柑橘黄酮抗氧化及协同作用研究

发布时间：2016-09-16 08:34

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浙江大学硕士学位论文

同效应

图４．１３第四章黄酮提取物及黄酮单体与茶多酚，抗坏血酸之间的抗氧化协ＦＲＡＰ体系中柑橘黄酮单体与不同浓度茶多酚抗氧化协同作用比较图

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ＦＲＡＰ体系中，七种柑橘黄酮单体与不同浓度的茶多酚组合，本身抗氧化活性很强的槲皮素和芦丁与不同浓度的茶多酚之间表现出显著的的协同增效作用（Ｐ＜Ｏ．０５），槲皮素与茶多酚组合，抗氧化活性比各组合活性之和增强８－９（１０。３Ｉ－ｔｍｏｌＴＥ），，芦丁与茶多酚组合，抗氧化活性增强４－６（１０。３Ｉ－ｔｍｏｌＴＥ）。其余五种黄酮单体与茶多酚的抗氧化协同增效作用不明显，复合物抗氧化剂的抗氧化活性与各组分活性之和无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。

ＦＲＡＰ体系中，柑橘黄酮单体与不同浓度的抗坏血酸之间均表现出一定的抗氧化协同作用，槲皮素和芦丁与不同浓度的抗坏血酸组合时表现出显著抗氧化协同增效作用。增效作用在２．５．５．５（１００ｐ，ｍｏｌＴＥ）之间，前后差异显著（Ｐ＜０．０５）。新橙皮苷与不同浓度的抗坏血酸之间抗氧化协同增效作用不明显（Ｐ＞Ｏ．０５），橙皮苷、橙皮素、柚皮素和柚皮苷，与不同浓度的抗坏血酸组合均表现出抗氧化协同增效作用。且随着抗坏血酸浓度的增加，协同增效作用明显。复合抗氧化剂的抗氧化活性与各组分活性之和差异性显著（Ｐ＜０．０５）。

４．３小结与讨论

本章在ＤＰＰＨ，ＦＲＡＰ两个抗氧化体系中研究抗氧化协同增效作用，先测定不同的茶多酚、抗坏血酸的抗氧化活性，根据制备柑橘幼果黄酮提取物的抗氧化

活性，选用活性较高的胡柚、瓯柑两种柑橘黄酮提取物，测定不同浓度的黄酮提取物与茶多酚、抗坏血酸之间抗氧化协同效应。并分析七种柑橘黄酮单体与茶多酚、抗坏血酸之间的抗氧化协同效应。主要得出以下结论：

（１）在两种体系中，茶多酚和抗坏血酸是两种高效的天然抗氧化剂。同等浓度下，茶多酚抗氧化活性高于抗坏血酸。

（２）柑橘黄酮提取物与茶多酚、抗坏血酸之间的抗氧化协同增效作用与抗氧化体系，抗氧化物质本身的抗氧化能力，以及抗氧化物质的有效浓度有关。

两种柑橘黄酮提取物与茶多酚组合，在ＤＰＰＨ体系中，胡柚黄酮提取物在低浓度（４００Ｉ．ｔｇ／ｍ１）时与茶多酚表现抗氧化协同增效作用，高浓度（２０００Ｉｘｇ／ｍ１）时未表现协同增效性，瓯柑黄酮提取物在任何浓度下都未表现协同增效性。ＣｈａｎｇＷＣｈｏｉ等研究草药抗氧化活性时也发现在ＤＰＰＨ抗氧化体系中，草药提取物清除自由基的半剂量浓度大于黄酮单体，即复合物的抗氧化协同作用不明显

【２６】。在ＦＲＡＰ体系中，两种柑橘黄酮提取物－９茶多酚之间在各个浓度下均表现抗氧化协同增效性。且提取物在高浓度（１６００Ｉ，ｔｇ／ｍ１）下，增效性更明显抗氧化活性增强显著（Ｐ＜０．０５）。

两种柑橘黄酮提取物与抗坏血酸组合，在ＤＰＰＨ体系中，胡柚黄酮提取物在低浓度（４００ｌｘｇ／ｍ１）时与抗坏血酸表现抗氧化协同增效作用，高浓度（２０００ｌｘｇ／ｍ１）时未表现协同增效性，瓯柑黄酮提取物与抗坏血酸之间在各个浓度下均表现抗氧化协同增效性，随着抗氧化物物质的有效浓度增加，协同效应明显，高浓度（２０００ｌ＿ｔｇ／ｍ１）时协同效应更明显（Ｐ＜０．０５）。在ＦＲＡＰ体系中，高浓度（１６００ｇｇ／ｍ１）的两种柑橘幼果黄酮提取物与抗坏血酸组合均表现显著的抗氧化协同作用（Ｐ＜０．０５）。抗氧化物质的有效浓度越高，抗氧化协同效应越明显。两种柑橘黄酮提取物在高浓度下有较强的抗氧化能力，在此浓度下与其他抗氧化剂的组合，协同增效作用更明显。

（３）柑橘黄酮单体与茶多酚、抗坏血酸抗氧化物质之间的协同增效作用与抗氧化体系，抗氧化物质本身的抗氧化能力，以及抗氧化物质有效浓度有关。

不同体系下，天然抗氧化物质之间的抗氧化协同效应不同，黄酮单体与茶多酚组合，在ＤＰＰＨ体系中，槲皮素和芦丁这两种高效抗氧化剂－９茶多酚之间未表现出协同增效作用，另外五种黄酮单体与茶多酚组合均表现出一定抗氧化协同效

应。在ＦＲＡＰ体系中，槲皮素和芦丁与茶多酚表现出显著的协同增效作用。槲皮素与茶多酚复合，抗氧化活性增强了８－９（１０。３１．ｔｍｏｌＴＥ）。其他几种单体与茶多酚之间的协同作用则表现的不明显。黄酮单体与抗坏血酸组合，在两种体系中总体趋势一致，都表现出良好的协同增效作用，且抗氧化剂的有效浓度越高，增效作用越明显。

浙江大学硕士学位论文结论与展望

结论与展望

柑橘幼果中富含功能性成分黄酮类化合物，为了综合利用柑橘幼果落果资源，从中开发具有高效抗氧化性和其他多种功能性的天然抗氧化剂。本文用乙醇溶液提取四种柑橘幼果中的黄酮，制备干燥粉状黄酮提取物，分析提取物中黄酮类化合物的种类和含量，并用四种抗氧化体系分析其抗氧化活性，研究不同浓度七种柑橘黄酮单体的抗氧化活性以及不同浓度单体间两两组合的协同抗氧化效应，最后对柑橘黄酮提取物、黄酮单体与茶多酚、抗坏血酸之间的抗氧化协同增效作用进行研究。

（１）研究了四种柑橘幼果黄酮提取物制备分析及其抗氧化特性：

选用胡柚，瓯柑，桠柑，温州蜜橘四种柑橘幼果落果作为实验原料，制备柑橘黄酮提取物，研究了其中黄酮类化合物的种类和含量。结果显示，不同品种柑橘黄酮提取物中含有黄酮类化合物的种类和含量各不相同。总黄酮含量大小顺序为：胡柚（３８５．６１ｍｇ／ｇＤＷ）＞瓯柑（２２８．５７

ｍｇ／ｇｍｇ／ｇＤＷ）＞桠柑（１６１．０４ｍｇ／ｇＤＷ）ｍｇ／ｇ＞温州蜜橘中（６７．３５ＤＷ），胡柚中含量最高的黄酮为柚皮苷（２２０．８７

ＤＷ），瓯柑中为新橙皮苷（１２１．３ｍｇ／ｇＤＷ），桠柑中为橙皮苷（５９．３ｍｇ／ｇＤＷ），温州蜜橘中为橙皮苷（４９．７４ｍｇ／ｇＤＷ），温州蜜橘黄酮提取物得率最高。

用ＤＰＰＨ，ＦＲＡＰ，ＡＢＴＳ，ＴＢＡＲＳ四种抗氧化体系对四种柑橘幼果黄酮提取物的抗氧化活性进行评价，四种体系中，１００．２０００ｇｇ／ｍｌ浓度下，柑橘幼果黄酮提取物抗氧化活性随着浓度增加而增强。当提取物浓度达到２０００ｒｔｇ／ｍｌ时，抗氧化活性达到较高水平。ＦＲＡＰ，ＡＢＴＳ，ＴＢＡＲＳ三种抗氧化体系中，四种柑橘黄酮提取物的抗氧化活性顺序为：胡柚＞瓯柑＞槛柑＞温州蜜橘。与提取物中总黄酮的含量顺序一致。ＤＰＰＨ体系中，四种柑橘黄酮提取物的抗氧化活性顺序为：胡柚＞槛柑＞瓯柑＞温州蜜橘。可见不同体系抗氧化活性有差别。

（２）研究了黄酮单体抗氧化特性及单体间协同效应：

用ＤＰＰＨ，ＦＲＡＰ两种抗氧化体系评价不同浓度七种柑橘黄酮单体【槲皮素，芦丁，橙皮素，橙皮苷，新橙皮苷，柚皮素，柚皮苷）的抗氧化能力，并选用其中六种黄酮单体（槲皮素，芦丁，橙皮素，橙皮苷，柚皮素，柚皮苷）不同浓度组合分析抗氧化协同增效作用。结果显示，ＤＰＰＨ，ＦＲＡＰ两体系中，在Ｏ．１．０ｒｅｔｏｏｌ／１

浙江大学硕士学位论文结论与展望浓度范围内，七种柑橘黄酮单体的抗氧化活性随着浓度的增加而增强。七种黄酮单体的抗氧化活性顺序都为：槲皮素＞芦丁＞新橙皮苷＞橙皮素＞橙皮苷＞柚皮素＞柚皮苷。黄酮糖苷与对应的苷元的抗氧化活性相近，且苷元的抗氧化活性大于糖苷。ＤＰＰＨ体系中，分析不同浓度六种黄酮单体抗氧化协同效应，发现槲皮素和芦丁不仅本身具有很好的抗氧化活性，与其他黄酮单体组合时，具有一定的协同增效作用。

（３）研究了黄酮提取物及黄酮单体与茶多酚，抗坏血酸之间的抗氧化协同效应：

用ＤＰＰＨ，ＦＲＡＰ两种抗氧化体系评价不同浓度胡柚和瓯柑两种柑橘黄酮提取物与不同浓度的茶多酚、抗坏血酸之间的抗氧化协同作用，以及七种柑橘黄酮单体与不同浓度的茶多酚、抗坏血酸之间的抗氧化协同作用。结果显示，两体系中，天然抗氧化剂之间存在一定抗氧化协同增效作用。抗氧化协同增效作用与抗氧化体系，抗氧化物质本身的抗氧化能力，以及抗氧化物质的有效浓度有关。

在ＤＰＰＨ体系中，胡柚黄酮提取物在低浓度（４００１．ｔｇ／ｍ１）时与茶多酚表现抗氧化协同增效作用，瓯柑黄酮提取物与茶多酚之间在各个浓度下无协同增效性。在ＦＲＡＰ体系中，两种柑橘黄酮提取物与茶多酚之间在各个浓度下均表现抗氧化协同增效性。提取物在高浓度（１６００ｒｔｇ／ｍ１）下增效性更明显（Ｐ＜０．０５）。在ＤＰＰＨ体系中，胡柚黄酮提取物在低浓度（４００ｌ，ｔｇ／ｍ１）时与抗坏血酸表现抗氧化协同增效作用，瓯柑黄酮提取物与抗坏血酸之间在各个浓度下均表现抗氧化协同增效性。在ＦＲＡＰ体系中，两种柑橘幼果黄酮提取物在高浓度（１６００ｐ，ｇ／ｍ１）时与抗坏血酸组合均表现良好的抗氧化协同作用（Ｐ＜０．０５）。

研究黄酮单体与茶多酚，抗坏血酸之间的抗氧化协同作用时发现，在ＤＰＰＨ体系中，槲皮素和芦丁这两种高效抗氧化剂与茶多酚之间未表现出协同增效作用，另外五种黄酮单体与茶多酚组合均表现出一定抗氧化协同效应。在ＦＲＡＰ体系中，槲皮素和芦丁与茶多酚表现出显著的协同增效作用（Ｐ＜０．０５）。其他几种单体与茶多酚之间的协同作用则表现的不明显。黄酮单体与抗坏血酸组合，在两种体系中都表现出良好的协同增效作用（Ｐ＜０．０５），且随着抗氧化剂的有效浓度增高，协同增效作用越明显。本实验主要征对柑橘黄酮提取物的抗氧化活性方面的一些研究，为了开发出

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