Omega-3脂肪酸和维生素D对乳腺癌细胞胰岛素信号通路的作用

发布时间：2017-10-03 07:15

  本文关键词：Omega-3脂肪酸和维生素D对乳腺癌细胞胰岛素信号通路的作用

  更多相关文章： MCF-7乳腺癌细胞 ω-3多不饱和脂肪酸 胰岛素 维生素D_3

【摘要】：高胰岛素水平是诱发乳腺癌的重要因素之一,胰岛素不仅可以调节机体能量代谢,而且能够促进细胞生长,因此机体胰岛素水平过高会导致细胞过度增殖,机体雌激素过度分泌从而诱发乳腺癌。鱼油中含有丰富的ω-3多不饱和脂肪酸,流行病学调查表明长期摄入鱼油能够降低乳腺癌风险。目前认为这是由于ω-3多不饱和脂肪酸可以抑制炎症因子和表皮生长因子的分泌,从而抑制乳腺癌细胞增殖,诱导细胞凋亡。然而,ω-3脂肪酸能否抑制胰岛素促乳腺癌细胞增殖的作用还不清楚。Q本论文中用胰岛素处理MCF-7人乳腺癌细胞,发现胰岛素能够促进MCF-7细胞的增殖,ω-3脂肪酸能够抑制MCF-7细胞增殖并诱导细胞凋亡。用ω-3脂肪酸联合胰岛素共同处理细胞,发现ω-3脂肪酸可以抑制胰岛素诱导的MCF-7细胞增殖。研究发现胰岛素通过激活Akt和Erk1/2促进细胞增殖的,ω-3脂肪酸能够抑制胰岛素对Akt和Erk1/2的激活。为了进一步探究ω-3脂肪酸干扰MCF-7细胞胰岛素信号通路的作用机制,用siRNA沉默Akt和Erk1/2的共同上游基因shp2,结果表明shp2被沉默后并没有改变ω-3脂肪酸抑制胰岛素促细胞增殖的作用,也没有影响ω-3脂肪酸对Erk1/2活性的调节作用,这表明shp2并未参与ω-3脂肪酸抑制胰岛素促细胞增殖的过程。沉默shp2和加入Erk1/2抑制剂都未能影响脂肪酸对细胞增殖和凋亡的作用,表明ω-3脂肪酸不依赖shp2/Erk1/2通路发挥调控作用,但shp2抑制了ω-3脂肪酸对Akt的激活。维生素D_3是脂溶性维生素D的一种,除了能够调节体内钙和磷的代谢还能够抑制癌细胞进入DNA合成期从而抑制乳腺癌细胞增殖,并且维生素D_3可以抑制胰岛素诱导的乳腺癌细胞增殖。本文发现当用维生素D_3和ω-3脂肪酸联合处理MCF-7细胞,维生素D_3能够加强ω-3脂肪酸抑制乳腺癌细胞生长的作用,并能加强ω-3脂肪酸对胰岛素信号通路的干扰作用。综上,本文证明了ω-3脂肪酸能够抑制胰岛素促乳腺癌细胞增殖的作用,并且能够干扰MCF-7细胞的胰岛素信号;维生素D_3能够加强ω-3脂肪酸抑制乳腺癌细胞生长的作用。
【关键词】：MCF-7乳腺癌细胞 ω-3多不饱和脂肪酸 胰岛素 维生素D_3
【学位授予单位】：江南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.9
【目录】：

• 摘要3-4
• Abstract4-8
• 1. 绪论8-17
• 1.1 乳腺癌8-9
• 1.1.1 乳腺癌的流行病学特征8
• 1.1.2 影响乳腺癌的因素8
• 1.1.3 乳腺癌病理分型和治疗8-9
• 1.2 胰岛素与乳腺癌的关系9-10
• 1.2.1 胰岛素的生理功能9
• 1.2.2 胰岛素与乳腺癌的关系9-10
• 1.3 ω-3 多不饱和脂肪酸与乳腺癌的关系10-12
• 1.3.1 ω-3 多不饱和脂肪酸的结构与功能10-11
• 1.3.2 ω-3 多不饱和脂肪酸对乳腺癌的作用11-12
• 1.4 shp2与乳腺癌的关系12-13
• 1.5 维生素D_3与乳腺癌的关系13-15
• 1.5.1 维生素D_3生理功能13-14
• 1.5.2 维生素D_3与乳腺癌的关系14-15
• 1.6 立题依据与主要研究内容15-17
• 1.6.1 立题依据15-16
• 1.6.2 主要研究内容16-17
• 2. 材料与方法17-22
• 2.1 实验材料17-18
• 2.1.1 细胞株17
• 2.1.2 主要仪器17
• 2.1.3 主要试剂与耗材17
• 2.1.4 主要试剂配制17-18
• 2.1.4.1 细胞样品制备相关试剂17-18
• 2.1.4.2 蛋白免疫印迹法相关试剂18
• 2.2 实验方法18-22
• 2.2.1 细胞培养18-19
• 2.2.2 实验组别设置19
• 2.2.3 细胞蛋白样品制备19-20
• 2.2.4 蛋白免疫印迹实验20
• 2.2.5 MTT细胞增殖实验20
• 2.2.6 细胞计数实验20
• 2.2.7 DAPI染色实验20
• 2.2.8 siRNA细胞转染实验20-22
• 3. 结果与讨论22-40
• 3.1 ω-3 多不饱和脂肪酸和胰岛素对MCF-7 细胞的作用22-26
• 3.1.1 ω-3 多不饱和脂肪酸对MCF-7 细胞的作用22-24
• 3.1.1.1 ω-3 脂肪酸对MCF-7 细胞增殖的影响22-24
• 3.1.1.2 ω-3 脂肪酸对MCF-7 细胞凋亡的影响24
• 3.1.2 胰岛素对MCF-7 细胞增殖的作用24-26
• 3.2 ω-3 多不饱和脂肪酸联合胰岛素对MCF-7 细胞的作用26-28
• 3.2.1 ω-3 多不饱和脂肪酸联合胰岛素对MCF-7 细胞增殖的影响26-28
• 3.2.2 ω-3 多不饱和脂肪酸联合胰岛素对MCF-7 细胞凋亡的影响28
• 3.3 ω-3 多不饱和脂肪酸对MCF-7 细胞胰岛素信号通路的作用28-31
• 3.3.1 胰岛素对MCF-7 细胞MAPK和Akt信号通路的作用28-29
• 3.3.2 ω-3 多不饱和脂肪酸对MCF-7 细胞胰岛素信号通路的作用29-31
• 3.4 ω-3 多不饱和脂肪酸干扰MCF-7 细胞胰岛素信号的作用机制31-32
• 3.5 维生素D_3联合 ω-3 多不饱和脂肪酸对MCF-7 细胞生长的影响32-40
• 3.5.1 维生素D_3联合 ω-3 脂肪酸对MCF-7 细胞增殖和凋亡的作用32-35
• 3.5.2 维生素D_3联合 ω-3 脂肪酸对MCF-7 细胞胰岛素信号的作用35-36
• 3.5.3 高胰岛素条件下维生素D_3联合 ω-3 多不饱和脂肪酸对MCF-7 细胞增殖的作用36-40
• 主要结论与展望40-42
• 致谢42-43
• 参考文献43-49
• 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文49

，

本文编号：963853