甲状腺乳头状癌细胞对促甲状腺激素反应性研究

发布时间：2017-09-20 20:16

  本文关键词：甲状腺乳头状癌细胞对促甲状腺激素反应性研究

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【摘要】：目的:甲状腺癌是内分泌系统疾病中发病率最高的恶性肿瘤,是最常见的甲状腺恶性肿瘤,约占全身恶性肿瘤的1%。其中甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)是最为常见的病理类型[1],约占成人甲状腺癌的60%和儿童甲状腺癌的全部。近几十年间,甲状腺乳头状癌发病率在世界范围内呈现出迅猛增长的态势。然而甲状腺乳头状癌的恶性程度较低,即便较早出现颈淋巴结转移,但是预后较好,10年生存率仍能达到90%以上。目前被公认的甲状腺乳头状癌标准的综合治疗方式是手术切除治疗以及术后辅助治疗。手术治疗是甲状腺乳头状癌的基本治疗方法,术后辅助治疗可进一步降低术后复发率。其中内分泌治疗在术后辅助治疗中占据着重要地位。内分泌治疗即为甲状腺乳头状癌患者接受手术后应终身服用甲状腺素片,通过下丘脑-垂体-甲状腺轴的自身调节来完成,其意义在于预防甲状腺功能减退和抑制促甲状腺素(thyroid stimulating hormone,TSH)。内分泌治疗甲状腺乳头状癌的主要依据为甲状腺乳头状癌细胞内存在TSH受体的表达,而且分化程度越高的肿瘤,其TSH受体表达越高。患者通过口服药物摄入适量的甲状腺素,促使人体内分泌的TSH减少,从而降低TSH对残余癌组织的刺激。大部分临床学者认为,甲状腺乳头状癌患者长期使用促甲状腺素(TSH)抑制剂量的甲状腺素能降低复发率和死亡率[2,3]。特别是在甲状腺乳头状癌的高危组,内分泌治疗可以使病人的无病生存率提高2-3倍[4]。但是,患者长期服用超生理量甲状腺素会有一定副作用产生。长期TSH抑制会导致患者心率加快,频发的房性期前收缩。据统计,TSH抑制使房颤发生率比正常增加3倍[5]。并且长期TSH抑制可导致绝经后妇女患骨质疏松症的风险增高,但这一般不发生于绝经前的女性[6]。而且TSH要发挥作用必须要与甲状腺细胞膜上或细胞质中促甲状腺激素受体(TSHR)相结合。有研究表明:甲状腺癌细胞的TSHR基因表达存在缺失[7]。TSHR在甲状腺乳头状癌组织中的阳性表达率较低,并且随着分化型甲状腺癌临床分期的增加TSHR阳性表达率逐渐下降[8]。在甲状腺乳头状癌中,TSH高含量与TSHR低表达形成矛盾。这其中的原因并不十分清楚,但是可以肯定的是:促甲状腺素与促甲状腺素受体之间的作用复杂,存在多种作用机制[9]。近年来,学术界对TSH治疗在甲状腺乳头状癌的抑制作用是否有效依然存在争议。临床实际工作中我们发现:有一部分甲状腺乳头状癌术后的患者,规律口服甲状腺素制剂治疗的若干年后仍出现了肿瘤的复发以及颈部淋巴结转移,需要行二次手术。因此,为了有效降低TSH抑制治疗副作的用发生,实施个体化治疗具有重要意义。本研究旨在综合探讨TSH在体外培养甲状腺乳头状癌细胞中的作用和意义。方法:取河北省医科大学第二医院甲状腺外科2014年10月-2015年1月间术中新鲜甲状腺乳头状癌组织标本5例,经术中冰冻及术后石蜡病理证实。所有甲状腺乳头状癌患者术前均未经过放,化疗。将新鲜组织30分钟内种植培养瓶中,培养甲状腺乳头状癌细胞。待长成单层细胞后,分为四个组,分别给予不同浓度的TSH(0m U/L、10m U/L、50m U/L、100m U/L),种于24孔培养板内于实验10天运用流式细胞仪对细胞的增殖及凋亡进行检测。各数据采用t检验,检验标准为P0.05有统计学意义。结果:1甲状腺乳头状癌细胞的培养及观察甲状腺乳头状癌细胞直接种植于培养瓶中,细胞生长缓慢。细胞培养24h后,可见少量细胞贴壁,细胞呈椭圆形、梭形,可见伪足,细胞不再移动,贴壁主要见于细胞团处,但大量细胞仍悬浮未贴壁,呈圆形,随培养液移动。4-5d后,大量细胞贴壁。进入甲状腺乳头状癌细胞的潜伏期,期间细胞的伪足进一步伸长,细胞呈多角形,细胞核及细胞体积逐渐增大。5-7d后,细胞进入生长较快增殖期,细胞继续伸长且向四周生长,彼此连接,呈长梭形,几乎无圆形及椭圆形细胞,已贴满培养瓶底一半以上。7-8d后,于培养瓶中形成单层细胞,于高倍镜下可见圆形核仁及其他细胞器。2不同浓度的TSH培养细胞之间的比较2.1根据测定流式细胞仪测定细胞周期,筛选增殖结果,通过统计软件SPSS13.0,计算多个样本的t检验,P0.05,说明各组之间有统计学意义。绘制直方图。测Pearson相关性R2=0.955,相关性良好且呈正相关。2.2根据流式细胞仪测定细胞凋亡结果,均为小于5%。结论:1 TSH对体外培养甲状腺乳头状癌细胞有诱导增殖作用,且随着TSH浓度的增加,诱导增殖的能力越强。2 TSH对体外培养甲状腺乳头状癌细胞无诱导凋亡作用。3人甲状腺乳头状癌细胞原代培养技术适用于甲状腺乳头状癌细胞功能方面的研究,填补了其他研究方法不能研究活细胞功能的空缺,为研究甲状腺乳头状癌的发生、发展机理及其特性提供了更为合适的替代工具。
【关键词】：甲状腺乳头状癌 促甲状腺激素 内分泌治疗 细胞培养 流式细胞仪
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R736.1
【目录】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文缩写11-12
• 前言12
• 材料与方法12-16
• 结果16-18
• 附图18-22
• 附表22-23
• 讨论23-27
• 结论27
• 参考文献27-31
• 综述 甲状腺癌术后辅助治疗31-43
• 参考文献38-43
• 致谢43-44
• 个人简历44

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 何冉;雌、孕激素受体在甲状腺肿瘤组织中的表达[J];中国医师杂志;2002年11期

2 鲁泽清;;外放射和放射性碘治疗甲状腺癌[J];国外医学.外科学分册;1981年04期

3 金东岭;李联祥;刘现军;梁爽;李兰梅;席丰;高金生;李沛;;雌激素受体ERα、ERβ亚型与Ki-67在不同甲状腺病变组织中的表达及其意义[J];解放军医学杂志;2008年09期

4 余永利,金常青,陈立波,陆汉魁,朱瑞森;~(131)I治疗分化型甲状腺癌肺转移对肺功能的影响[J];中华核医学杂志;2002年02期

5 哈献文;;头颈部恶性肿瘤广泛切除术的应用与评价[J];肿瘤防治研究;1979年05期

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本文编号：890152