NCI-H446型SCLC细胞鸡胚尿囊膜成瘤实验及其与MMP-9的关系研究

发布时间：2017-09-16 17:42

  本文关键词：NCI-H446型SCLC细胞鸡胚尿囊膜成瘤实验及其与MMP-9的关系研究

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【摘要】：目的：通过将NCI-H446型小细胞肺癌(Small Cell Lung Cancer, SCLC)细胞接种至鸡胚绒毛尿囊膜,观察成瘤过程中鸡胚中MMP-9含量变化及动态观察肿瘤组织及瘤旁的血管形成情况。方法：①.NCI-H446型SCLC细胞原代培养24h后换液,去除杂质及死细胞后,其余细胞贴壁良好且形态正常。对此细胞进行传代培养,收集对数期细胞备用。②.鸡胚尿囊膜SCLC细胞成瘤模型的建立。③.利用形态学方法动态观察成瘤过程及瘤旁血管形成情况。④.收集各个不同时间点鸡胚血清,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测不同时间点鸡胚模型血清中MMP-9的含量。结果：①. NCI-H446型SCLC传代培养成功且随着种植细胞浓度的增加可以成瘤。②.成功地建立了NCI-H446型SCLC细胞鸡胚绒毛尿囊膜成瘤模型。③.与对照组相比,NCI-H446型SCLC细胞具有促进MMP-9生成的作用。④.MMP-9的含量与SCLC细胞计数成正相关。5.MMP-9的含量与肿瘤周围的血管数目成正相关。结论：①.SCLC细胞鸡胚绒毛尿囊膜成瘤模型易于操作、便于控制、易于实现,是研究肿瘤细胞种植成瘤的较好的动物模型。该模型试验周期短,便于动态观察肿瘤的生长及肿瘤血管的生成,对SCLC细胞的侵袭转移研究有重要意义。②.随着种植SCLC细胞密度的增加,鸡胚绒毛尿囊膜上逐渐稳定成瘤。当种植浓度达到4×106mL-1时,第三天,可导致鸡胚血清中MMP-9的含量明显升高,第七天达到最高值,说明SCLC细胞能通过产生MMP-9导致细胞的远处转移。对MMP-9的抑制,是未来化疗药物研究的一个重要方向。③.MMP-9的含量与肿瘤周围毛细血管的密度有密切关系。说明,MMP-9可能通过对血管生成的促进作用来辅助肿瘤细胞的远处转移,这种作用的具体机制有待进一步研究。
【关键词】：SCLC细胞 MMP-9 鸡胚绒毛尿囊膜 肿瘤转移
【学位授予单位】：扬州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R734.2
【目录】：

• 中文摘要2-3
• 英文摘要3-7
• 符号说明7-8
• 前言8-11
• 材料与方法11-17
• 实验设备12-13
• 实验方法13-14
• 2.1 NCI-H446型SCLC细胞的培养13
• 2.2 细胞的消化、传代13
• 2.3 细胞计数13-14
• 2.4 细胞的冻存14
• 2.5 细胞的复苏14
• 3 鸡胚绒毛尿囊膜成瘤模型的建立14-16
• 3.1. 种蛋的选取及孵化14-15
• 3.2. 鸡胚绒毛尿囊膜模型的制作15-16
• 4.鸡胚血清中MMP-9的检测16-17
• 5.统计学处理17
• 结果17-18
• 讨论18-20
• 经验与反思20-21
• 参考文献21-24
• 附表24-32
• 综述32-41
• 参考文献38-41
• 致谢41-42
• 攻读学位期间发表的学术论文目录42-43

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本文编号：864510