Pygopus2与胃癌耐药的相关性研究

发布时间：2017-10-06 15:18

  本文关键词：Pygopus2与胃癌耐药的相关性研究

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【摘要】：【背景与目的】胃癌是中国常见的恶性肿瘤之一,在消化道肿瘤之中,其发病率和死亡率一直居高不下。化疗作为恶性肿瘤的重要治疗方法,其失败的重要原因大多是人体多药耐药的产生,而大量研究表明,多药耐药机制的产生与多药耐药基因(multidrug resistance MDR)的过表达有关,特别是MDR1。Pygopus2蛋白(pygo2)是Wnt信号通路中新发现的成员,自发现后,对它的研究主要集中在其作为Wnt信号通路的效应蛋白具有调控组织发育、转录共激活及染色质重塑等功能上。近几年研究发现,其对肿瘤的发生发展密切相关。进一步阐述Pygopus2蛋白在(肿瘤)细胞中的机制,将会加深对与其相关肿瘤的认识,为将来应用于临床诊疗提供理论与科学依据。因此,本课题通过检测SGC7901与SGC17901/DDP细胞和收取的胃癌患者胃癌组织、癌旁组织和正常组织中MDR1和pygo2蛋白、基因的表达情况,验证pygo2与MDR1的关联性。【方法】1.培养SGC7901细胞,加药诱导耐药株SGC7901/DDP细胞。2.收集胃癌患者胃癌组织、癌旁组织、正常组织的标本。3.Realtime-PCR,Western-blotting,检测pygo2和MDR1在细胞和组织中的表达,分析其相关性。【结果】1.通过western-blotting检测SGC7901和耐药株SGC7901/DDP和胃癌标本中pygo2和MDR1蛋白的表达,实验结果表明耐药株和胃癌组织中pygo2和MDR1的表达要高于正常,且MDR1的表达水平与pygo2正相关。2.通过Realtime-PCR法检测SGC7901和耐药株SGC7901/DDP和胃癌标本中pygo2和MDR1基因的表达,实验结果表明耐药株和胃癌组织中pygo2和MDR1的表达要高于正常,且MDR1的表达水平与pygo2正相关,P=0.0010.05,有统计学意义。【结论】1.pygopus2在胃癌中的高表达证明其与胃癌的发病相关。2.MDR1在胃癌组织中的表达远远高于正常组织,特别是在胃癌耐药株细胞SGC7901/DDP中。3.MDR1的表达水平与pyg2正相关,证明了pygo2与胃癌耐药存在一定的相关性。
【关键词】：胃癌 耐药性 MDR1 pygo2
【学位授予单位】：福建医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R735.2
【目录】：

• 缩略语对照表3-4
• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-8
• 引言8-17
• 1.1 胃癌流行病学及多药耐药的研究现状8-10
• 1.1.1 肿瘤多药耐药的具体机制8-10
• 1.2 MDR1研究概述10-12
• 1.2.1 MDR1的基因结构及多态性10-11
• 1.2.2 P gp蛋白的结构和表达11-12
• 1.2.3 MDR1的作用机制12
• 1.3 pygo2的研究概述12-17
• 1.3.1 pygo2的结构和功能12-13
• 1.3.2 pygo2与生长发育的作用13
• 1.3.3 Pygo2与肿瘤13-14
• 1.3.4 pygo2的作用机制14
• 1.3.5 Wnt信号通路概述14-17
• 材料与方法17-26
• 2.1 实验材料17
• 2.2 试验器械17-18
• 2.3 主要试剂的配制18-19
• 2.4 实验方法19-26
• 2.4.1 细胞培养19-20
• 2.4.2 蛋白相关实验20-22
• 2.4.3 Realtime PCR相关实验22-25
• 2.4.4 MTT法检测SGC7901/DDP的药物敏感性25-26
• 实验结果26-34
• 3.1 SGC7901/DDP耐药细胞的培育26-29
• 3.1.0 细胞培养条件26
• 3.1.1 SGC7901耐药细胞体系的建立26
• 3.1.2 耐药细胞和正常细胞株的形态学比较26-28
• 3.1.3 SGC7901/DDP和SGC7901的耐药指数比较28-29
• 3.2 Western blotting免疫印迹检查Pygopus2对MDR1在胃癌中表达的影响29-31
• 3.3 Realtime PCR检测Pygopus2对MDR1在胃癌中表达的影响31-34
• 讨论34-38
• 结论38-39
• 参考文献39-44
• 综述44-50
• 参考文献48-50
• 致谢50

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1 张冬冬;Pygopus2与胃癌耐药的相关性研究[D];福建医科大学;2015年

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本文编号：983482