组织中下调的更显著。肺鳞癌SK-MES-1细胞中过表达mi R-223-3p可以明显抑制细胞的增殖并诱导细胞凋亡和S期阻滞。
【关键词】：肺鳞癌 患者来源的移植瘤 微阵列芯片 微小RNA 细胞增殖
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R734.2
【目录】：

• 英文缩略词5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-13
• 材料与方法13-22
• 结果22-33
• 讨论33-36
• 结论36-37
• 参考文献37-40
• 附录40-41
• 致谢41-42
• 综述42-51
• 参考文献47-51

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本文编号：814799