【摘要】：研究目的:本研究通过电针足三里、肾俞穴干预T2DM大鼠,观察大鼠体重、血糖、胰岛素、胰岛B细胞功能相关指数以及胰岛B细胞形态变化,总结不同干预方法对大鼠疗效的影响。通过电针足三里、肾俞穴干预T2DM大鼠,对大鼠胰腺中葡萄糖转运蛋白-2(GLUT2)、葡萄糖激酶(GCK)蛋白和mRNA表达水平的影响,探讨电针足三里、肾俞穴对T2DM大鼠干预的可能机制。研究方法:①将40只雄性SD大鼠随机选取8只作为正常组,其余大鼠予高糖高脂饲料喂养50d后,按35mg/kg质量比腹腔注射2%STZ溶液进行T2DM造模,并将造模成功的32只大鼠随机分为模型组、电针足三里组、电针肾俞组、格列美脲灌胃组,每组8只。②各电针组分别取双侧"足三里"、"肾俞"穴进行电针治疗,电针参数为2Hz,2mA连续波20min/次,1次/d,6d/周,与电针组干预同步,格列美脲灌胃组按大鼠体质量10ml/kg进行灌胃,连续4周。③于干预前及干预的第1、2、3、4周末,称量各组大鼠的体质量;干预前及干预后,检测各组大鼠灌胃前空腹血糖(FBG)及口服葡萄糖耐量(OGTT)实验。④末次干预结束,收集标本,取各组大鼠血清,采用放免法测血清胰岛素(FINS),并计算胰岛素分泌指数(HOMA-B),取一部分大鼠胰腺组织于波恩氏液中固定,用HE染色观察胰腺的形态变化,另取部分大鼠胰腺组织于液氮中速冻,用Western blot法检测胰腺GLUT2、GCK的蛋白表达,Real-time PCR检测胰腺中GLUT2、GCK的mRNA表达水平。研究结果:疗效指标结果:①体质量:干预过程中,正常组体质量显著增加(P0.01),模型组体质量逐渐减少(P0.01或P0.05),电针足三里组、电针肾俞组、格列美脲灌胃组体质量干预前2周体质量仍减少,第3周开始逐渐增加,干预4周后,较前1周有显著增加(P0.01或P0.05);②FBG:干预4周后,模型组FBG显著高于同组干预前(P0.01),电针足三里组、电针肾俞组、格列美脲灌胃组FBG显著低于模型组(P0.01或P0.05);③FINS:相比于模型组,电针足三里组、电针肾俞组、格列美脲灌胃组FINS显著升高(P0.01或P0.05);④OGTT2h血糖下面积:干预4周后,模型组OGTT2h血糖下面积显著高于干预前(P0.05),相比于模型组,电针足三里组、电针肾俞组、格列美脲灌胃组OGTT 2h血糖下面积显著降低(P0.01或P0.05);⑤HOMA-B:模型组HOMA-B显著低于正常组(P0.01),电针足三里组、电针肾俞组、格列美脲灌胃组显著高于模型组(P0.01或P0.05);⑥胰岛B细胞形态:正常组胰岛形态完整呈椭圆形或柱状形,较大,胰岛细胞核均匀分布,排列紧密,胞浆丰富。模型组胰岛边界不清,体积明显变小,胰岛细胞数量减少且排列杂乱,细胞肿胀、坏死,可见细胞空泡变性。电针足三里组、电针肾俞组、格列美脲灌胃组与模型组比较,有不同程度的改善,胰岛边界较模型组清晰,体积增大,胰岛内细胞数量增加,排列也较均匀,细胞空泡变性减少。机制指标结果:(①GLUT2蛋白表达:与模型组相比,电针足三里组、电针肾俞组均能显著增加胰腺GLUT2蛋白表达(P0.01或P0.05);②GCK蛋白表达:与模型组相比,电针足三里组、电针肾俞组、格列美脲灌胃组均能显著增加胰腺GCK蛋白表达(P0.01或P0.05),且电针足三里组显著高于格列美脲灌胃组(P0.05);③GLUT2mRNA表达:与模型组相比,电针足三里组、电针肾俞组大鼠GLUT2的mRNA表达量均显著增加(P0.01);④GCKmRNA表达:与模型组相比,电针足三里组、电针肾俞组GCK的mRNA表达量均显著增加(PO.01或P0.05)。结论:①电针足三里穴、电针肾俞穴能够增加T2DM大鼠体质量,且需要积累到一定的针刺效应;能够降低FBG、OGTT2h血糖下面积,提高FINS、HOMA-B水平,改善胰岛B细胞形态;能够上调胰岛B细胞中GLUT2、GCK蛋白和mRNA的表达。②格列美脲灌胃能够增加T2DM大鼠体质量,且需要积累到一定药效;能够降低FBG、OGTT2h血糖下面积,提高FINS、HOMA-B水平,改善胰岛B细胞形态;能够上调胰岛B细胞中GCK的蛋白表达。③电针足三里穴在改善T2DM大鼠体质量、FBG、OGTT 2h血糖下面积、FINS、HOMA-B、胰岛B细胞形态等方面,优于格列美脲灌胃和电针肾俞穴,且格列美脲灌胃优于电针肾俞穴;电针足三里穴在上调T2DM大鼠胰岛B细胞中GLUT2、GCK蛋白和mRNA的表达方面,优于肾俞穴和格列美脲灌胃,且电针肾俞穴优于格列美脲灌胃。④电针足三里穴、电针肾俞穴改善T2DM大鼠症状和体征,可能通过上调胰岛B细胞中GLUT2、GCK蛋白和mRNA表达实现,且电针足三里穴的作用略优于电针肾俞穴,说明足三里穴调节葡萄糖代谢更为突出,有更全面的干预作用,具体机制仍需进一步研究。
[Abstract]:......
【学位授予单位】：北京中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2017
【分类号】：R245
【参考文献】
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