GRHL2基因促进非小细胞肺癌细胞的增殖和克隆形成

发布时间：2017-09-13 00:07

  本文关键词：GRHL2基因促进非小细胞肺癌细胞的增殖和克隆形成

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【摘要】：目的:研究GRHL2(Grainy head-like 2)在非小细胞肺癌细胞中的表达情况以及其对非小细胞肺癌细胞增殖、克隆形成及迁移的影响。方法:首先通过蛋白印迹实验检测GRHL2在非小细胞肺癌细胞与正常人支气管上皮细胞中的蛋白表达是否存在明显差异;进而选取A549和H1299两株肺癌细胞,分为四组:NC组为无处理阴性对照组;CON组为转染非特异性si RNA的阴性对照组;Si-1组为转染GRHL2 siRNA1实验组;Si-2组为转染GRHL2 siRNA2实验组。分别进行RNA干扰实验与蛋白表达鉴定,再采用细胞结晶紫染色实验、低血清实验、克隆形成实验和划痕实验等方法,探索GRHL2对非小细胞肺癌细胞增殖、克隆形成、迁移的影响。结果:蛋白印迹试验的结果显示非小细胞肺癌细胞A549、H1299、SPC-A1、H292中GRHL2的蛋白表达水平较正常人支气管上皮细胞明显升高(P0.05)。敲低GRHL2的表达可明显降低非小细胞肺癌细胞的增殖、克隆形成(P0.05),而对其迁移能力无明显影响(P0.05)。结论:GRHL2基因的蛋白表达水平在非小细胞肺癌细胞中表达明显上调;GRHL2可发挥促进非小细胞肺癌细胞增殖、克隆的作用,然而对其迁移能力无明显影响。
【关键词】：非小细胞肺癌 GRHL2 细胞增殖
【学位授予单位】：南昌大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R734.2
【目录】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-7
• 中英文缩略词表7-8
• 第1章 引言8-10
• 第2章 材料与方法10-19
• 2.1 材料10-12
• 2.1.1 细胞10
• 2.1.2 主要试剂10-11
• 2.1.3 主要仪器设备11-12
• 2.2 实验设计和方法步骤12-19
• 2.2.1 细胞培养（以100mm培养皿为例）12-13
• 2.2.2 Western-Blot13-15
• 2.2.3 siRNA转染15-16
• 2.2.4 结晶紫实验检测肺癌细胞增殖情况16-17
• 2.2.5 低血清实验17
• 2.2.6 克隆形成实验17
• 2.2.7 划痕实验17-18
• 2.2.8 统计学处理18-19
• 第3章 结果19-24
• 3.1 GRHL2在非小细胞肺癌细胞与正常支气管上皮细胞中的表达情况19
• 3.2 敲低GRHL2对细胞增殖、克隆形成、迁移能力的影响19-24
• 3.2.1 基因干扰效果鉴定19-20
• 3.2.2 结晶紫实验20-21
• 3.2.3 低血清实验21
• 3.2.4 细胞克隆形成实验21-22
• 3.2.5 划痕实验22-24
• 第4章 讨论24-27
• 第5章 结论与展望27-28
• 5.1 结论27
• 5.2 展望27-28
• 致谢28-29
• 参考文献29-32
• 攻读学位期间的研究成果32-33
• 综述 GRHL2基因在肿瘤领域的研究新进展33-37
• 参考文献36-37

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本文编号：840335