癌痛消方干预移植型肝癌大鼠T淋巴细胞及其亚群的实验研究

发布时间：2018-05-13 05:45

  本文选题：癌痛消方 + 肝癌　； 参考：《广西中医药大学》2016年硕士论文

【摘要】：目的:通过观察大鼠外周血中T淋巴细胞及其亚群的变化,探讨癌痛消方对移植型肝癌大鼠T淋巴细胞及其亚群的影响。方法:本实验采用肝内直视注射walker-256癌细胞株建立30只SD大鼠移植型肝癌模型,正常饲养10只SD大鼠,与模型组进行同期平行对照。造模过程中死亡2只大鼠。造模第7天随机抽取8只大鼠处死取肝脏,通过病理组织学检查证实成模。将模型组大鼠20只,随机分为2组:癌痛消方组、阴性对照组,每组10只。于造模后第8天起癌痛消方组予癌痛消饱和溶液(以人体等效剂量63mg·kg~(-1)·d~(-1)按10ml·kg~(-1)·d~(-1))灌胃给药,阴性对照组予等体积生理盐水灌胃,每日一次,14天后停药。于给药后第15天对癌痛消方组、阴性对照组和正常对照组三组动物均采用无菌腹主动脉采血,在采血后摘除肝脏,完整剥离肿瘤组织,测量瘤体直径、重量并记录。采用ELISE检测AFP的表达,流式细胞术检测外周血中CD3~+CD4~+T细胞、CD3~+CD8~+T细胞、CD3~+CD4~+T/CD3~+CD8~+T细胞比值。结果:1、癌痛消方组大鼠肝内瘤体直径、重量均较阴性对照组减小,差异有统计学意义(P0.05)。阴性对照组与正常对照组比较AFP升高明显;癌痛消方组与阴性对照组比较AFP表达水平明显下降,差异有统计学意义。显示:癌痛消方对大鼠移植型肝癌的生长具有一定的抑制作用。2、正常对照组和阴性对照组之间有明显差异,阴性对照组CD3~+CD4~+T细胞和CD3~+CD4~+/CD3~+CD8~+T比值明显低于正常对照组(P0.05),而CD3~+CD8~+T细胞大于正常对照组(P0.05),差异具有统计学意义。说明移植型肝癌大鼠存在T淋巴细胞免疫功能低下、免疫抑制的情况。与阴性对照组比较癌痛消方组的CD3~+CD4~+T细胞和CD3~+CD4~+/CD3~+CD8~+T比值升高,而CD3~+CD8~+T细胞下降,提示癌痛消方可促进移植性肝癌大鼠中CD3~+CD4~+T的表达同时抑制了CD3~+CD8~+T表达,即说明癌痛消方可通过提高移植型肝癌大鼠的T淋巴细胞免疫作用,改善机体的免疫抑制状态。结论:1、癌痛消方对大鼠移植型肝癌的生长具有一定的抑制作用。2、移植性肝癌大鼠外周血中CD3~+CD4~+T细胞和CD3~+CD4~+/CD3~+CD8~+比值下降、而CD3~+CD8~+T细胞升高,说明移植型肝癌大鼠存在T淋巴细胞免疫功能低下、免疫抑制的情况。3、癌痛消方可通过提高移植型肝癌大鼠的T淋巴细胞免疫功能,改善机体的免疫抑制状态而发挥抗癌作用。
[Abstract]:Aim: to observe the changes of T lymphocytes and their subsets in peripheral blood of rats and to explore the effect of Qiantongxiao recipe on T lymphocytes and their subsets in transplanted liver cancer rats. Methods: 30 SD rats with transplanted liver cancer were established by intrahepatic injection of walker-256 cancer cells, and 10 SD rats were fed with normal control group. Two rats died in the course of modeling. On the 7th day, 8 rats were killed and the liver was confirmed by histopathological examination. Twenty rats in the model group were randomly divided into two groups: group A (n = 10), group B (n = 10), group A (n = 10), negative control group (n = 10). From the 8th day after the model was made, the group of Qitongxiao was given the saturated solution of Qiitongxiao (63mg KGG ~ (-1) DU ~ (-1) as the equivalent dose of human body), and the negative control group was given the same volume of normal saline by stomach, and the drug was stopped after 14 days a day. On the 15th day after administration, the blood samples were collected from the abdominal aorta of the three groups: the group of cancer pain elimination, the group of negative control group and the group of normal control. After blood collection, the liver was removed, the tumor tissue was stripped completely, the diameter and weight of the tumor were measured and recorded. The expression of AFP was detected by ELISE and the ratio of CD3 ~ CD4 ~ T cells to CD3 ~ CD8 ~ T cells in peripheral blood by flow cytometry. Results compared with the negative control group, the diameter and weight of the liver tumor in the Qiangtongxiaofang group were smaller than those in the negative control group, and the difference was statistically significant (P 0.05). Compared with the normal control group, the AFP increased significantly in the negative control group, and the expression level of AFP decreased significantly in the Qiitongxiaofang Fang group and the negative control group, the difference was statistically significant. The results showed that Qiitongxiaofang Fang had a certain inhibitory effect on the growth of transplanted liver cancer in rats, and there was significant difference between the normal control group and the negative control group. The ratio of CD3 ~ CD4T cells and CD3- / CD3- / CD8T cells in the negative control group was significantly lower than that in the normal control group (P 0.05), while the CD3 ~ CD8 ~ T cell in the negative control group was higher than that in the normal control group (P 0.05). The results showed that T lymphocyte immune function was low and immunosuppression existed in transplanted liver cancer rats. Compared with the negative control group, the ratio of CD3 ~ CD4T cells and CD3- CD4- / CD3- CD8T cells increased, but the CD3- CD8T cells decreased, which suggested that Qiantongxiaofang could promote the expression of CD3- CD4T and inhibit the expression of CD3- CD8T in transplanted liver cancer rats. That is to say, Qiantongxiao can improve the immunosuppressive state of the body by improving the immune function of T lymphocytes in transplanted liver cancer rats. Conclusion: 1. Qiantongxiaofang has a certain inhibitory effect on the growth of transplanted liver cancer in rats. CD3 ~ CD4 ~ T cells and CD3 ~ CD _ 4 ~ / CD _ 3 ~ / CD ~ 8 ~ ratios in peripheral blood of transplanted liver cancer rats decrease, but CD3 ~ CD8 ~ T cells increase, and the ratio of CD3 ~ CD4 ~ T cells and CD3 ~ CD4 ~ / CD8 ~ T cells in peripheral blood of transplanted hepatocarcinoma rats are increased. The results showed that the immune function of T lymphocytes in transplanted hepatoma rats was low and the immunosuppressive condition was 3. Qiantongxiaofang could improve the immune function of T lymphocytes and improve the immunosuppressive state of transplanted hepatoma rats and play a role in anticancer by improving the immune function of transplanted hepatoma rats.
【学位授予单位】：广西中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R273

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本文编号：1881943