miR-200c下调DCLK1抑制人胃癌SGC-7901细胞迁移与侵袭的研究

发布时间：2017-09-14 21:27

  本文关键词：miR-200c下调DCLK1抑制人胃癌SGC-7901细胞迁移与侵袭的研究

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【摘要】：目的:研究mi R-200c对胃癌SGC-7901细胞迁移侵袭能力的影响及其分子机制。方法:利用细胞转染技术将LV-hsa-miR-200c慢病毒(miR-200c组)、病毒空载体分别转染人胃癌细胞株。以病毒空载体转染组作为阴性对照组,以未转染组作为空白对照组。转染72小时后在荧光显微镜下观察转染效率。细胞划痕实验和Transwell侵袭实验检测上调miR-200c水平对SGC-7901细胞迁移和侵袭能力的影响。RT-PCR和Western Blot方法检测mi R-200c可能靶基因DCLK1 mRNA及蛋白的表达水平。结果:转染72小时后在荧光显微镜下观察计数,mi R-200c组及病毒空载体组转染人胃癌细胞SGC-7901绿色荧光可达90%以上。细胞划痕实验显示,miR-200c组分别在8h、24h后划痕距离较空白对照组、阴性对照组增宽(P0.05);空白对照组与阴性对照组相比,两者无明显统计学差异(P0.05)。Transwell侵袭实验显示miR-200c组穿膜细胞数较空白对照组、阴性对照组减少(P0.05);空白对照组与阴性对照组相比,两者无明显统计学差异(P0.05)。这表明miR-200c过表达后SGC-7901细胞迁移和侵袭能力受到明显抑制。生物信息学软件预测显示DCLK1可能为mi R-200c其中的靶基因之一。RT-PCR和Western Blot结果显示:在mi R-200c上调的胃癌SGC-7901细胞内,DCLK1 mRNA和蛋白表达显著降低(P0.05);空白对照组与阴性对照组相比,两者无明显统计学差异(P0.05)。结论:miR-200c上调能抑制人胃癌SGC-7901细胞迁移与侵袭,可能与下调DCLK1有关。
【关键词】：胃癌 miR-200c DCLK1 迁移 侵袭
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R735.2
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-8
• 中、英文词对照表8-10
• 第1章 前言10-14
• 第2章 材料与方法14-26
• 第3章 实验结果26-32
• 第4章 讨论32-36
• 第5章 结论36-38
• 参考文献38-44
• 综述： miR-200c 在肿瘤中的研究进展44-52
• 参考文献48-52
• 致谢52

【参考文献】

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本文编号：852439