高尔基磷蛋白3在非小细胞肺癌中的表达和作用研究

发布时间：2017-09-09 06:35

  本文关键词：高尔基磷蛋白3在非小细胞肺癌中的表达和作用研究

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【摘要】：目的：研究高尔基磷蛋白3(Golgi phosphoprotein3, GOLPH3)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织标本及非小细胞肺癌细胞系中的表达；探索GOLPH3对肺癌细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。 方法：免疫组化法(Immunohistochemistry, IHC)检测GOLPH3在非小细胞肺癌根治术后标本中的表达,分析其与临床病理情况及生存的关系；蛋白免疫印迹法(Western blot, WB)及Real Time-PCR检测非小细胞肺癌细胞系A549、SPC-Al中GOLPH3的表达水平,用Lipofectamine RNAiMAX转染法将GOLPH3-SiRNA转染至A549、SPC-Al以敲除GOLPH3,通过Western blot检测SiRNA的敲除效果,MTS检测敲除GOLPH3对NSCLC细胞增殖的影响；Western blot及流式细胞术检测敲除GOLPH3对细胞凋亡及细胞周期的影响。 结果：1、GOLPH3在NSCLC中的表达明显增高,在癌旁组织中不表达或低表达,差异有统计学意义(χ2=15.172,P0.01)；2、GOLPH3在NSCLC病理亚型、分化程度、淋巴结是否转移分组间的表达率均有统计学差异(χ2=12.98,χ2=36.12,χ2=4.71,P0.05)；而在年龄、肿瘤大小、临床分期分组间的表达均无统计学差异(χ2=0.498,χ2=0.875,χ2=0.841, P0.05); Kaplan-Meier生存分析显示GOLPH3高表达的患者生存时间短于GOLPH3低表达的患者(中位生存时间分别为22个月、45个月,P0.05)；3、使用SiRNA下调GOLPH3后,A549、SPC-Al细胞增殖均降低(P0.05),同时细胞凋亡增加(P0.01),细胞周期阻滞在G2/M期。 结论：1、GOLPH3在NSCLC中高表达,且与不良预后有关,表明GOLPH3可能参与NSCLC发生发展过程；2、下调GOLPH3能够抑制非小细胞肺癌细胞增殖,促进凋亡,阻滞细胞周期进程。
【关键词】：GOLPH3 非小细胞肺癌 凋亡 细胞周期
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R734.2
【目录】：

• 致谢4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-9
• 英文缩写9-10
• 目录10-11
• 1 引言11-13
• 2 材料和试剂13-18
• 3 实验方法18-25
• 4 实验结果25-34
• 5 讨论34-38
• 6 结论38-39
• 参考文献39-42
• 综述42-57
• 参考文献52-57
• 作者简历及在学期间发表论文57

【共引文献】

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本文编号：818869