乳腺癌组织及MCF-7细胞中HMGA1的表达分析

发布时间：2017-09-24 23:13

  本文关键词：乳腺癌组织及MCF-7细胞中HMGA1的表达分析

  更多相关文章： HMGA1 乳腺癌MCF-7细胞 增殖 迁移 侵袭

【摘要】：目的:探讨HMGA1对人乳腺癌MCF-7细胞增殖与迁移侵袭能力的影响及其对乳腺癌临床意义的研究,初步明确HMGA1基因在乳腺癌发生中的作用,为阐明乳腺癌发病分子机制提供一定的实验依据。方法:采用体外培养的乳腺癌细胞系MCF-7细胞为研究对象,研究HMGA1基因对人乳腺癌细胞生长增殖与迁移侵袭的影响。运用细胞转染技术用HMGA1基因高表达质粒转染MCF-7细胞系细胞。实验分为四部分:第一部分研究HMGA1基因对人乳腺癌MCF-7细胞生长增殖能力的影响。实验分组为2组,即对照组(空质粒转染)和HMGA1转染组,将转染细胞种至培养孔板内,分别培养24h、48h后提取mRNA检测HMGA1表达量,另分别培养2天、4天及6天后进行细胞计数,检测细胞生长能力。克隆形成实验:实验亦分为2组,即对照组(空质粒转染)、HMGA1转染组,将转染细胞种至培养孔板内并培养7日后观察细胞群落形成情况。第二部分研究HMGA1基因对人乳腺癌MCF-7细胞迁移能力的影响。实验分组为2组,即对照组(空质粒转染)及HMGA1转染组,将转染细胞种至装有无血清培养基的transwell小室内,下层培养基装有含血清培养基,最后计算迁移至下层培养皿中细胞数占细胞总数百分比,检测HMGA1对MCF-7细胞迁移能力的影响。第三部分研究HMGA1基因对人乳腺癌MCF-7细胞侵袭能力的影响。第四部分研究HMGA1表达对乳腺癌临床意义的研究。所采用的组织芯片分别包括159例乳腺癌组织、32例癌旁组织和50对配对的乳腺导管癌原位组织及相应淋巴结转移组织,来检测HMGA1基因表达情况。结果:1)细胞经体外培养24h、48h后HMGA1高表达组细胞中的HMGA1 mRNA表达量明显高于空质粒转染组;继续培养细胞2天、4天、6天后分别进行细胞计数显示:与对照组(空质粒转染组)相比,HMGA1高表达组的MCF-7细胞数较高,以第6天最为明显(P0.05)。克隆形成实验显示:与对照组(空质粒转染)相比,HMGA1组的细胞克隆形成率明显高于对照组(P0.05)。2)HMGA1转染组的迁移及侵袭能力明显高于对照组。3)人表皮生长因子受体2(HER2)表达阳性的乳腺癌组织中HMGA1表达水平较高。乳腺浸润性导管癌的HMGA1表达水平明显高于浸润性小叶癌。而在乳腺癌组织中HMGA1表达与肿瘤大小、淋巴结转移情况等之间的关系尚未明确,可能需要扩大临床标本量进行进一步研究。结论:1)HMGA1可促进MCF-7细胞增殖能力,提高MCF-7迁移侵袭能力。2)HER2阳性乳腺癌组织中HMGA1表达水平较高;乳腺浸润性导管癌HMGA1的表达水平高于乳腺浸润性小叶癌,说明HMGA1可能参与到不同类型的乳腺癌的形成及发展过程。
【关键词】：HMGA1 乳腺癌MCF-7细胞 增殖 迁移 侵袭
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R737.9
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 第1章 前言10-12
• 第2章 材料与方法12-20
• 第3章 实验结果20-26
• 第4章 讨论26-30
• 第5章 结论30-31
• 参考文献31-37
• 综述37-47
• 参考文献43-47
• 附录47-49
• 一、攻读硕士学位期间发表论文情况47
• 二、本论文资助项目47-49
• 致谢49

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本文编号：914002