Gata6在胰岛素瘤中的作用及机制研究

发布时间：2017-09-21 16:44

  本文关键词：Gata6在胰岛素瘤中的作用及机制研究

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【摘要】：目的:胰岛素瘤是一类低增殖率肿瘤,发病比较罕见,对其发病机制了解甚少。近来研究发现Gata6在调控胰岛细胞的分化的过程中发挥重要作用,亦参与体内一些肿瘤的形成。目前关于Gata6在胰岛素瘤中表达及作用未见报道,本实验拟探讨Gata6在胰岛素瘤中的表达及作用机制。方法:通过RT-PCR及Western-blot技术检测Gata6在胰岛素瘤组织瘤体及瘤旁的表达差异;利用免疫荧光技术检测Gata6在胰岛素瘤及正常胰腺切片中的表达及定位。转染Si RNA干扰Min6细胞Gata6表达后流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期变化,同时利用荧光探针DCFH-DA检测细胞内ROS变化。Gata6质粒过表达后流式细胞仪检测细胞周期变化及Brd U免疫组化观察Min6细胞的增殖。棕榈酸对待Min6细胞,观察细胞活力变化、细胞凋亡、ROS变化以及Gata6表达变化,过表达Gata6后棕榈酸对待,观察ROS、Bcl-2及Bax变化。结果:1)Gata6在小鼠胰岛素瘤细胞系Min6细胞、大鼠胰岛素瘤细胞系INS-1细胞以及人胰岛素瘤中均存在表达,Gata6在胰岛素瘤瘤体组织表达较瘤旁组织表达显著增高,具有统计学差异(p0.05)。2)Gata6免疫荧光显示,胰岛素瘤瘤体正常胰岛结构丧失,Gata6主要在定位于细胞核中,在胰岛素瘤中大量表达。3)si RNA干扰Gata6表达后,细胞凋亡较对照组显著增加,具有统计学差异(p0.01);细胞周期分析显示处在S期细胞比例减少(p0.01),提示沉默Gata6表达后对细胞的增殖起一定的抑制的作用。4)过表达Gata6对Min6细胞的细胞周期及增殖无明显的影响。5)500u M棕榈酸对待Min6细胞24h导致Gata6表达较对照组显著下降(P0.01),可引起细胞内ROS产生增加(p0.05)。6)si RNA干扰Gata6表达导致细胞ROS产生增加(p0.01),过表达Gata6可减少PA诱导的ROS的产生(p0.05)。7)棕榈酸对待Min6细胞导致Bcl-2表达减少,Bax表达增加,且Bcl-2/Bax比值减少,差异具有统计学意义(P0.05);过表达Gata6后使PA诱导的Bax减少(p0.05),Bcl-2/Bax比值增加,且差异具有统计学意义(p0.05),提示过表达Gata6后可一定程度改善PA导致的细胞凋亡。结论:Gata6在胰岛素瘤中高表达,通过减少ROS的产生及胰岛素瘤细胞的凋亡,可能在胰岛素瘤发病机制中发挥重要的作用。
【关键词】：胰岛素瘤 Gata6 ROS 凋亡
【学位授予单位】：上海交通大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R736.7
【目录】：

• 摘要6-8
• ABSTRACT8-13
• 引言13-16
• 实验材料与方法16-47
• 结果47-62
• 讨论62-64
• 结论64-65
• 参考文献65-70
• 致谢70-72
• 发表录用论文72

【参考文献】

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本文编号：895698