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赤芍和白芍抗炎作用的UPLC

发布时间：2016-09-13 15:49

本文关键词：赤芍和白芍品种、功效及临床应用述评，由笔耕文化传播整理发布。

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赤芍和白芍抗炎作用的UPLC_MS代谢组学初步研究

第36卷第6期2011年3月

Vol.36，Issue6March，2011

体重随机分为4组，即模型组、阳性对照组、赤芍和

白芍给药组。各给药组大鼠适应性饲养3d后灌胃给予实验供试液，给药剂量折合成生药量为15g·kg－1;阳性对照组灌胃给予阿司匹林50mg·kg－1，

－1

给药容积0.01mL·g，供试液均用双蒸水配制，模型组灌服同容积生理盐水，连续给药6d。第6d

给药1h后，分别在每鼠右后足趾皮下注射1%角叉菜胶混悬液0.1mL，分别于致炎前及致炎后30min，1，2，3h分别测定足趾体积并计算肿胀度［6］。各组大鼠致炎3h后分别于腹主动脉收集血液，至4000r·min－1离心10室温下静置2h析出血清，min，取上层淡黄色透明血清－80℃保存。取100μL解冻后血清加入400μL乙腈-甲醇(3∶1)混合溶液沉淀蛋白，4℃下12000r·min－1离MS分析。心15min，移取上清液供UPLC-2.2色谱条件与质谱条件色谱条件:WatersHSST3色谱柱(2.1mm×100mm，1.7μm);流动相5mmol·L－1乙酸铵水溶液(含0.1%甲酸，A)-乙腈(B)，0～1min，98%A;1～3min，98%～梯度洗脱，50%A;3～12min，50%～40%A;12～16min，40%～10%A;16～20min，10%～98%A。流速0.3mL·min

;柱温45℃;进样量5μL。

质谱条件:电喷雾离子源(ESI)，正离子模式;

－1

图1MS代谢指纹总离子流图大鼠血清样品的UPLC-

2.3

±s表示，数据处理药理实验数据以x珋采用

统计学软件SPSS12.0的独立样本t检验进行组间MS数据通过m/z识别、MassLynx软差异比较。LC-件匹配、归一化等计算过程得到矩阵，导入SMCA-P12.0(Umetrics，Umea，瑞典)软件中进行主成分分

DA)。析(PCA)与偏最小二乘判别分析(PLS-

33.1响

结果

赤芍和白芍对大鼠角叉菜胶致足趾肿胀的影

实验结果表明大鼠连续给药6d后，赤芍和白

鞘气(N2)流速30L·min;辅助气(N2)流速10L

·min－1;毛细管电压38.00V，毛细管温度300℃，毛细管源内电压5.00kV，扫描范围m/z100～

1000.00。总离子流图见图1

赤芍和白芍抗炎作用的UPLC_MS代谢组学初步研究

。

表1

组别模型赤芍给药白芍给药阿司匹林

剂量/g·kg－1

－15150．2

0.5h23．84±10．3911．70±5．952)

12．71±4．832)11．24±6．242)

芍提取物在0.5～1h对大鼠角叉菜胶致足趾肿胀均有较好的抑制作用，与模型组相比有显著性差异，但组间无明显差别;在2～3h仅赤芍提取物对大鼠角叉菜胶致足趾肿胀有较好的抑制作用，与对照组相比有显著性差异，见表1。

肿胀率/%

1h28．26±10．1416．91±7．341)19．32±9．631)13．72±6．612)

2h25．33±13．598．13±8．272)21．51±17．169．05±6．542)

3h17．53±11．006．51±8．031)17．85±15．526．96±5．832)

±s，n=10)赤芍和白芍对大鼠足趾肿胀的影响(x珋

P＜0.01。注:与模型组相比1)P＜0.05，

3.2

赤芍和白芍对角叉菜胶致足趾肿胀大鼠血清MS结果进行PCA和PLS-DA代谢物的影响将LC-分析。模型组与赤芍和白芍给药组样本点完全分

离，且各组内样本点聚集较好，说明大鼠口服给予赤芍和白芍提取物后机体生理及物质代谢状况已经发生明显改变，并根据其变化可以将各组样品进行区

分，结果见图2。给予白芍提取物3h后代谢物组轮

廓更趋近模型组成分区间，与药理实验结果一致。使用变量重要性投影(VIP)评价潜在的生物标

DA计算VIP值，识物，利用PLS-取大鼠血清代谢物谱中VIP值大于1的变量为生物标示物，共发现

691个。通过HMDB［7］网站检索，初步鉴定部分可

赤芍和白芍抗炎作用的UPLC_MS代谢组学初步研究

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