microRNA-183下调EGR1对人滑膜肉瘤细胞株SW982耐药、侵袭、迁移能力的影响

发布时间：2017-10-08 15:04

  本文关键词：microRNA-183下调EGR1对人滑膜肉瘤细胞株SW982耐药、侵袭、迁移能力的影响

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【摘要】：目的：探讨微小RNA-183 (miR-183)对人滑膜肉瘤细胞株SW982耐药、侵袭、侵袭能力的影响,并分析早期生长反应因子1(EGR1)作为其潜在靶点的可能。方法：采用脂质体转染技术转染]miR-183 mimics/inhibitors/N.C,上调／下调SW982细胞中miR-183的表达；流式细胞术及Real-time PCR检测转染效率；噻唑蓝(MTT)法检测转染后SW982细胞增值率； MTT法测定转染24h、48h、72h后10μmmol/I多柔比星对SW982滑膜肉瘤细胞抑制情况；流式细胞术检测转染效率及转染前后细胞周期的改变,Annexin V-FITC/PI双染法检测转染前后细胞凋亡的影响；Transwell实验比较转染前后SW982细胞迁移、侵袭能力的变化。Western blot检测转染前后各组中EGR1含量的变化；双荧光素酶报告基因实验验证EGR1是否为miR-183靶基因。结果：转染miR-183 mimics/inhibitors/N.C后,SW982细胞中miR-183的含量明显发生改变；与正常组相比mimics组miR一183含量明显增加(P0.001),inhibitors组miR-183含量明显降低(P0.001),N.C组miR-183含量明显无明显变化(P=0.637)。在细胞增殖、周期、凋亡实验中,结果显示转染前后SW982细胞株中的细胞增殖、周期、凋亡无明显变化。在耐药实验中,转染后,多柔比星作用24h后mimics组(0.0051±0.022)抑制率较正常组(0.0903±0.039)明显减低(P=0.003)；inhibitors组(0.1351±0.062)抑制率较正常组(0.0281±0.033)明显增高(P=0.009)。Transwell实验结果显示,在迁移实验中,]mimics组和inhibitor组穿膜细胞数分别为108.61±4.94个、54.36±4.03个(P0.001)；在侵袭实验中,mimics组和inhibitor组穿膜细胞数分别为79.13±5.77个,20.87±3.17个(P=0.036)。EGR1表达分析中,转染48h后mimics组中EGR1表达较正常组明显减低(P0.001)；inhibitors组中EGR1表达较正常组明显增高(P=0.012)；双荧光素酶报告基因实验表明,miR-183可特异性靶向EGR1基因。结论：miR-183参与调控SW982细胞耐药、侵袭及迁移；EGR1可能是其潜在靶点。miR-183对SW982细胞的增值、周期、凋亡无明显影响。
【关键词】：microRNA-183 EGR1 滑膜肉瘤 耐药 侵袭
【学位授予单位】：新疆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R738.5
【目录】：

• 中英文缩咯词对照表5-7
• 摘要7-8
• ABSTRACT8-10
• 前言10-11
• 内容与方法11-19
• 1 研究对象11-12
• 2. 内容与方法12-18
• 3. 统计学分析18-19
• 结果19-28
• 讨论28-33
• 小结33-34
• 致谢34-35
• 参考文献35-39
• 综述39-46
• 参考文献43-46
• 攻读硕士学位期间发表的学位论文46-47
• 导师评阅表47

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本文编号：994688