电针缺血性脑卒中大鼠水沟穴对miR-221及靶基因eNOS的影响

发布时间：2018-06-12 08:51

本文选题：脑缺血 + 电针　；参考：《第二军医大学》2017年硕士论文

【摘要】：研究目的:本实验通过动物实验验证电针水沟穴对缺血性脑卒中大鼠的治疗作用,观察电针MCAO大鼠水沟穴对缺血半暗带区血管新生的影响,对大鼠大脑缺血半暗带区miR-221及靶基因eNOS的影响,探讨电针大鼠水沟穴对MCAO大鼠脑缺血后血管新生相关的miR-221的调控机制。研究方法:SD雄性成年大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和电针组,参照Longa法制作缺血性脑卒中大鼠模型(MCAO),于72h后取缺血半暗带区大脑皮质区组织,正常组和假手术组取相应部位组织,电针组大鼠选取水沟穴使用电针每天治疗30min,连续治疗3d。(1)Bederson五分法记录各组大鼠的神经功能缺损程度,观察电针水沟穴对MCAO大鼠神经缺损的影响;HE染色法和免疫组化法观察电针MCAO大鼠水沟穴对各组大鼠脑组织神经细胞形态学的改变和大脑缺血半暗带区以CD34为标记的血管新生的表达变化;(2)实时荧光定量PCR技术和western blot技术检测各组大鼠中动脉供血区大脑皮质区组织中miR-221及eNOS的表达变化。研究结果:1.(1)神经缺损评分结果显示:正常组和假手术组大鼠无神经缺损体征,两组比较,p0.05,无统计学意义;模型组和电针组大鼠有不同程度的神经缺损,与假手术组比较,模型组大鼠神经缺损程度明显增加,p0.01,有统计学意义;与模型组比较,电针组大鼠神经缺损程度明显降低,p0.01,有统计学意义。(2)HE结果显示:正常组和假手术组大鼠脑组织中的神经细胞排列均匀整齐,细胞轮廓清晰,结构完整,染色均匀,无细胞肿胀、坏死和破碎;模型组大鼠脑组织中的神经细胞明显肿胀,有坏死和破碎,细胞排列不整齐,染色不均匀,细胞数量明显减少,细胞核缩小甚至消失,细胞间隙增大;与模型组相比,电针组脑组织神经细胞肿胀程度较轻,细胞坏死、破碎相对较少,结构较完整,神经细胞数量相比模型组较多。(3)免疫组化结果显示:正常组和假手术组大鼠中动脉供血皮质区以CD34为标记的血管新生数量较少,两组比较无统计学意义,p0.05;模型组和电针组大鼠血管新生数量明显增加,与假手术组大鼠相比,模型组大鼠血管新生明显增多,p0.01,有统计学意义;与模型组大鼠相比,电针组大鼠血管新生程度更加显著,p0.01,有统计学意义。(4)实时荧光定量PCR结果显示:正常组和假手术组大鼠脑组织中miR-221表达量较少,两组比较无差异,p0.05;模型组和电针组mi R-221表达水平增高,与假手术组比较,模型组miR-221表达量显著增多,p0.01,有统计学意义;与模型组比较,电针组miR-221表达相对降低,p0.05,有统计学意义。正常组和假手术组大鼠脑组织中eNOS mRNA表达较少,两组比较无差异;与假手术组比较,模型组eNOS mRNA表达增高,p0.05,有统计学意义;与模型组比较,电针组eNOS表达显著增多,p0.01,有统计学意义。(5)Western blot结果显示:正常组和假手术组大鼠脑组织中eNOS蛋白表达较少,两组比较无差异;与假手术组比较,模型组eNOS蛋白表达增多,p0.01,有统计学意义;与模型组比较,电针组eNOS蛋白表达显著增多,p0.01,有统计学意义。结论:电针MCAO大鼠水沟穴通过调节miR-221的表达水平,影响eNOS的表达,促进缺血半暗带区血管新生的表达,降低神经缺损程度,此通路可能是参与血管新生的机制之一。
[Abstract]:Objective : To observe the effect of electroacupuncture ( EA ) on the angiogenesis of cerebral ischemic stroke in rats with cerebral ischemia in rats . The effect of electroacupuncture on the angiogenesis of rats with cerebral ischemia was studied . The results showed that : 1 . The results showed that the rats with cerebral ischemic stroke had no signs of nerve defect after cerebral ischemia in rats . ( 2 ) The results of HE showed that the neural cells in the brain tissues of the normal and sham operation groups were uniform and orderly , the cells were clear , the structure was complete , the staining was uniform , no cell swelling , necrosis and fragmentation were observed . Compared with the sham operation group , the expression level of eNOS mRNA in the model group was significantly increased , and the expression of eNOS mRNA in the model group was significantly increased . Compared with the model group , the expression of eNOS protein in the model group was significantly increased .
【学位授予单位】：第二军医大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R245.97

【参考文献】