抑癌基因TCF21对肺癌细胞A549增殖和迁移的影响

发布时间：2017-10-09 08:21

  本文关键词：抑癌基因TCF21对肺癌细胞A549增殖和迁移的影响

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【摘要】：目的:通过检测非小细胞肺癌组织中(Non-Small Cell Lung Cancer,NSCLC)抑癌基因TCF21的表达情况,探讨其与NSCLC发生、发展及临床特征间的相互关系。进而运用基因重组等分子生物学手段,探讨抑癌基因TCF21治疗肺癌的可行性、有效性。方法:非选择性入组肺癌患者206例作为实验组,正常肺组织60例作为对照组;通过免疫组化(SP法)检测各组织TCF21表达情况,分析其与NSCLC患者临床特征间的相互关系;采用细菌内同源重组法构建重组TCF21腺病毒载体,并通过腺病毒包装实验制备出重组TCF21腺病毒;将重组TCF21腺病毒转染A549细胞,采用荧光倒置显微镜及Real-Time PCR检测重组腺病毒TCF21基因在A549细胞中的表达情况;通过MTT及细胞迁移实验分别检测细胞增殖及细胞迁移能力。结果:1)NSCLC组织中TCF21表达明显低于正常肺组织(P0.05)。TCF21的低表达、与肿瘤的临床分期、分化程度、淋巴结转移密切相关(P0.05);2)经基因测序鉴定证实重组TCF21腺病毒载体(p Ad-TCF21)构建成功。并成功制备出重组TCF21腺病毒,病毒滴度为5.6×1010pfu/ml,符合实验的要求;3)重组TCF21腺病毒(Ad-TCF21)感染A549细胞后通过Real-Time PCR检测表明目的基因蛋白在A549细胞中成功表达,且表达TCF21基因后A549细胞的增殖及侵袭能力受到抑制。结论:TCF21基因在NSCLC的发生、发展中起到重要作用,它的功能缺失可能是肺癌发生发展的重要机制之一;本实验成功制备了重组TCF21腺病毒,并证明其对肺癌细胞的增殖及迁移能力有明显抑制作用,为进一步探索肺癌的基因治疗方法奠定一定的基础。
【关键词】：TCF21 非小细胞肺癌 抑癌基因 腺病毒载体
【学位授予单位】：贵阳医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R734.2
【目录】：

• 中文摘要4-5
• 英文摘要5-8
• 略缩词表8-9
• 引言9-10
• 材料与方法10-28
• 结果28-38
• 讨论38-42
• 结论42-43
• 参考文献43-47
• 综述47-57
• 参考文献54-57
• 作者简历57-58
• 致谢58-59
• 学位论文数据集59

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

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本文编号：999130