电针耳穴对硫酸卡那霉素慢性致聋豚鼠蜗神经背核微小RNA表达影响的初步研究

发布时间：2018-04-05 00:30

  本文选题：硫酸卡那霉素　切入点：耳聋　出处：《西南医科大学》2017年硕士论文

【摘要】：第一部分电针翳风和听宫穴对硫酸卡那霉素慢性致聋后豚鼠蜗神经背核mi R-188及Nrp-2表达的影响目的:探讨硫酸卡那霉素慢性致聋后豚鼠蜗神经背核mi R-188及靶蛋白Nrp-2表达的变化,以及电针翳风和听宫穴对其表达的影响。方法:1、动物分组:将无耳毒性药物史且耳廓反射正常的65只成年杂色豚鼠随机分为3组:对照组5只,硫酸卡那霉素模型组30只,硫酸卡那霉素+电针组30只。硫酸卡那霉素模型组和硫酸卡那霉素+电针组给予颈背部皮下注射硫酸卡那霉素(500mg/kg·day),每日1次,连续7日;电针组硫酸卡那霉素注射结束30min后予以电针刺激双侧翳风、听宫穴,每次15min,每日1次,连续7日;模型和电针组上述处理结束后常规饲养豚鼠,均分别于第1、7、14、28、56和140天采集蜗神经核标本并相应分为6组。对照组给予颈背部皮下注射相同时间等剂量生理盐水。2、对照组、模型组及电针组豚鼠分别提取蜗神经背核总RNA后,采用实时荧光定量PCR检测各组标本miR-188的相对表达量。3、对照组、模型组及电针组豚鼠分别提取蜗神经背核总蛋白后,用蛋白质印迹法检测各组标本Nrp-2蛋白的表达。4、统计学方法:采用SPSS17.0软件统计分析,数据用平均值±标准差(`x±s)表示;以方差分析比较多样本均数,以t检验比较组间差异,P0.05时认为差异有统计学意义。结果:1、对照组蜗神经背核中miR-188的表达量为1.00±0.00,模型组第1、7、14、28、56和140天mi R-188的相对表达量分别为0.81±0.11、1.14±0.09、0.97±0.16、1.02±0.07、0.73±0.13和0.96±0.10;电针组第1、7、14、28、56和140天miR-188的相对表达量分别为1.17±0.13、1.13±0.07、1.31±0.12、1.06±0.10、0.93±0.15和1.29±0.14。2、硫酸卡那霉素可影响mi R-188的表达(F=85.95,P0.001),与对照组比较,模型组第1和56天miR-188表达减少(P0.05);电针耳穴可影响miR-188的表达(F=212.46,P0.001),与模型组比较,电针组第1、14、56和140天miR-188表达增加(P0.05)。3、对照组蜗神经背核中Nrp-2表达相对灰度值为1.01±0.04,模型组第1、7、14、28、56和140天Nrp-2蛋白的表达相对灰度值分别为1.11±0.11、0.98±0.10、1.02±0.16、0.85±0.07、1.16±0.13和0.79±0.10;电针组第1、7、14、28、56和140天Nrp-2蛋白的表达相对灰度值分别为0.41±0.03、0.33±0.07、0.44±0.11、0.78±0.10、0.53±0.12和0.44±0.12。4、硫酸卡那霉素可影响Nrp-2的表达(F=32.95,P0.001),与对照组比较,模型组第1和56天Nrp-2蛋白表达增加(P0.05);电针耳穴可影响Nrp-2的表达(F=548.11,P0.001),与模型组比较,电针组第1、7、14、56和140天Nrp-2蛋白表达减少(P0.05)。结论:1.硫酸卡那霉素可能作用于miR-188/Nrp-2信号通路,通过下调miR-188的表达,增加Nrp-2的表达,参与硫酸卡那霉素慢性致聋的发生和发展过程。2.电针翳风和听宫穴可能作用于miR-188/Nrp-2信号通路,通过上调mi R-188的表达,减少Nrp-2蛋白的表达,促进硫酸卡那霉素慢性致聋豚鼠DCN神经元和突触的重塑。第二部分电针翳风和听宫穴对硫酸卡那霉素慢性致聋后豚鼠蜗神经背核mi R-132及p250GAP表达的影响目的:探讨硫酸卡那霉素慢性致聋后豚鼠蜗神经背核mi R-1328及靶蛋白p250GAP表达的变化,以及电针翳风和听宫穴对其表达的影响。方法:1、动物分组:将无耳毒性药物史且耳廓反射正常的65只成年杂色豚鼠随机分为3组:对照组5只,硫酸卡那霉素模型组30只。硫酸卡那霉素+电针组30只硫酸卡那霉素模型组和硫酸卡那霉素+电针组给予颈背部皮下注射硫酸卡那霉素(500mg/kg·day),每日1次,连续7日;电针组硫酸卡那霉素注射结束30min后予以电针刺激双侧翳风、听宫穴,每次15min,每日1次,连续7日;模型和电针组上述处理结束后常规饲养豚鼠,均分别于第1、7、14、28、56和140天采集蜗神经核标本并相应分为6组。对照组给予颈背部皮下注射相同时间等剂量生理盐水。2、对照组、模型组及电针组豚鼠分别提取蜗神经背核总RNA后,采用实时荧光定量PCR检测各组标本mi R-132的相对表达量。3、对照组、模型组及电针组豚鼠分别提取蜗神经背核总蛋白后,用蛋白质印迹法检测各组标本p250GAP蛋白的表达。4、统计学方法:采用SPSS17.0软件统计分析,数据用平均值±标准差(`x±s)表示;以方差分析比较多样本均数,以t检验比较组间差异,P0.05时认为差异有统计学意义。结果:1、对照组蜗神经背核中mi R-132的表达量为1.00±0.00,模型组第1、7、14、28、56和140天mi R-132的相对表达量分别为1.04±0.09、0.96±0.14、1.24±0.11、1.21±0.07、1.16±0.11和1.41±0.07;电针组第1、7、14、28、56和140天mi R-132的相对表达量分别为1.02±0.04、0.92±0.11、1.19±0.12、0.80±0.05、0.31±0.08和0.25±0.10。2、硫酸卡那霉素可影响mi R-132的表达(F=640.00,P0.001),与对照组比较,模型组第14、28、56和140天mi R-132表达增加(P0.05);电针耳穴可影响mi R-132的表达(F=275.63,P0.001),与模型组比较,电针组第28、56和140天mi R-132表达减少(P0.05)。3、对照组蜗神经背核中p250GAP蛋白的表达相对灰度值为1.14±0.07,模型组第1、7、14、28、56和140天p250GAP蛋白的表达相对灰度值分别为1.12±0.06、1.01±0.11、0.83±0.15、0.79±0.07、0.77±0.13和0.72±0.10;电针组的第1、7、14、28、56和140天p250GAP蛋白的表达相对灰度值分别为1.01±0.03、1.08±0.07、0.76±0.11、1.13±0.10、1.12±0.12和0.87±0.12。4、硫酸卡那霉素可影响p250GAP的表达(F=510.42,P0.001),与对照组比较,模型组第14、28、56和140天p250GAP蛋白表达减少(P0.05);电针耳穴可影响p250GAP的表达(F=275.63,P0.001),与模型组比较,电针组第28、56和140天p250GAP蛋白表达增加(P0.05)。结论:1.硫酸卡那霉素可能作用于mi R-132/p250GAP信号通路,通过上调mi R-132的表达,减少p250GAP的表达,参与硫酸卡那霉素慢性致聋的发生和发展过程。2.电针翳风和听宫穴可能作用于mi R-132/p250GAP信号通路,通过下调mi R-132的表达,增加p250GAP的表达,影响硫酸卡那霉素慢性致聋后豚鼠蜗神经背核的重塑过程。
[Abstract]:Methods : The expression of miR - 188 and target protein Nrp - 2 in the cochlear nerve of guinea pigs after chronic deafness were analyzed by Western blotting . The results showed that the relative expression of miR - 188 in the rats of control group , model group and EA group were 0.81 卤 0.11 , 1.14 卤 0.09 , 0.97 卤 0.16 , 1.02 卤 0.07 , 0.73 卤 0.13 and 0.96 卤 0.10 , respectively . In the control group , the relative expression of mi R - 132 was 1 . 02 卤 0 . 09 , 0 . 96 卤 0 . 14 , 1 . 19 卤 0 . 12 , 0 . 80 卤 0 . 07 , 0 . 31 卤 0 . 11 and 0 . 25 卤 0 . 10 . 2 .

【学位授予单位】：西南医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R245.97

【参考文献】

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4 王s，

本文编号：1712414