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牡荆素对人肝细胞癌SMMC-7721细胞的增殖抑制作用及其机制的探讨

发布时间:2018-01-02 17:19

  本文关键词:牡荆素对人肝细胞癌SMMC-7721细胞的增殖抑制作用及其机制的探讨 出处:《桂林医学院》2016年硕士论文 论文类型:学位论文


  更多相关文章: 牡荆素 SMMC-7721细胞 细胞凋亡 抗肿瘤


【摘要】:目的:研究牡荆素(Vitexin)对人肝细胞癌SMMC-7721细胞的增殖抑制作用及其作用机制。方法:实验采用体外培养人肝癌细胞SMMC-7721,用MTT法检测不同浓度牡荆素(Vitexin)作用于人肝癌SMMC-7721细胞48h,72h,96h后的细胞活力,并计算生长抑制率和半数抑制浓度(IC50);选取牡荆素(0,25,50,100μmol·L-1)作用于SMMC-7721细胞72h后,应用Hoechst33258核染色,观察SMMC-7721细胞发生凋亡时形态学变化;FITC-Annexin V-PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率的变化;JC-1染色观察细胞内线粒体膜电位(ΔΨm)变化;qRT-PCR技术检测P53、Bcl-2、Bax等相关凋亡基因的表达情况;蛋白免疫印迹法检测p53、Bcl-2、Bax等相关凋亡蛋白水平的表达情况。结果:终浓度为0,25,50,100,120,150μmol·L-1的牡荆素处理SMMC-7721细胞48h,72h,96h后,细胞生长抑制率分别为150.372μmol·L-1,116.242μmol·L-1,90.192μmol·L-1,呈时间-剂量依赖性(P0.05);牡荆素作用于SMMC-7721细胞72h后,Hoechst33258核染色,细胞核有明显的凋亡形态学变化,与空白对照组相比,凋亡细胞比率随着药物浓度逐渐增加;FITC-Annexin V-PI双染流式细胞仪发现牡荆素能诱导SMMC-7721细胞凋亡,且细胞早凋比例随药物浓度而增加,细胞总凋亡率也逐渐增加;JC-1染色发现线粒体膜电位随着药物浓度增加而下降;qRT-PCR显示,与阴性对照组相比,P53、Bax、Casepase-3、PARP等基因表达上调,而Bcl-2表达下调,且变化趋势呈一定的浓度依赖关系。蛋白免疫印迹法显示,与阴性对照组相比,p53、Bax、casepase-3、PARP等蛋白表达上调,而Bcl-2表达下调,且变化趋势呈一定的浓度依赖关系。结论:牡荆素能抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖诱导凋亡而发挥抗肿瘤作用,呈时间-剂量依赖性,其作用机制可能通过降低线粒体膜电位,依赖p53途径下调Bcl-2,上调Bax、Casepase-3、PARP等基因表达激活caspase通路,进而诱导肿瘤细胞凋亡有关。
[Abstract]:Objective : To study the effect of vitexin on the proliferation and apoptosis of human hepatocellular carcinoma cell line - 7721 cells after 48h , 72h , 96h .

【学位授予单位】:桂林医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2016
【分类号】:R273

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本文编号:1370183

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