粉防己碱对肺癌细胞株A549的放射敏感性影响及相关机制探讨
发布时间:2017-10-08 07:22
本文关键词:粉防己碱对肺癌细胞株A549的放射敏感性影响及相关机制探讨
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【摘要】:目的:探讨粉防己碱配合X线在体外环境中对肺癌细胞株A549生长、集落形成、细胞周期及相关蛋白表达的影响。方法:本实验以人肺癌细胞株A549为研究对象,以粉防己碱和X射线为处理因素,采用MTT比色实验观察Tet对A549细胞的增殖抑制效应;利用克隆形成实验观察Tet对A549细胞的放射敏感性的影响;细胞流式术检测A549细胞在各种因素处理后细胞周期的分布情况;蛋白印迹试验分析处理因素对细胞周期相关蛋白表达的影响。结果:MTT比色法显示高剂量的Tet对肺癌A549细胞的有明显的抑制作用,低剂量(0.5~3.4μg/ml)的Tet对A549细胞抑制率10%,可以作为放射增敏的剂量参考;克隆形成实验显示,1μg/ml的Tet配合X射线可以明显降低A549细胞的克隆形成率,放射增敏比(SER)为1.46;细胞流式术发现,X射线可以引起A549细胞G2期阻滞,而低剂量(1μg/ml)的Tet可以减少G2期阻滞,高剂量(10μg/ml)则增加这种阻滞;Western blotting实验显示,在接受4Gy的X射线照射后,A549细胞Cyclin B1蛋白表达水平降低,磷酸化的Cdc2、Cdc25C蛋白表达增高,在加用小剂量Tet后Cyclin B1蛋白表达水平增高,磷酸化的Cdc2、Cdc25C蛋白表达降低,大剂量(10μg/ml)则相反。结论:1.粉防已碱可抑制人肺癌细胞株A549的生长,其抑制效应具有剂量依赖性和时间依赖性。2.小剂量的粉防己碱可增加X射线对人肺癌细胞株A549的杀伤作用,即有放射增敏作用,小剂量的Tet可减少射线诱导的细胞G2期阻滞。3.Tet的对A549细胞的放射增敏作用机制可能与其减少射线诱导的细胞G2期阻滞,减少磷酸化Cdc2和Cdc25C蛋白及增加Cyclin B1蛋白表达有关。
【关键词】:粉防己碱 肺癌细胞株A549 放射敏感性 机制探讨
【学位授予单位】:河南中医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R734.2
【目录】:
- 主要英文缩略词5-6
- 摘要6-7
- Abstract7-8
- 前言8-10
- 材料和方法10-20
- 1 实验材料10-12
- 1.110
- 1.2 主要器材10-11
- 1.3 主要试剂11-12
- 2.实验方法12-19
- 2.1 细胞的复苏、培养、冻存、计数及活力测定12-13
- 2.2 MTT法测Tet对A549细胞增殖的影响13-14
- 2.3克隆形成实验14-15
- 2.4 流式细胞术15-16
- 2.5 Westren blotting实验16-19
- 3.统计学处理19-20
- 结果20-27
- 讨论27-31
- 结论31-32
- 致谢32-33
- 参考文献33-37
- 附录 文献综述37-45
- 参考文献43-45
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前2条
1 惠周光,李晔雄,杨伟志,余子豪;UCN-01去除放射后肿瘤细胞G_2期阻滞及其相关机制[J];癌症;2005年01期
2 孙新臣;邓文英;李苏宜;邓雨霞;喻伟;高恒东;;粉防己碱对人肝癌细胞株7402的放射增敏作用[J];临床肿瘤学杂志;2007年12期
,本文编号:992711
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