组蛋白乙酰转移酶GCN5在胶质瘤发生发展中的作用研究

发布时间：2017-09-22 09:15

  本文关键词：组蛋白乙酰转移酶GCN5在胶质瘤发生发展中的作用研究

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【摘要】：胶质瘤是最常见的原发性脑肿瘤,预后较差。胶质瘤存在多种分子基因变异机制,除了一些癌基因和抑癌基因之外,还存在有表观遗传学机制的改变。在表观遗传学中,有两种最为常见的的调节方式：组蛋白修饰及DNA甲基化。组蛋白修饰中以组蛋白乙酰化最为常见。组蛋白乙酰化过程中最为重要的酶是组蛋白乙酰转移酶(Histone Acetyltransferases, HATs)和组蛋白去乙酰化酶(Histone deacetylases, HDACs).赖氨酸乙酰转移酶GCN5是第一个在酵母中被发现的组蛋白乙酰转移酶,它引起的赖氨酸位点的乙酰化能使组蛋白与DNA的结合减弱,有利于起始基因转录。赖氨酸乙酰转移酶GCN5调节许多细胞过程,如细胞增殖、分化、细胞周期及DNA损伤的修复。然而,其在神经胶质瘤中的生物学作用尚处于探究阶段。在本研究中,我们通过Western blot和RT-PCR发现在胶质瘤病人组织样品和神经胶质瘤细胞株中GCN5蛋白水平和mRNA水平都出现了高表达。同时还证明,GCN5的表达与脑胶质瘤组织PCNA、MMP9的表达均呈正相关。高级别胶质瘤中的GCN5表达水平远远高于低级别胶质瘤组织。在我们的血清饥饿和释放模型实验中,GCN5与PCNA水平随时间推移均逐渐增加。所有这些结果表明GCN5参与胶质瘤的发展。在U87和U251细胞系中,通过Sirna于扰降低GCN5表达,我们发现GCN5下调抑制细胞增殖、入侵和集落形成能力。此外,GCN5下调抑制p-STAT3、 p-AKT、p-ERK1/2、PCNA、MMP9表达和上调p21的表达。总之,GCN5通过调节细胞增殖和入侵,在胶质瘤发生中展现出重要的作用,这表明GCN5是一个潜在的治疗胶质瘤的靶点。
【关键词】：神经胶质瘤 GCN5 STAT3
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R739.41
【目录】：

• 摘要7-8
• Abstract8-9
• 第一章 前言9-16
• 1.1 胶质瘤9-11
• 1.1.1 病因与发病机制9
• 1.1.2 分类9
• 1.1.3 胶质瘤分级9-10
• 1.1.4 临床表现10
• 1.1.5 诊断与鉴别诊断10
• 1.1.6 治疗及预后10-11
• 1.2 表观遗传学与肿瘤11-12
• 1.2.1 DNA甲基化11
• 1.2.2 组蛋白修饰11-12
• 1.3 GCN5概述12-14
• 1.3.1 GCN5结构12-13
• 1.3.2 GCN5与肿瘤13
• 1.3.3 GCN5在肿瘤中分子机制13-14
• 1.4 PCNA概述14-15
• 1.5 MMP9概述15
• 1.6 立题背景15-16
• 第二章 材料与方法16-23
• 2.1 材料16-18
• 2.1.1 胶质瘤组织、细胞和质粒16-17
• 2.1.2 主要试剂17-18
• 2.1.3 主要仪器18
• 2.2 方法18-23
• 2.2.1 细胞培养18-19
• 2.2.2 siRNA细胞转染19-20
• 2.2.3 MTS测细胞生长20
• 2.2.4 集落形成实验测细胞生长20
• 2.2.5 细胞侵袭实验20
• 2.2.6 蛋白样品收集20-21
• 2.2.7 蛋白浓度测定21
• 2.2.8 蛋白质SDS-PAGE凝胶电泳以及Western boltting分析21-22
• 2.2.9 RNA提取22
• 2.2.10 CDNA合成22-23
• 2.2.11 实时荧光定量PCR(Real-time PCR)23
• 2.2.12 统计学分析23
• 第三章 结果与讨论23-32
• 3.1 神经胶质瘤组织中GCN5与PCNA、MMP9均广泛过表达,并呈正相关23-25
• 3.2 神经胶质瘤组织中GCN5于高级别组中高表达25-26
• 3.3 胶质瘤细胞系中GCN5广泛过表达26-27
• 3.4 GCN5下调抑制细胞增殖和集落形成27-29
• 3.5 GCN5下调抑制胶质瘤细胞的侵袭能力29-30
• 3.6 GCN5下调抑制p-STAT3、p-AKT、p-ERK1/2、PCNA、MMP9表达和上调p21的表达30-31
• 3.7 讨论与分析31-32
• 参考文献32-38
• 综述38-44
• 参考文献42-44
• 本人简历44
• 研究成果44-45
• 致谢45

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 ;The Molecular Mechanism of HDAC Inhibitors in Anticancer Effects[J];Cellular & Molecular Immunology;2006年04期

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本文编号：899978