针刺调节焦虑模型大鼠下丘脑C型利钠肽受体的机制研究

发布时间：2018-04-02 12:30

  本文选题：针刺　切入点：焦虑模型大鼠　出处：《成都中医药大学》2016年硕士论文

【摘要】：目的：本课题在前期本研究组证实针刺抗焦虑及其对中枢C型利钠肽受体(natriuretic peptide receptor B, NPR-B)表达水平有下调作用的基础上,应用神经化学激动剂激活中枢下丘脑室旁核(paraventricular nucleus of hypothalam us, PVN)的C型利钠肽受体,观察NPR-B激活是否可以阻断针刺对焦虑模型大鼠焦虑行为和HPA轴的调节作用,反证下丘脑NPR-B受体是否参与了针刺抗焦虑作用,拟为临床运用针刺治疗焦虑障碍再提供部分科学实验依据。方法：选用健康清洁级SD (Sprague-Dawley)雄性大鼠,驯化一周后测量体重,剔除体重不合要求的大鼠,运用SPSS 17.0.统计分析软件将经过筛选后的大鼠按照其行为学随机分为6组,将其中三组合并为手术组,即空白(1组)、模型(1组)、针刺(1组)、手术(3组)；随后空白、模型、针刺三组继续驯养一周,同时对手术组进行侧脑室埋管手术,即采用脑立体定位仪,根据PaXinos和Watson大鼠脑定位图谱将注射导管植入大鼠脑部特定位置,后加以固定,术后恢复一周,按其行为学将手术组再次分为3组,即侧脑室注射生理盐水组(假注射组)、侧脑室注射NPR-B激动剂组(模药组)、侧脑室注射NPR-B激动剂针刺组(针药组)。其中模药组、针药组运用神经化学受体激活技术,即于侧脑室微量注射NPR-B激动剂CNP22 (2μg/2μl),假注射组则于侧脑室微量注射0.9%生理盐水2μl。同时参照改良后文献在15天的时间内随机安排7种刺激方法,建立不可预知的慢性情绪应激(CUS)焦虑模型。针刺组选用手针针刺方法,即选取大鼠单侧“内关”、“神门”穴进行针刺治疗,左右交替进行,隔日一次,每穴每次捻转0.5min,每5min捻针1次,行平补平泻手法,治疗30min,针刺治疗从造模开始至造模结束。造模结束后运用高架十字迷宫(elevated plus maze test, EPM)测试各组大鼠行为学,同时运用免疫组化法(immunohistochemistry,IHC)检测大鼠下丘脑室旁核C型利钠肽(C-type natriuretic peptide, CNP)与其受体NPR-B,以及下丘脑室旁核促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin-releasing hormone, CRH)的表达情况,利用酶联免疫吸附测定法(Enzymelin-ked immunosorbent assay, Elisa)来检测血浆皮质酮(corticosterone, CORT)的水平。结果：1、行为学测试结果：(1)OT%值：模型组较空白组显著降低(P0.01),提示造模成功大鼠行为呈焦虑状态。针刺组OT%值明显高于模型组(P0.01),提示针刺能够缓解焦虑症状。假注射组、模药组、针药组OT%值明显低于针刺组(P0.01),针药组OT%值与模药组比较无统计学差异(P0.05)。(2)OE%值：针刺组与模型组相比有明显升高(P0.05),其他组间比较未见统计学差异。2、下丘脑CNP、NPRB指标检测结果：(1)CNP：与空白组相比,模型组、假注射组、模药组、针药组下丘脑CNP平均光密度明显升高(均P0.01)；与模型组比较,针刺组下丘脑CNP平均光密度值明显降低(均P0.01)；模药组与针药组下丘脑CNP平均光密度较假注射组均呈明显增高趋势,但不具统计学差异(P0.05)；针药组与模药组比较无统计学意义(P0.05)。(2) NPR-B:与空白组相比,除针刺组外其余各组下丘脑NPR-B表达均明显升高(P0.01)；针刺组较模型组则显著降低(P0.01)；与假注射组比,模药组、针药组下丘脑NPR-B表达呈显著升高趋势,但不具统计学差异(P0.05),针药组低于模药组,但差异不具显著性(P0.05)。3、HPA轴相关指标检测结果：(1)下丘脑CRH：模型组、假注射组、模药组、针药组下丘脑CRH水平均较空白组均明显增高(P0.05),针刺组相比模型组降低明显(P0.05)；模药组、针药组较假注射组CRH均有升高,且针药组升高明显(P0.05)。(2)血浆CORT:模型组、模药组较空白组明显升高(P0.01),针刺组与模型组相比明显降低(P0.01)：针药组较模药组有所降低,但未显统计学差异(P0.05)。结论：1、针刺治疗焦虑障碍效应明显,其作用可能与调节下丘脑CNP及其受体,抑制HPA轴的活性有关,CNP-HPA轴可能为针刺治疗焦虑障碍的又一重要作用途径。2、下丘脑室旁核NPR-B受体激动剂能够削弱针刺的抗焦虑效应,同时影响针刺对HPA轴的调节作用,进而证实中枢下丘脑室旁核NPR-B可能是针刺发挥抗焦虑效应的关键环节之一。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：成都中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R245;R-332

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本文编号：1700430