参麦注射液关节腔注射治疗膝骨关节炎的实验和临床研究

发布时间：2018-06-01 01:37

  本文选题：膝骨关节炎 + 参麦注射液　； 参考：《广州中医药大学》2016年博士论文

【摘要】：目的：膝骨关节炎(Knee osteoarthritis简称KOA)又名膝退行性骨关节病、老年性膝关节炎、肥大性膝关节炎,是临床常见的一种骨关节病。其特征是以膝关节软骨面发生原发性或继发性退变及结构紊乱,伴随软骨下骨质增生、硬化、软骨剥脱,继而使膝关节逐渐破坏、畸形,最终出现膝关节功能障碍的一种退行性骨关节疾病。KOA是多数病人软骨、肌肉、韧带等不同组织病变综合作用的结果。本课题探讨参麦注射液关节腔注射对兔膝关节骨关节炎模型软骨退变的保护机制以及观察其治疗膝骨关节炎的临床疗效,为临床应用参麦注射液防治骨关节炎提供研究依据,也为以后进一步的研究奠定基础。方法：实验研究：40只SPF级新西兰大白兔,随机分成4组,每组10只,分别为正常组、模型组、参麦干预组(简称参麦组)和玻璃酸钠干预组(简称玻璃酸钠组)。模型组、参麦组和玻璃酸钠组采用无菌条件下切除新西兰兔右膝前交叉韧带和内侧半月板造模(改良Hulth法)。术后连续5天术兔肌肉注射青霉素50万单位预防感染。术后一周后参麦组和玻璃酸钠组予相应的药物进行膝关节腔内注射治疗；模型组予生理盐水行膝关节腔注射,每周一次,所有动物每天驱赶30分钟。药物治疗5周后,用空气栓塞法处死动物。再分别用组织学、RT-PCR和生物化学等技术对兔KOA模型关节软骨、关节液和关节滑膜等部位进行检测和评估。本实验研究部分分四个实验进行：(1)切开实验侧兔膝关节,用肉眼观察兔股骨关节面大体结构的病理变化;切取适量关节软骨制作成普通光学显微镜切片和透射电子显微镜切片,观察关节软骨超微病理变化。并按照Mankin关节软骨组织学评分系统对光镜下软骨组织的病理变化进行半定量评分,并比较各组间的差异;(2)在切开膝关节之前抽取关节液,检测关节液中NO、IL-1β的含量;观察比较各组关节滑膜的炎症表现及程度;(3)取兔关节软骨,用RT-PCR技术检测药物干预治疗对兔KOA动物模型中关节软骨MMP-3, MMP-13, TIMP-1mRNA表达的影响;(4)切取适量的兔股骨髁负重关节面软骨组织,用免疫组化法分别测量GAG含量和Ⅱ型胶原阳性染色面积,并比较各组间的差异。临床研究：选取2015年1月-2016年1月我院骨科门诊以及住院治疗的以膝骨关节炎患者为研究对象。符合西医诊断为单侧“膝骨关节炎患者”且中医诊断为“膝痹”属“肝肾亏虚”的患者90例。采用随机数字法将90例患者随机分为2组,为参麦注射组和玻璃酸钠注射对照组,每组45例。治疗前后采用WOMAC评分评价治疗疗效。正态分布的计量资料用均数±标准差(x±s)表示,采用配对t检验分析膝关节炎患者使用参麦注射液以及玻璃酸钠对照组症状治疗前后改善之后的差异,P0.05认为两组数据的差异具有统计学意义。非正态分布的计量资料用中位数和四分位数表示,采用Wilcoxon法统计。组间比较用K-W检验判断其组间差异性,P0.05则有统计学意义。说明组间存在差异,使用Dunnett T3法进行多重比较,了解参麦注射液和玻璃酸钠组之间治疗效果的差异。结果：(1)肉眼观正常组兔关节软骨表面光滑,有弹性,浅蓝色,半透明,无裂纹、缺损及软化。模型组关节软骨表面大多呈黄色,斑片状或广泛性粗糙、糜烂,甚至出现裂纹、缺损及软化,失去弹性。参麦组和玻璃酸钠组关节软骨的病理变化肉眼观基本相同,表面大多呈黄色,斑片状或广泛性略显粗糙,未见明显裂纹或缺损。光镜、电镜观察发现,参麦组和玻璃酸钠组动物关节软骨细胞的形态、结构、排列等无明显差异性。(2)参麦组、玻璃酸钠组关节液中NO、IL-1β含量与模型组相比明显降低,有显著性差异(P0.01)。参麦治疗组关节液中NO、IL-1β含量与玻璃酸钠治疗组比明显降低,有显著性差异(P0.01)。(3)正常组关节软骨中,MMP-3,MMP-13的mRNA表达较低、而TIMP-1的表达较高;模型组关节软骨中MMP-3,MMP-13的mRNA表达明显增高,而TIMP-1表达明显降低。正常组与模型组比较,差异有显著性意义(P0.05)。各治疗组表达值比模型组显著降低(P0.05)。参麦治疗组与玻璃酸钠组相比有显著性差异(P0.05)。(4)各组GAG含量统计结果：①模型组与玻璃酸钠组比较,软骨基质中GAG含量无显著性差异(P0.05);②参麦组与玻璃酸钠组、模型组分别比较,参麦组软骨基质中GAG含量有显著性差异(P0.01);Ⅱ型胶原阳性染色面积统计结果：①模型组与玻璃酸钠组比较,阳性染色面积比无显著性差异(P0.05);②参麦组与玻璃酸钠组、模型组分布比较,参麦组阳性染色面积有显著性差异(P0.01)。(5)治疗前后疼痛比较：治疗一个疗程后,参麦治疗组以及玻璃酸钠对照治疗组患者膝关节疼痛有改善与好转,与治疗前相比较,组内差异有统计学差异(K-w检验,P=0.001)；参麦组治疗后与玻璃酸钠组相比,其差异有统计学意义(采用Dunnett T3多重比较,P=0.014);(6)治疗前后僵硬比较：治疗一个疗程后,参麦组和玻璃酸钠组患者膝关节僵硬评分均有改善与好转。与治疗前相比较,组内差异有统计学差异(K-w检验,P=0.000)；参麦组治疗后与玻璃酸钠组相比,其差异有统计学意义(采用Dunnett T3多重比较,P=0.018)。(7)治疗前后日常活动度比较：治疗一疗程后,参麦组以及玻璃酸钠对照组患者膝关节日常活动度评分均有改善与好转。与治疗前相比较,两组总体方差齐(F=0.171,P=0.843);经方差分析(F=0.075,P=0.928),结果提示在α=0.05的检验水准下治疗后两组在日常活动分值上差异无统计学意义。(8)治疗前后WOMAC评分总分比较：治疗一个疗程后,参麦组以及玻璃酸钠对照组患者膝关节日常活动度评分均有改善与好转。治疗前两组相比较,组内差异无统计学差异(F=0.524,P=0.594)；参麦组与玻璃酸钠对照组治疗前后评分比较,其差异有显著意义(数据正态分布,配对T检验P=0.001)。结论：(1)参麦注射液可以明显减少KOA动物模型关节液中NO、IL-1β含量,抑制炎症的效果明显；(2)参麦注射液关节腔注射治疗KOA动物模型,能抑制MMPs表达,增加TIMP-1表达,抑制关节软骨胶原的降解,从而延缓关节软骨退变;(3)参麦注射液关节腔注射治疗KOA动物模型,能提高ECM中GAG含量,促进型Ⅱ胶原的合成；(4)参麦注射液可促进KOA动物模型关节软骨细胞外基质合成,对新合成的基质降解有显著抑制作用。(5)本研究证实,参麦注射液治疗膝骨关节炎在缓解疼痛、改善关节僵硬的效果优过对照药物玻璃酸钠。上述实验和临床研究结果表明：参麦注射液能够促进Ⅱ型胶原合成、提高GAG含量,抑制ECM降解,减轻或控制KOA炎症反应；在临床治疗中可以缓解疼痛,改善关节功能。
[Abstract]:Objective : To study the protective mechanism of articular cavity injection of Shenmai injection on osteoarthritis of knee joint and to observe the clinical curative effect of articular cavity injection of Shenmai injection on osteoarthritis of knee joint .
The results were as follows : ( 1 ) To observe the pathological changes of articular cartilage , joint fluid and synovial membrane in rabbit KOA model after 5 weeks of treatment . There was no significant difference in the expression of MMP - 3 and MMP - 13 in articular cartilage of Shenmai group and sodium hyaluronate group ( P0.05 ) . ( 5 ) Before and after treatment , the pain of knee joint was improved and better after one course of treatment , compared with that before treatment ( K - w test , P = 0.001 ) .
Compared with the sodium hyaluronate group , the difference was statistically significant ( using Dunnett T3 multiple comparison , P = 0.014 ) ; ( 6 ) the stiffness of knee joint was improved and improved before and after treatment : compared with the prior treatment , there was statistical difference in the group difference ( K - w test , P = 0.000 ) ;
Compared with sodium hyaluronate group , there was significant difference in daily activity score between the two groups ( F = 0.171 , P = 0.843 ) .
Compared with the control group , the difference was significant ( data normal distribution , paired t - test P = 0.001 ) . Conclusion : ( 1 ) Shenmai injection can significantly reduce the content of NO and IL - 1尾 in joint fluid of KOA animal model , and inhibit the effect of inflammation .
( 2 ) The injection of Shenmai injection joint cavity injection in KOA animal model can inhibit the expression of MMP , increase the expression of TIMP - 1 , inhibit the degradation of articular cartilage collagen , delay the degeneration of articular cartilage , and ( 3 ) Shenmai injection joint cavity injection is used to treat KOA animal model , which can improve GAG content in ECM and promote the synthesis of type 鈪，

本文编号：1962355