siRNA干扰EPCAM基因表达抑制结肠HCT116细胞株增殖和侵袭的研究

发布时间：2017-09-11 15:33

  本文关键词：siRNA干扰EPCAM基因表达抑制结肠HCT116细胞株增殖和侵袭的研究

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【摘要】：实验目的：结肠癌在我国是最常见的胃肠道恶性肿瘤之一,在我国,因结肠癌死亡者,男性死亡率占所有肿瘤的第5位,女性居第6位,结肠癌的发生与社会现状、生活习惯(尤其是饮食习惯、缺少体力活动)、遗传因素等有关。高龄、结直肠息肉病史、溃疡性结肠炎以及胆囊切除史也是结肠癌的高危因素。但总的来说,结肠癌的病因还不十分清楚。本研究旨在观察siRNA干扰EPCAM基因表达后对结肠癌HCT116细胞增殖和侵袭的影响,从而初步探讨EPCAM基因与结肠癌发生发展的关系。实验方法：将针对EPCAM基因不同位点的3个siRNA(分别命名为EPCAM-siRNA-1、EPCAM-siRNA-2、 EPCAM-siRNA-3)以及阴性对照(NC)分别转染结肠癌HCT116细胞,利用RT-PCR和Western-blot方法检测各组细胞转染后EPCAM mRNA及蛋白的表达水平。选取干扰效率最强的的一组siRNA转染结肠癌细胞,MTT法检测转染前后细胞的增殖活性,transwell实验检测转染前后细胞的侵袭能力变化。实验结果：3条EPCAM siRNA均能有效抑制EPCAM基因的表达,RT-PCR显示各干扰组mRNA表达量分别为0.18±0.02、0.43±0.03、0.68±0.02,均显著低于空白对照组的0.98±0.02以及阴性对照组的0.96±0.03(P=0.008),Western-blot结果显示各干绕组EPCAM蛋白表达量分别为0.22±0.03、0.43±0.02、0.71±0.03,均低于空白是对照组0.93±0.02和阴性对照组0.89±0.02(P=0.005)。选用干扰效率最高的EPCAM-siRNA-1转染结肠癌HCT116细胞后,MTT结果表明干扰组HCT116细胞生长活性受到抑制,转绕后48h后最明显,抑制率41%,与对照组相比差异具有统计学意义(P=0.013)。Transwell结果显示转染组细胞平均每视野侵袭至transwell膜上的个数为19个,明显低于空白对照组45个和阴性对照组41个(P=0.03)。结论：EPCAM siRNA可以有效抑制结肠癌HCT116细胞EPCAM的表达,可以抑制HCT116细胞的增殖和侵袭。
【关键词】：结肠癌 上皮细胞粘附分子 RNA干扰 增殖 侵袭
【学位授予单位】：滨州医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.35
【目录】：

• 研究背景4-6
• 中文摘要6-7
• 英文摘要7-9
• 英文缩略词9-10
• 前言10-11
• 文献回顾11-21
• 参考文献17-21
• 前言21-23
• 实验材料23-24
• 方法24-27
• 结果27-30
• 讨论30-33
• 全文总结33
• 参考文献33-35
• 论文发表35-36
• 致谢36

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

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本文编号：831562