黑米花青素通过FAK信号通路抗HER-2阳性乳腺癌转移及EMT效应的体外研究

发布时间：2017-10-07 13:52

  本文关键词：黑米花青素通过FAK信号通路抗HER-2阳性乳腺癌转移及EMT效应的体外研究

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【摘要】：研究表明,黑米皮花青素(black rice anthocyanidins,BRACs)能够抗人表皮生长因子受体-2(human epidermalgrowth factor receptor-2,HER-2)阳性乳腺癌转移,但其抗转移效应机制目前尚不明确。上皮细胞-间充质转化(epithelialmesenchymal transition,EMT)是上皮细胞来源的恶性肿瘤细胞获得迁移和侵袭能力的重要生物学过程,而粘着斑激酶(Focal Adhesion Kinase,FAK)在乳腺癌细胞中呈过表达状态参与调节细胞粘附、迁移、侵袭、EMT等过程,FAK信号通路及EMT在肿瘤细胞转移过程中发挥重要作用。目的探讨BRACs抗HER-2阳性乳腺癌MDA-MB-453细胞转移及EMT效应,以及FAK信号通路对其抗癌效应的影响。方法以MDA-MB-453细胞(HER-2+)为研究对象,使用BRACs(200μg/mL)及FAK抑制剂Y15(10μM)处理细胞:(1)CCK8方法检测细胞增殖能力;(2)细胞粘附实验检测细胞粘附能力;(3)细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力变化;(4)相差显微镜观察细胞形态变化;(5)Western Blot检测EMT相关蛋白表达水平;(6)Western Blot检测FAK信号通路蛋白及磷酸化水平;(5)免疫沉淀实验检测HER-2与FAK信号通路蛋白间相互作用。结果(1)BRACs处理后MDA-MB-453细胞增殖能力下降呈剂量依赖效应;(2)BRACs及Y15明显抑制了MDA-MB-453细胞粘附能力且呈剂量依赖效应;(3)BRACs及Y15抑制了MDA-MB-453细胞迁移及侵袭能力;(4)BRACs及Y15干预MDA-MB-453细胞后,细胞形态由成纤维样向鹅卵石样转变;(5)BRACs处理后,MDA-MB-453细胞上皮细胞标志蛋白E-cadherin表达上升,间质细胞标志蛋白fibronectin和vimentin表达下调;(6)BRACs及Y15处理后,MDA-MB-453细胞FAK信号通路FAK、cSrc、p130Cas总蛋白水平表达无明显变化,但磷酸化水平降低;(7)BRACs减弱了HER-2蛋白与FAK蛋白、FAK蛋白与cSrc及p130Cas、cSrc与p130Cas之间的相互联系。结论BRACs能有效抗HER-2阳性乳腺癌MDA-MB-453细胞增殖转移及EMT,BRACs能通过FAK/cSrc/p130Cas信号通路发挥抗MDA-MB-453细胞EMT及转移效应。
【关键词】：黑米花青素 乳腺癌 人表皮生长因子受体2 粘着斑激酶 上皮细胞-间充质转化
【学位授予单位】：成都医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R737.9
【目录】：

• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 前言10-16
• 第一部分 黑米花青素抑制HER-2 阳性乳腺癌细胞转移作用研究16-27
• 1 引言16
• 2 材料与方法16-22
• 2.1 实验试剂及材料16-18
• 2.2 实验方法18-22
• 3 实验结果22-26
• 3.1 BRACs抑制HER-2 阳性乳腺癌细胞增殖能力22-23
• 3.2 BRACs抑制HER-2 阳性乳腺癌细胞迁移能力23-24
• 3.3 BRACs抑制HER-2 阳性乳腺癌细胞侵袭能力24-25
• 3.4 BRACs抑制HER-2 阳性乳腺癌细胞与Fibronectin蛋白的粘附能力25
• 3.5 BRACs抑制HER-2 阳性乳腺癌细胞EMT25-26
• 4 小结26-27
• 第二部分FAK信号通路在黑米花青素抗HER-2 阳性乳腺转移中作用研究27-41
• 1 引言27
• 2 材料与方法27-33
• 2.1 实验试剂及材料27-29
• 2.2 实验方法29-33
• 3 实验结果33-39
• 3.1 Y15对HER-2 阳性乳腺癌细胞转移的影响33-38
• 3.2 BRACs对FAK信号通路的影响38-39
• 4 小结39-41
• 全文讨论41-46
• 全文结论46-47
• 参考文献47-54
• 文献综述 天然植物化合物抗乳腺癌研究进展54-63
• 参考文献59-63
• 附录63-64
• 攻读学位期间研究成果64-65
• 致谢65

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 韩彬;罗丽萍;陈祥燕;陈玮;彭晓莉;余小平;;黑米花青素对y|小鼠HER-2阳性乳腺癌肺转移的影响研究[J];营养学报;2014年03期

2 罗丽萍;余小平;韩彬;陈祥燕;彭晓莉;陈玮;周杰;李遂焰;;花青素主要成分与HER-2激酶区的分子对接[J];生物工程学报;2014年03期

3 黄哲宙;陈万青;吴春晓;郑荣寿;陈建国;杨念念;王宁;张思维;郑莹;;中国女性乳腺癌的发病和死亡现况——全国32个肿瘤登记点2003—2007年资料分析报告[J];肿瘤;2012年06期

4 罗廷顺;李洪文;刘正文;刘光明;;姜黄素的提取分离与药理作用研究进展[J];现代药物与临床;2011年02期

5 赵秀峰;常超;信栓力;田莉;朱元州;;姜黄素在大鼠心肌缺血再灌注中的作用研究[J];中西医结合心脑血管病杂志;2010年08期

6 于斌;余小平;易龙;常徽;陈春烨;金鑫;糜漫天;;黑米花青素对HER-2/neu高表达人乳腺癌细胞株MDA-MB-453移植瘤血管生成的影响[J];第三军医大学学报;2009年22期

7 刘妮;孟以蓉;张俊丽;朱宇同;黄正昌;;姜黄素体外抗流感病毒H1N1、H3N2实验研究[J];浙江中西医结合杂志;2008年09期

8 杨艳晖;宋柏捷;朱孝娟;潘洪志;;番茄红素对高脂血症患者血脂的影响[J];中国临床营养杂志;2007年01期

9 傅春升;娄红祥;张学顺;;栀子的化学成分与药理作用[J];国外医药(植物药分册);2004年04期

10 祝曙华,胡晓静,李远志,段翰英,黄苇;番茄红素的性质及提取方法[J];农牧产品开发;2001年05期

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本文编号：988222