莪术醇联合5-氟尿嘧啶对人胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡的影响

发布时间：2017-09-09 08:08

  本文关键词：莪术醇联合5-氟尿嘧啶对人胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡的影响

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【摘要】：目的：研究莪术醇(Curcumol)及5-氟尿嘧啶(5-FU)对人胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡的影响,并初步探讨其可能的作用机制。研究对象：人胃癌SGC-7901细胞方法：首先,配制莪术醇的母液,把结晶体溶解在无水乙醇中,得到的母液的浓度为5mg/ml。一共设置5组莪术醇用药组,其莪术醇的浓度分别是0μg/ml、8μg/ml、16μg/ml、32μ g/ml、64μg/ml,其中第1组,是溶剂对照组,是含有1%无水乙醇的1640的培养液。其次,设莪术醇及5-氟尿嘧啶联合用药组1、2、3、4组,分别为对照组(0μg/ml)、莪术醇培养液组(32μg/ml)、5-氟尿嘧啶培养液组(5μg/ml)、莪术醇(32μg/ml)+5-氟尿嘧啶(5μg/ml)联合培养液组。在正常条件下,我们培养SGC-7901细胞,培养48小时后,采用台盼蓝(Trypan blue)拒染法,检测其活性。用莪术醇和5-氟尿嘧啶以不同浓度、不同时间以及各种组合处理SGC-7901细胞后,采用噻唑蓝(MTT)法,检测细胞的增殖抑制率。采取流式细胞仪技术来检测胃癌SGC-7901细胞的凋亡率；免疫印迹法(Western Blot)检测Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白的表达水平；通过Caspase-3活性检测试剂盒来检测Caspase-3的酶活性的表达水平高低。结果：1. Trypan blue拒染实验结果显示,此胃癌细胞,符合本次实验的使用要求。各药物浓度培养液培养细胞后,胃癌细胞的增殖抑制率与溶剂对照组细胞相比,有明显的差异(P0.05),随着药物浓度的增高,胃癌细胞的增殖抑制率亦越高。其中,药物培养基培养细胞48h,对细胞的生长抑制作用最为明显。莪术醇与5-氟尿嘧啶联合用药组比单药处理组的细胞增殖抑制率明显上升(P0.05)。2、药物作用细胞48h后,流式细胞术检测结果显示,对照组细胞凋亡率约为2.37%,单用莪术醇组为13.43%,单用5-氟尿嘧啶组为10.59%,联合用药组凋亡率为24.11%,提示莪术醇有促进5-氟尿嘧啶诱导的肿瘤细胞凋亡的作用(P0.05)。3、Western Blot检测结果表明,莪术醇及5-氟尿嘧啶作用于SGC-7901细胞48h后,均能促进Bax蛋白的表达,抑制Bcl-2蛋白的表达,联合用药组对蛋白的促进和抑制作用明显高于单独使用化疗药组(P0.05)。4、Western Blot以及Caspase-3活性检测结果表明,莪术醇和5-氟尿嘧啶处理胃癌细胞48h后,均能促进Caspase-3蛋白和酶活性的表达,联合用药组蛋白及酶表达水平明显高于单独使用化疗药组(P0.05)。结论：1、莪术醇可以明显抑制SGC-7901细胞的增殖,促进凋亡,与5-氟尿嘧啶联合应用对胃癌细胞的增殖抑制及促凋亡作用更加明显。结果表明,莪术醇能增强胃癌细胞对化疗药物的敏感性。2、莪术醇及5-氟尿嘧啶可以通过调节凋亡蛋白bax/bcl-2的比例,激活Caspase-3,导致细胞凋亡,联合用药效应更明显。结果提示,提示莪术醇可能通过线粒体介导的内源性凋亡通路,促进5-氟尿嘧啶诱导的肿瘤细胞凋亡。
【关键词】：莪术醇 5-氟尿嘧啶 SGC-7901细胞 增殖 凋亡
【学位授予单位】：扬州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.2
【目录】：

• 中文摘要2-4
• Abstract4-9
• 符号说明9-10
• 前言10-13
• 第一部分：莪术醇及5-氟尿嘧啶对SGC-7901细胞增殖的影响13-21
• 1 材料和仪器13-14
• 2 实验方法14-16
• 3 结果16-21
• 第二部分：莪术醇及5-氟尿嘧啶对SGC-7901细胞凋亡率的影响21-25
• 1 材料和仪器21-22
• 2 实验方法22
• 3 结果22-25
• 第三部分：Western Blot检测莪术醇及5-氟尿嘧啶对SGC-7901细胞Bax、Bcl-2表达的影响25-32
• 1 材料和仪器25-26
• 2 实验方法26-29
• 3 结果29-32
• 第四部分：莪术醇及5-氟尿嘧啶对SGC-7901细胞Caspase-3蛋白和酶活性表达的影响32-39
• 1 材料和仪器32-33
• 2 实验方法33-36
• 3 结果36-39
• 讨论39-42
• 结论42-43
• 参考文献43-46
• 综述46-53
• 参考文献51-53
• 致谢53-54
• 攻读学位期间发表的学术论文目录54-55

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本文编号：819262