姜黄素对大鼠局灶性脑缺血再灌注apoE及RXR、LXR表达的影响

发布时间：2018-01-02 09:28

本文关键词：姜黄素对大鼠局灶性脑缺血再灌注apoE及RXR、LXR表达的影响　出处：《重庆医科大学》2016年硕士论文　论文类型：学位论文

【摘要】：目的:本研究旨在从在体实验和离体实验两部分,分别观察中药姜黄素(Curcumin,Cur)对在体实验中大鼠局灶性脑缺血再灌注(ischemia/reperfusion,IR)模型,以及对离体实验中原代星形胶质细胞(astrocyte,ast)的“糖氧剥夺/再灌注”(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/Reoxygenation)模型,其载脂蛋白E(apolipoprotein E,apoE)、类视黄醇X受体(Retinoic X receptor,RXR)和肝X受体(Liver X receptor,LXR)的影响。方法:在体实验,采用“插线法”使SD大鼠的大脑中动脉闭塞(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)制作局灶性的I/R模型。将60只SD(雄性)大鼠随机地分为五个小组:假手术组(简称SH);模型组(简称IR);姜黄素剂量组(100 mg/kg、300 mg/kg);尼莫地平阳性对照组(10 mg/kg)。再灌注24 h后,采用“盲评的方法”进行神经功能缺损的评分估计;测定其脑含水量;用Western印迹法检测apoE及LXR、RXR的表达;观察各组,其脑组织形态学改变及运用原位细胞凋亡检测法(简称:TUNEL法)来检测每组大鼠海马中的CA1区域神经元发生凋亡的情况。离体实验则选取新出世SD大鼠,将其大脑皮层的星胶细胞进行原代培养,用“糖氧剥夺/再灌注”的方法来构建离体的脑缺血再灌注模型。运用免疫荧光的方法,来观察神经胶质原纤维酸性蛋白(简称:GFAP)的表达,从而鉴定astrocyte。本实验随机地将培养的细胞分成七个小组:正常对照组;模型组;姜黄素剂量组:2.5 umol/L,5 umol/L,10 umol/L,20 umol/L;尼莫地平阳性对照组:0.5 umol/L。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)两个指标分别对细胞的活力以及其毒性进行评定。用蛋白质印迹法(Western Blot)对星胶细胞apoE、RXR、LXR的表达程度进行测定。结果:在体实验中,姜黄素(100 mg/kg、300 mg/kg)组可显著改善MCAO大鼠的行为学体征;降低脑含水量;减轻脑组织形态学变化以及神经元凋亡;上调apoE及LXR、RXR的表达。其中,姜黄素(300mg/kg)组治疗效果最是显著。离体实验中,姜黄素可使细胞活力明显增高,LDH释放量显著降低,并使apoE及LXR、RXR的表达上调。其中20 umol/L效果最为明显,而最低剂量2.5 umol/L几乎为无效剂量。结论:姜黄素对大鼠的I/R损伤和对糖氧剥夺/再灌注条件下离体星形胶质细胞具有保护作用,此保护作用可能是通过上调apo E及LXR、RXR的表达所引起的。
[Abstract]:Objective : To investigate the effects of curcumin ( curcumin , Cur ) on focal cerebral ischemia / reperfusion ( IR ) models in vivo and in vitro experiments . Sixty SD rats were randomly divided into five groups : sham operation group ( SH ) , model group ( IR ) , curcumin dose group ( 100 mg / kg , 300 mg / kg ) , nimodipine positive control group ( 10 mg / kg ) . The expression of apoE , RXR and LXR was measured by Western blot . The results showed that curcumin ( 100 mg / kg , 300 mg / kg ) could significantly improve the expression of apoE , RXR and LXR in rats . Conclusion : The protective effect of curcumin on I / R injury in rats and in vitro astrocytes under oxygen deprivation / reperfusion may be caused by up - regulation of the expression of apo E and LXR and RXR .

【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R277.7

【相似文献】